降钙素基因相关肽单克隆抗体的研制及初步鉴定

以人工合成的降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）一牛血清白蛋白（ＢＳＡ）偶联物（ＣＧＲＰ—ＢＳＡ）为免疫原，用微量脾内免疫法免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取其免疫脾细胞与小鼠ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，经间接ＥＬＩＳＡ法筛选、３次克隆化后，获得３株能稳定分泌抗ＣＧＲＰ单克隆抗体的杂交瘤细胞３Ｂ４、７Ｅ１１和８Ｆ２。用琼脂双扩散法鉴定，３Ｂ４为ＩｇＧ１亚类，７Ｅ１１和８Ｆ２均为ＩｇＭ类。杂交瘤细胞的染色体条数在９２～１１４条之间。特异性鉴定表明，３Ｂ４腹水（１：１００）与心钠素、甲状腺降钙素、绒毛膜促性腺激素和血管紧张素Ⅰ等８种抗原均无交叉反应。８Ｆ２腹水、３Ｂ４腹水及７Ｅ１１腹水的效价分别为：１．６×１０－５、３．１×１０－５及１．２５×１０－４。ＭｃＡｂ相加试验及竟争抑制试验均表明，３Ｂ４、７Ｅ１１和８Ｆ２分别识别不同的表位。以Ｗｉｓｔａｒ大白鼠为实验动物，各株杂交瘤细胞的腹水（１：１００）为样品，进行ＭｃＡｂ的动物阻断保护试验。即将大白鼠麻醉后颈动脉插管，单独注射ＣＧＲＰ（３μｇ／０．１ｍｌ只），血压下降６．６６５—９．３３３ｋＰａ；当注入ＣＧＲＰ（３μｇ）加ＭｃＡｂ８Ｆ２（１：１００）时，血压下降１１．９９７ｋｐａ，比?