无血清培养基与含血清培养基培养CHO细胞的比较

目的对无血清培养基与含血清培养基培养CHO细胞进行比较。方法应用两种培养基采用小方瓶培养CHO细胞,观察细胞维持时间、培养过程的形态变化及对血凝效价的影响。结果应用无血清培养基(A)培养CHO-C28细胞虽然可维持细胞正常生长,但贴壁不好,逐渐降低(A)加量情况可得到相应改善。结论 目前无血清培养基尚不能完全取代含血清培养基用于培养CHO细胞。

丁酸钠提高重组CHO细胞表达量的研究

目的提高CHO细胞表达外源目标蛋白产量。方法用不同浓度的丁酸钠处理重组CHO细胞,观察细胞数量,细胞形态,表达率,表达量的变化。结果当丁酸钠的浓度为1mM,2mM,5mM时,重组细胞的表达量有不同程度的提高。表达率与丁酸钠的浓度有关,也与丁酸钠加入的时间有关。传代24小时加药的细胞,经2mM,5mM丁酸钠处理后,表达量虽比对照组高,但细胞生长情况不好;传代48小时加药的细胞,经5mM丁酸钠处理后,表达量可提高5倍左右,但细胞数大大减少。当细胞长满瓶后(第7天)加入丁酸钠5mM,加药次日的表达量为对照组(不加药组)的9.5倍。细胞数也有所减少。上述实验表明,由于丁酸钠对细胞生长有抑制作用,表达量虽提高,但细胞数减少,不能达到增产的目的。因此我们设计了用正常培液与丁酸钠交替使用的方法,获得了良好的效果。5mM丁酸钠与正常培液交替处理,在加药后7天内所得的表达物产量为对照组的2.1倍。提高了重组CHO细胞表达目标蛋白的产量。结论丁酸钠的合理使用可提高目标蛋白的产量。