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miR-504靶向CHD1L抑制乳腺癌细胞侵袭的分子机制 被引量:5
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作者 王照岩 杨志一 +5 位作者 林祥博 陈智凯 李洪利 尹崇高 牟青杰 刘雨清 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1302-1307,共6页
目的探讨miR-504靶向染色质解旋酶DNA结合蛋白(chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene,CHD1L)抑制乳腺癌细胞侵袭的分子机制。方法 qRT-PCR检测人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)与乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MCF-7)中m... 目的探讨miR-504靶向染色质解旋酶DNA结合蛋白(chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene,CHD1L)抑制乳腺癌细胞侵袭的分子机制。方法 qRT-PCR检测人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)与乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MCF-7)中miR-504的表达量,同时检测miR-504在MDA-MB-231细胞中的转染效率;双荧光素酶实验检测miR-504与CHD1L是否存在结合靶点;qRT-PCR及Western blot法检测CHD1L mRNA和蛋白的表达水平;Transwell侵袭实验检测MDAMB-231细胞的侵袭能力;Western blot法检测p-Akt、MMP-2和MMP-9的表达情况。结果乳腺癌细胞中miR-504的表达量明显低于人正常乳腺上皮细胞(P <0. 05);miR-504在MDA-MB-231/miR-504组中的表达水平明显增高(P <0. 05);双荧光素酶实验检测显示miR-504能与CHD1L mRNA的3'-UTR结合;此外,过表达miR-504后CHD1L mRNA的表达水平无显著变化,但CHD1L蛋白表达水平显著降低(P <0. 05);与MDA-MB-231/NC组相比,MDA-MB-231/miR-504组侵袭能力明显降低,而MDA-MB-231/miR-504+CHD1L组侵袭能力比MDA-MB-231/miR-504+Con组明显增加;用表皮生长因子分别刺激转染不同质粒的MDA-MB-231细胞,与MDA-MB-231/NC组相比,MDA-MB-231/miR-504组中p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显降低(P <0. 05),而MDA-MB-231/miR-504+CHD1L组中p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平与MDA-MB-231/miR-504+Con组相比明显增加(P <0. 05)。结论 miR-504靶向CHD1L通过PI3K/Akt/MMP信号通路抑制乳腺癌细胞的侵袭。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 miR-504 chd1l PI3K/Akt/MMP 侵袭
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CHD1L在结肠癌中表达与沉默对人结肠癌细胞迁移与侵袭的影响 被引量:1
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作者 邓云刚 黄文峰 +3 位作者 赖剑 刘晓平 邓龙颖 章新华 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2014年第29期4415-4423,共9页
目的:分析chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene(CHD1L)基因在结直肠癌组织中的表达情况及CHD1L基因表达对结直肠癌细胞侵袭和转移能力的影响.方法:收集结直肠癌患者癌和癌旁组织,通过荧光定量PCR、免疫组织... 目的:分析chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene(CHD1L)基因在结直肠癌组织中的表达情况及CHD1L基因表达对结直肠癌细胞侵袭和转移能力的影响.方法:收集结直肠癌患者癌和癌旁组织,通过荧光定量PCR、免疫组织化学及Western blot检测CHD1L的表达情况,运用Transwell实验、划痕实验研究CHD1L对结直肠癌细胞侵袭和转移能力的影响.结果:CHD1L mRNA和蛋白在结直肠癌组织中表达水平显著高于与之对应的癌旁组织,差异有统计学意义;此外,结肠癌细胞株中CHD1L的表达普遍呈现高表达.结肠癌细胞LOVO和DLD-1中转染shRNA-CHD1L后,可以明显降低CHD1L的mRNA和蛋白的表达,同时明显抑制结肠癌细胞的侵袭和迁移能力.体内实验进一步发现降低SW620细胞中CHD1L的表达可以明显抑制肿瘤的肝、肺转移.结论:CHD1L在结直肠癌组织和细胞中呈现高表达,CHD1L在结直肠癌的侵袭和转移过程中发挥重要作用.CHD1L有可能成为治疗结直肠癌的新的靶点. 展开更多
关键词 chd1l 结直肠癌 侵袭 迁移 靶点
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CHD1L在结直肠癌中的表达及其对细胞增殖的影响
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作者 邓云刚 黄文峰 +3 位作者 赖剑 刘晓平 邓龙颖 章新华 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2014年第35期5432-5440,共9页
目的:检测chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene(CHD1L)在结直肠组织中的表达情况及探讨CHD1L基因对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞增殖和凋亡的影响.方法:通过荧光定量PCR、免疫组织化学检测80例CRC患... 目的:检测chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene(CHD1L)在结直肠组织中的表达情况及探讨CHD1L基因对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞增殖和凋亡的影响.方法:通过荧光定量PCR、免疫组织化学检测80例CRC患者癌组织和对应癌旁组织中CHD1L基因的表达情况;采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)、克隆形成实验及动物实验等观察CHD1L基因在CRC细胞增殖中的作用;利用流式细胞技术检测细胞凋亡.结果:76.25%(61/80)的CRC癌组织CHD1L基因的表达明显高于对应的癌旁组织;转染s h R N A-C H D1L至C R C细胞可以明显降低C H D1L基因的m R N A和蛋白的表达,同时M T T实验和克隆形成实验发现干扰C H D1L组细胞的增殖明显低于对照组.另外,流式细胞仪检测发现干扰CHD1L组较对照组细胞凋亡指数明显增加.裸鼠成瘤实验发现稳定低表达CHD1L组肿瘤体积和重量明显小于对照组.结论:CHD1L在结直肠组织呈现高表达,降低结直肠细胞中CHD1L的表达可明显抑制细胞增殖及肿瘤生长.CHD1L可能成为治疗CRC的新靶点. 展开更多
关键词 chd1l 结直肠癌 增殖 凋亡 裸鼠成瘤
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干扰CHD1L基因对肝内胆管细胞癌细胞系增殖和侵袭的影响 被引量:1
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作者 李师淼 花京文 +5 位作者 袁汀浩 丁炎宝 熊虎 李洁 曹青 黄长文 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期520-524,共5页
目的探讨沉默CHD1L基因对肝内胆管细胞癌(ICC)细胞系增殖和侵袭的影响。方法采用Western blot和q RT-PCR法检测三种ICC细胞系(RBE、HCCC-9810、HUCCT1)中CHD1L蛋白和mRNA的表达;选择CHD1L高表达的ICC细胞系,将CHD1L-RNAi转染该细胞后,用... 目的探讨沉默CHD1L基因对肝内胆管细胞癌(ICC)细胞系增殖和侵袭的影响。方法采用Western blot和q RT-PCR法检测三种ICC细胞系(RBE、HCCC-9810、HUCCT1)中CHD1L蛋白和mRNA的表达;选择CHD1L高表达的ICC细胞系,将CHD1L-RNAi转染该细胞后,用Western blot法筛选出干扰效果最好的CHD1L-RNAi;应用CCK-8法、平板克隆集落形成实验、细胞划痕实验和Transwell迁移和侵袭实验检测转染CHD1L-RNAi后细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。结果 CHD1L蛋白和mRNA水平在RBE细胞系中明显高于HCCC-9810和HUCCT1细胞系(P=0.003,P=0.012和P=0.008,P=0.015);CHD1L-RNAi1的干扰效果明显优于CHD1L-RNAi2和CHD1L-RNAi3(P=0.003,P=0.008);干扰CHD1L的表达,结果显示CHD1L-RNAi1组的增殖率、集落形成数、迁移率和穿膜的细胞数明显低于未处理组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论干扰CHD1L基因能有效抑制RBE细胞系的增殖、迁移及侵袭能力。 展开更多
关键词 chd1l RNAI 肝内胆管细胞癌 增殖 迁移 侵袭
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CHD1L在癌症中相关分子机制的研究进展 被引量:3
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作者 李师淼 花京文 黄长文 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第4期445-448,共4页
Chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene(CHD1L)是一种新发现的位于染色体1q21致癌基因,主要通过细胞增殖、G1/S期的转变、抑制凋亡、染色质不稳定等机制致癌,并被认为是影响癌症的进程、预后和生存率的独立标... Chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene(CHD1L)是一种新发现的位于染色体1q21致癌基因,主要通过细胞增殖、G1/S期的转变、抑制凋亡、染色质不稳定等机制致癌,并被认为是影响癌症的进程、预后和生存率的独立标志物。CHD1L活化的潜在机制可能是通过与Parp1、凋亡蛋白Nur77结合破坏细胞死亡程序,或者通过介导目的基因ARHGEF9、TCTP、SPOCK1、NTKL发挥相应功能。文中主要介绍了CHD1L在癌症中的作用和相关分子机制的研究进展。 展开更多
关键词 chd1l 癌症 分子机制
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CHD1L、ECRG4蛋白在早期宫颈鳞癌中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 符建桃 黄守国 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2020年第2期125-129,共5页
目的:探讨CHD1L、ECRG4蛋白表达与早期宫颈鳞癌恶性生物学行为的关系。方法:免疫组化SP法检测48例宫颈鳞癌、40例宫颈鳞状上皮内病变(SIL)及20例正常宫颈组织中CHD1L、ECRG4蛋白的表达情况及定位分布,并结合宫颈鳞癌患者临床病理资料进... 目的:探讨CHD1L、ECRG4蛋白表达与早期宫颈鳞癌恶性生物学行为的关系。方法:免疫组化SP法检测48例宫颈鳞癌、40例宫颈鳞状上皮内病变(SIL)及20例正常宫颈组织中CHD1L、ECRG4蛋白的表达情况及定位分布,并结合宫颈鳞癌患者临床病理资料进行分析。结果:CHD1L蛋白在正常宫颈组织、SIL、宫颈鳞癌组织中呈递增表达,而ECRG4蛋白则呈递减表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。早期宫颈鳞癌组织中,CHD1L蛋白阳性率与肿瘤FIGO分期及淋巴结转移呈正相关(P<0.05),而与患者年龄、肿瘤分化程度无关(P>0.05);ECRG4蛋白阳性率仅与肿瘤分化程度呈负相关(P<0.05),而与患者年龄、FIGO分期及淋巴结转移无相关性(P>0.05)。Spearman等级相关分析表明,宫颈鳞癌中CHD1L与ECRG4蛋白表达水平呈负相关(r=-0.402,P<0.05)。结论:CHD1L与ECRG4负相互作用,共同参与了宫颈鳞癌的发生与恶性化过程,有望成为监测宫颈鳞癌进展的潜在分子标记物。 展开更多
关键词 早期宫颈鳞癌 免疫组化 chd1l ECRG4
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ALC1/CHD1L与OV6在肝癌细胞中的共存及其对干性相关转录因子表达的影响
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作者 冯丽 董文伟 +2 位作者 刘珊珊 刘玉荣 马宁芳 《解剖学研究》 CAS 2015年第1期1-5,共5页
目的探讨ALC1/CHD1L与OV6阳性肝癌细胞的关系及其对干性相关转录因子表达的影响。方法细胞免疫荧光标记方法观察肝癌Huh7及Hep G2细胞中ALC1/CHD1L和OV6的表达及定位;q RT-PCR检测ALC1/CHD1L sh RNA干扰后对肝癌Huh7及Hep G2细胞干性相... 目的探讨ALC1/CHD1L与OV6阳性肝癌细胞的关系及其对干性相关转录因子表达的影响。方法细胞免疫荧光标记方法观察肝癌Huh7及Hep G2细胞中ALC1/CHD1L和OV6的表达及定位;q RT-PCR检测ALC1/CHD1L sh RNA干扰后对肝癌Huh7及Hep G2细胞干性相关分子Oct4、Sox2、Nanog、Bmi1、β-catenin表达的影响。结果细胞免疫荧光标记结果显示肝癌Huh7细胞和Hep G2细胞中均有ALC1/CHD1L与OV6的表达,两者共表达率为34.3%及48.34%;ALC1/CHD1L sh RNA干扰及q RT-PCR实验结果显示敲减Huh7及Hep G2细胞ALC1/CHD1L表达可引起Oct4、Sox2、Nanog、Bmi1、β-catenin等干性相关分子表达下降,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论肝癌Huh7及Hep G2 OV6阳性细胞中有ALC1/CHD1L表达;敲减ALC1/CHD1L表达可引起Huh7及Hep G2细胞干性相关分子Oct4、Sox2、Nanog、Bmi1、β-catenin表达明显下调。 展开更多
关键词 ALC1/chd1l 肝癌细胞 OV6 肿瘤干细胞
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沉默CHD1L对前列腺癌PC3细胞恶性生物学行为的影响及其可能机制 被引量:1
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作者 崔发财 陈瑜 秦望森 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期484-489,共6页
目的:探讨染色质解旋酶DNA结合蛋白1样基因(chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene,CHD1L)对前列腺癌细胞侵袭、迁移能力的影响及其可能的作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR技术检测前列腺癌细胞株LNCAP、PC3... 目的:探讨染色质解旋酶DNA结合蛋白1样基因(chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene,CHD1L)对前列腺癌细胞侵袭、迁移能力的影响及其可能的作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR技术检测前列腺癌细胞株LNCAP、PC3、DU145以及前列腺上皮细胞株RWPE-1中CHD1L mRNA表达水平;转染siRNA干扰前列腺癌PC3细胞CHD1L的表达,并用Transwell侵袭实验和划痕实验分析沉默CHD1L对前列腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响;Western blotting检测PC3细胞MMP-9、N-钙黏蛋白和E-钙黏蛋白的表达水平。结果:CHD1L mRNA在前列腺癌细胞中的表达水平明显高于前列腺上皮细胞(P<0.01),其中以前列腺癌PC3细胞的表达水平最高。侵袭实验中,干扰组的穿膜细胞数明显低于阴性对照组和空白对照组[(49.67±6.67)vs(113.67±5.69)和(112.00±12.49)个,P<0.05)。划痕实验中,干扰组48 h伤口愈合率也低于阴性对照组和空白对照组[(21.27±3.27)%vs(48.47±5.72)%和(49.93±3.35)%,P<0.05]。干扰组细胞MMP-9和N-钙黏蛋白表达下调,E-钙黏蛋白表达上调。结论:沉默CHD1L可降低前列腺癌PC3细胞的侵袭迁移能力,该作用可能是通过调控MMP-9和EMT相关蛋白表达实现的。 展开更多
关键词 前列腺癌 染色质解旋酶DNA结合蛋白1样基因 侵袭 迁移
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CRISPR/Cas9载体优化及CHD1L条件性敲除肝癌细胞系的构建 被引量:1
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作者 黄丽 刘珊珊 +2 位作者 张晓锋 白银山 刘铭 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第1期39-44,共6页
目的利用优化的pLV-Tet3G-CRISPR/Cas9载体系统构建条件性敲除CHD1L的QGY-7703肝癌细胞系,验证敲除效果及其对细胞生物学的影响,为研究CHD1L促肿瘤细胞恶性表型机制提供重要的细胞模型。方法用点突变方法优化pLV-Tet3G-Cas9载体以降低... 目的利用优化的pLV-Tet3G-CRISPR/Cas9载体系统构建条件性敲除CHD1L的QGY-7703肝癌细胞系,验证敲除效果及其对细胞生物学的影响,为研究CHD1L促肿瘤细胞恶性表型机制提供重要的细胞模型。方法用点突变方法优化pLV-Tet3G-Cas9载体以降低其脱靶效应,进而将Cas9改造成eSpCas9;其次,通过筛选获得稳定表达eSpCas9的QGY-7703细胞株;将mCherry基因插入载体pLVXhU6-SgRNA中,获得携带mCherry荧光基因的pLVX-mCherry-hU6-SgRNA载体;设计和筛选特异性靶向CHD1L的SgRNA序列,用重叠PCR方法获得hU6-CHD1L-SgRNA片段,筛选具有CHD1L切割活性的靶点,随后,将其克隆到pLVX-mCherry-hU6-SgRNA载体中;用293FT细胞进行病毒包装,获得慢病毒颗粒;转染7703eSpCas9细胞株,利用Western blot验证Dox诱导下的CHD1L敲除效果,划痕和Transwell实验检测Dox诱导的CHD1L敲除对肝癌细胞生物学功能的影响。结果 pLV-Tet3G-Cas9载体Cas9成功优化为eSpCas9序列;成功构建pLVX-mCherry-hU6-CHD1L-SgRNA载体;通过转染及筛选,获得Dox诱导的CHD1L敲除QGY-7703肝癌细胞系;细胞实验显示Dox可诱导eSpCas9表达,靶向性切割CHD1L,抑制QGY-7703细胞的迁移侵袭。结论成功构建Dox诱导的CHD1L敲除肝癌细胞株,此载体系统可为靶向肿瘤特异性基因研究提供细胞模型。 展开更多
关键词 CRISPR/eSpCas9 chd1l SgRNA 肝癌细胞
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miR-3a通过CHD1L的负调控抑制肝癌的增殖、迁移和侵袭 被引量:1
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作者 张晓雪 吴孝雄 《山西医科大学学报》 CAS 2020年第11期1166-1170,共5页
目的探究miR-3a通过CHD1L的负调控抑制肝癌的增殖、迁移和侵袭的机制。方法人肝癌细胞株A549细胞分为阴性对照组、空白对照组(只加转染试剂)、miR-3a类似物转染组。采用RT-PCR法和Western blot方法分别检测各组细胞内CHD1L mRNA水平及... 目的探究miR-3a通过CHD1L的负调控抑制肝癌的增殖、迁移和侵袭的机制。方法人肝癌细胞株A549细胞分为阴性对照组、空白对照组(只加转染试剂)、miR-3a类似物转染组。采用RT-PCR法和Western blot方法分别检测各组细胞内CHD1L mRNA水平及其蛋白表达情况,采用细胞流式细胞仪测定miR-3a转染后细胞总数和存活率,采用MTT检测转染miR-3a类似物对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响,采用Transwell检测转染miR-3a类似物对肝癌细胞侵袭能力的影响。结果与阴性对照组及空白对照组相比,miR-3a类似物转染组CHD1L mRNA表达水平及其蛋白表达水平明显降低(P<0.05),肝癌细胞内细胞存活数也明显降低(P<0.05),肝癌细胞的增殖能力下降(P<0.05),迁移和侵袭能力降低(P<0.05)。结论miR-3a可能通过CHD1L的负调控进而抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 miR-3a chd1l 肝癌 增殖 迁移 侵袭
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CHD1L对胃癌细胞增殖、侵袭及转移的影响 被引量:1
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作者 李迪诺 李谌 《锦州医科大学学报》 2021年第4期66-71,共6页
目的研究胃癌细胞生物学行为是否受沉默CHD1L的调控。方法(1)筛选沉默效率最高的干扰组进行后续试验;(2)蛋白p53、p21、Nur77、ARHGEF9在沉默CHD1L后表达水平利用Western Blot免疫印迹进行测定;(3)CHD1L沉默对胃癌细胞凋亡和增殖的影响... 目的研究胃癌细胞生物学行为是否受沉默CHD1L的调控。方法(1)筛选沉默效率最高的干扰组进行后续试验;(2)蛋白p53、p21、Nur77、ARHGEF9在沉默CHD1L后表达水平利用Western Blot免疫印迹进行测定;(3)CHD1L沉默对胃癌细胞凋亡和增殖的影响分别采用流式细胞术和MTT比色法测定;(4)沉默CHD1L后对胃癌上皮细胞-间充质转化的影响采用Transwell小室侵袭、细胞划痕愈合实验测定。结果(1)CHD1L-shRNA-1沉默效果最好,表达量下调58.60%;(2)p53、p21、Nur77、ARHGEF9表达量伴随CHD1L的沉默呈现明显上升趋势;(3)胃癌MGC-823细胞中CHD1L被沉默后S、G1期细胞数量呈现明显的减少与增多趋势,细胞增殖的抑制率和凋亡数量与时间呈正相关(P<0.05);(4)胃癌MGC-823中CHD1L被沉默后穿膜细胞数量明显减少为(58.63±10.97)个、细胞迁移距离缩短为(0.54±0.34)μm(P<0.05)。结论MGC-823细胞的侵袭力和迁移能力在沉默CHD1L受到明显的抑制。 展开更多
关键词 胃癌 chd1l 侵袭 转移
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miR-6883-3p靶向CHD1L抑制肝癌细胞的恶性表型
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作者 刘珊珊 陈晓钢 +4 位作者 崔慧情 曹智铭 王爽爽 黄丽 马宁芳 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第16期2891-2896,共6页
目的:寻找可靶向调控恶性肿瘤相关染色质解旋因子CHD1L的miRNAs分子,确证该调控模式对肝癌细胞恶性表型的影响。方法:通过生物信息学分析预测并筛选可靶向结合CHD1L的miRNAs,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及蛋白印迹分析(Western Blot)方法... 目的:寻找可靶向调控恶性肿瘤相关染色质解旋因子CHD1L的miRNAs分子,确证该调控模式对肝癌细胞恶性表型的影响。方法:通过生物信息学分析预测并筛选可靶向结合CHD1L的miRNAs,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及蛋白印迹分析(Western Blot)方法验证所筛选的miRNAs对肝癌细胞CHD1L表达的影响,明确可转录后调控CHD1L表达的关键miRNA分子;qRT-PCR检测肝癌组织中miRNAs和CHD1L的表达,并对其表达进行相关性分析;MTS、细胞划痕、Transwell迁移实验验证目标miRNA分子对肝癌细胞恶性表型的影响。结果:生物信息学分析结果显示miR-6883-3p可显著下调肝癌细胞CHD1L表达。双荧光素酶报告实验检测结果证明miR-6883-3p可直接靶向结合CHD1L 3'UTR端。临床肝癌组织样本qRT-PCR检测及统计学分析结果显示CHD1L高表达于肝癌组织,而miR-6883-3p则高表达于癌旁组织,二者表达呈负相关。miR-6883-3p模拟物(mimic)可明显抑制肝癌细胞增殖、促进细胞凋亡、抑制细胞迁移;而miR-6883-3p抑制剂(inhibitor)可显著促进肝癌细胞增殖、促进细胞迁移。与对照组(Mock)相比,miR-6883-3p mimic组肝癌细胞内ALB表达则随着CHD1L表达的下调而增加,HNF-4α及AFP随着CHD1L表达的下调而减少,反之亦然。结论:miR-6883-3p通过靶向调控CHD1L表达,抑制肝癌细胞的恶性表型。 展开更多
关键词 染色质解旋/三磷酸腺苷酶染色体结合蛋白类似物-1 微小RNA-6883-3p 人肝癌细胞 细胞表型
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过表达CHD1L基因对结肠癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响 被引量:2
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作者 马海芳 李发勇 《中国卫生检验杂志》 CAS 2016年第7期1010-1012,共3页
目的初步探索人CHD1L基因在结肠癌细胞中的生物学功能。方法取肝癌患者手术切除肝癌标本并提取总RNA逆转录为c DNA,扩增CHD1L基因CDS序列,插入p LVX-puro慢病毒质粒,脂质体感染人SW480结肠癌细胞。Puro筛选建立稳定转染细胞株。免疫印... 目的初步探索人CHD1L基因在结肠癌细胞中的生物学功能。方法取肝癌患者手术切除肝癌标本并提取总RNA逆转录为c DNA,扩增CHD1L基因CDS序列,插入p LVX-puro慢病毒质粒,脂质体感染人SW480结肠癌细胞。Puro筛选建立稳定转染细胞株。免疫印迹证实CHD1L基因在SW480结肠癌细胞高效表达。CCK-8方法检测SW480结肠癌细胞增殖,Transwell方法检测SW480结肠癌细胞侵袭和迁移。结果 Western blot证实成功构建p LVX-CHD1Lpuro重组质粒及CHD1L基因成功在SW480结肠癌细胞中高效稳定表达,且CHD1L基因能够促进SW480结肠癌细胞过度增殖、侵袭和迁移。结论过度表达CHD1L基因显著促进SW480结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 染色质解旋酶DNA结合蛋白1样基因 增殖 迁移 结肠癌细胞
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