对叶百部总生物碱对CHL细胞活性的影响

目的:探讨对叶百部总生物碱对中国仓鼠肺细胞CHL活性的影响。方法:以对叶百部总生物碱为指标成分,通过采用MTT比色法检测不同的含药浓度(10μg/mL、22μg/mL、50μg/mL、112μg/mL、250μg/mL)对CHL细胞存活的影响。结果:MTT比色法检测,在不同药液浓度(10μg/mL、22μg/mL、50μg/mL、112μg/mL、250μg/mL)干预CHL细胞24 h后,与空白组比较,对叶百部总生物碱250μg/mL及以下药液浓度对存活率均无显著差异(P>0.05),说明对叶百部总生物碱浓度在250μg/mL及以下对CHL细胞无明显毒性作用。结论:在本实验条件下,对叶百部总生物碱(10~250μg/mL)对中国仓鼠肺细胞株CHL细胞无明显的细胞毒性作用。

乌头类中药对CHL细胞的DNA损伤作用

[目的]观察乌头类中药盐附子和乌头碱对CHL细胞(中国仓鼠肺成纤维细胞)的DNA损伤作用。[方法]采用单细胞凝胶电泳法检测盐附子、乌头碱对CHL细胞DNA即刻损伤的影响。在加和不加S9时,盐附子均设5个剂量组(终浓度分别为5、2.5、1.25、0.625、0.313 mg生药∕ml)、乌头碱设4个剂量组(终浓度分别为100、50、25、5μg/ml),试验同时设PBS阴性对照组和阳性对照组,阳性对照在不加S9时为0.1 mmol/ml重铬酸钾,加S9时为80μg/ml环磷酰胺。[结果]在加和不加S9时,盐附子各浓度组拖尾细胞率和拖尾细胞尾长与阴性对照比较差异无统计学意义(P﹥0.05),乌头碱100μg/ml和50μg/ml组拖尾细胞率和拖尾细胞尾长与阴性对照之间差异有统计学意义(P﹤0.05),乌头碱各浓度组拖尾细胞率和拖尾细胞尾长存在剂量反应关系。[结论]在本试验条件下,加与不加S9时,乌头碱浓度为100μg/ml和50μg/ml时对CHL细胞有DNA损伤作用;盐附子5、2.5、1.25、0.625、0.313 mg生药/ml时未观察到对CHL细胞有DNA损伤作用。

二氧化硫体内衍生物诱发CHL细胞染色体畸变效应

研究了ＳＯ_２在体内的衍生物一亚硫酸氢钠和亚硫酸钠对中国仓鼠肺纤维细胞（ＣＨＬ）细胞染色体畸变（ＣＡ）的诱发作用研究结果表明，ＳＯ_２的衍生物不论是否有Ｓ_９混合物的存在情况下，均可诱发ＣＨＬ细胞的ＣＡ频率显著增高，且呈明确的剂量一效应关系．这说明ＳＯ_２不需要体内代谢转化的直接的细胞染色体断裂剂和基因毒性因子研究亦发现，ＳＯ_２产低浓度下主要诱发染色单体型畸变，在高浓度下既可引起染色单体型畸变，又可引起染色体型畸变研究还发现，ＳＯ_２衍生物处理细胞时间愈长，引起细胞遗传损伤所需的最低浓度就越低．提示：长期接触环境低浓度ＳＯ_２污染，有引起接触人群体内细胞遗传物质损伤的潜在危险。

白眉蝮蛇毒精氨酸酯酶对CHL细胞增殖抑制和染色体畸变的影响

研究了蝮蛇清栓酶的有效成分精氨酸酯酶体外对中国仓鼠肺成纤维细胞 (CHL)增殖和染色体畸变的影响 .精氨酸酯酶的浓度以酶活单位U表示 .细胞增殖抑制试验和染色体畸变试验都用两种方法 :直接法和代谢活性法 .精氨酸酯酶设 3个浓度 :1.0× 10 -3 U /mL ,0 .5× 10 -3 U /mL和 0 .2 5× 10 -3U/mL .其中最高浓度比临床治疗浓度高约10 0倍 .细胞增殖抑制试验采用细胞贴壁培养 ,乙醇固定 ,结晶紫染色 ,单层细胞密度计测定细胞密度 .染色体畸变试验采用给药后 2 4h和 48h收集中期分裂细胞 ,低渗固定 ,制片 ,Giemsa染色 ,观察 10 0个中期分裂细胞的染色体结构异常及多倍体的出现率 .试验结果表明 ,精氨酸酯酶在上述浓度对CHL细胞的增殖没有抑制作用 ,对CHL细胞的染色体结构也没有影响 .表 2参

松胞素B对人血淋巴细胞和CHL细胞微核率的影响

研究了不同浓度的松胞素B对人血淋巴细胞和中国仓鼠肺成纤维细胞 (CHL)分裂周期和微核率的影响 .结果表明 ,松胞素B浓度过高能引起细胞微核率增高 .在本研究中 ,对CHL细胞微核率试验以 3μg/mL松胞素B较适合 ;而对人血淋巴细胞微核试验 ,松胞素B浓度以 2～ 4μg/mL为宜 ,松胞素B浓度过高会提高微核背景值 ,降低试验的灵敏度和精确性 .表 4参

实时动态监测纳米氧化铜作用于CHL细胞的毒性效应

目的：探讨纳米氧化铜连续作用于CHL细胞的毒性效应。方法：应用实时细胞分析仪（RTCA）对不同接种密度（1×105、5×10~4、2.5×10~4、1.25×10~4/mL）的CHL细胞进行140 h连续测定,绘制不同密度CHL细胞的生长曲线。继而对不同剂量（0、2、1、0.5、0.25、0.125、0.062 5、0.031 3 mg/mL）的纳米氧化铜作用于CHL细胞所产生的毒性效应进行实时监测,得到不同作用时间的IC_（50）值,绘制连续时间点IC_（50）变化的曲线,以判定纳米氧化铜作用于CHL细胞所产生的毒性效应。结果：4种不同密度CHL细胞接种后,细胞达到对数生长期的时间有所不同,其中5×10~4/mL密度最适合进行毒性效应试验。不同剂量纳米氧化铜染毒后,毒性作用起始时间为4~5 h,加入受试物后,前6h的IC_（50）值较高,且波动较大。从6h以后,IC_（50）值呈现明显下降,作用12、24、36、48 h的IC_（50）值分别为0.157 0、0.0511、0.0429和0.016 8 mg/mL。结论：使用RTCA实时动态监测系统测定纳米材料的细胞毒性具有实用性。在纳米氧化铜对CHL细胞所产生毒性作用的进一步研究工作中,对染毒后4~18 h所产生的毒性作用进行研究更有意义。

染色体畸变试验中不同有机溶剂对CHL细胞毒性的比较

目的:研究9种不同的有机溶剂不同体积分数下对体外培养的CHL细胞的毒性作用。方法:采用MTT法,对0.1%、0.3%、1%、3%和10%体积分数下DMSO、二氧六环、乙腈、丙酮、四氢呋喃、甘油、冰醋酸、甲醇和乙醇对CHL细胞的抑制率进行测定,计算出细胞抑制率达20%时各溶剂的体积分数。结果:DMSO、二氧六环、乙腈、丙酮、四氢呋喃、甘油、冰醋酸、甲醇和乙醇对CHL细胞抑制率达20%时,体积分数分别为1.0%、0.2%、1.5%、5.4%、0.2%、3.2%、0.000 07%、1.7%和2.1%。结论:在进行染色体畸变试验时,应充分了解受试物特点,并在此基础上根据溶剂的特点及毒性选择合适的溶剂。

0.4mT工频磁场对CHL细胞微丝装配的影响

目的探讨0.4mT工频磁场对中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)微丝(F-actin)装配的影响及作用机制。方法用免疫荧光染色法标记F-actin,激光共聚焦荧光显微镜观察F-actin形态并拍照,用W estern-b lotting方法检测了与去垢剂不可溶的细胞骨架相连的表皮生长因子受体(EGFR)蛋白的含量。结果0.4 mT工频磁场辐照CHL细胞30m in导致细胞F-actin应力纤维减少,在细胞周边出现丝状伪足,磁场对CHL细胞F-actin形态的影响与细胞经50nmol/L的表皮生长因子(EGF)作用30m in类似,且磁场和EGF都使与去垢剂不可溶的细胞骨架相连的EGFR增多。结论0.4mT工频磁场辐照导致CHL细胞F-actin装配发生变化,磁场对F-actin的影响可能与磁场诱导表皮生长因子受体聚集,并引起信号向下传递有关。

一种新来源天然冰片对CHL细胞的细胞毒性及染色体畸变作用研究

应用MTT法检测不同浓度的天然冰片对中国仓鼠肺成纤维(CHL)细胞的细胞毒性,并考察了天然冰片对CHL细胞的染色体畸变效应。发现MTT还原量、生成甲臢的光密度(OD)值与天然冰片之间存在剂量关系,24 h的50%细胞生长抑制浓度(IC50)为207.86μg·mL-1。染色体畸变试验剂量为200,100,50,25,12.5μg·mL-1,于加药(+/-S9mix)后24 h收获细胞,制备染色体。各剂量组的染色体畸变率<5%;空白及溶剂对照组的染色体畸变率均在正常范围内;而阳性对照剂诱发的染色体细胞畸变率>20%;各剂量组与溶剂对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结果表明:天然冰片无诱发CHL细胞染色体畸变作用。

低剂量亚硝酸钠诱导CHL细胞DNA损伤的适应性反应

目的:研究低剂量亚硝酸钠(NaNO2)诱导CHL细胞DNA损伤的适应性反应及其形成机制。方法:采用单细胞凝胶电泳试验检测DNA的损伤程度。分别以浓度为0.01mg/L、0.1mg/L和1mg/L的NaNO2预处理CHL细胞6h后,观察细胞对随后的1g/L冲击剂量NaNO2的适应性反应;用3-氨基苯甲酰胺(3-AB)分别在低剂量预处理前和预处理6h后抑制聚ADP核糖聚合酶(PARP-1)的活性,观察其对适应性反应的阻断情况。结果:未经低剂量预处理的细胞,接触1g/L的NaNO218h后,DNA损伤较严重,其细胞拖尾率为7.87%,明显高于正常对照组(P<0.01);浓度为0.01mg/L和0.1mg/L的NaNO2预处理CHL细胞后,可明显缓解1g/L冲击剂量的NaNO2对CHL细胞DNA的损伤作用,其细胞拖尾率分别为3.55%和1.06%,明显低于未经低剂量NaNO2预处理组细胞的拖尾率(P<0.05;P<0.01);而经1mg/L的NaNO2预处理的细胞,接触1g/L的NaNO218h后,DNA损伤较严重,其细胞拖尾率为6.09%,与未经低剂量NaNO2预处理组细胞的拖尾率相比,差异无显著(P>0.05)。距离指标及复合指标也有相同趋势。在低剂量NaNO2预处理细胞前采用3AB抑制PARP-1活性可阻断适应性反应的产生;而在低剂量NaNO2预处理细胞6h后再用3AB抑制PARP-1活性,则不会阻断适应性反应的产生。结论:浓度等于或低于0.1mg/L的NaNO2可通过激活PARP-1诱导CHL细胞DNA损伤的适应性反应,而且,能诱导适应性反应的剂量很可能对机体DNA不造成损伤。

硝酸铅对CHL有丝分裂细胞纺锤体的损伤作用

用不同浓度的硝酸铅（０．０６～９．６０ｍｍｏｌ处理ＣＨＬ细胞２４小时后，有丝分裂纺锤体和染色体分化染色的实验结果表明，随着硝酸铅浓度的升高，各种类型的纺锤体异常都有剂量依赖性升高，其中非中板集合、多极、Ｃ－中期的最高值（％）分别达到２１．８，２３．０，１４．７．在本实验的最高浓度，已观察不到纺锤体形态正常的细胞，球形中期占１００％。我们就铅对有丝分裂周期的阻滞作用及纺锤体毒性的特点。

早熟染色体凝集技术研究~60Coγ射线照射对CHL细胞染色体的损伤及修复

用ＰＣＣ技术研究６０Ｃｏγ射线照射后ＣＨＬ细胞染色体的损伤及修复，并同常规法的检测结果进行比较。结果表明，ＰＣＣ法观察的染色体损伤主要以断片为主，对Ｇ１ＰＣＣ、Ｇ２ＰＣＣ的断片数分别拟合其量效关系均符合二次多项式。ＰＣＣ的损伤检出率较常规法高１０倍左右，表明其更加敏感，更能反映初始损伤情况。

微塑料对湖泊生态系统初级生产者的影响

塑料的广泛应用导致大量微塑料进入环境,尤其是水环境,从而产生环境风险。浮游植物等自养生物是湖泊系统的主要初级生产者,是湖泊食物链的关键组成部分,为食物链的上游提供能量和物质基础。同时,浮游植物也是对微塑料响应最敏感的类群。了解湖泊浮游植物等初级生产者对微塑料的响应是探究微塑料对湖泊生态系统功能影响的重要基础。总结了全球湖泊生态系统微塑料的丰度、类型、尺寸、来源等分布特征,系统分析了微塑料暴露对浮游植物等初级生产者细胞结构、基因表达和生长,以及对浮游植物叶绿素a含量、光合活性的影响,并总结了其中的影响机制。总体而言,微塑料会降低初级生产者的叶绿素a含量,剂量越高、尺寸越小,这种抑制作用越强烈;同时,微塑料也会作用于初级生产者,造成细胞膜损伤、DNA损伤,调控其相关功能基因表达,抑制其生长和光合活性等。然而,湖泊生态系统微塑料的实际检出浓度远低于室内暴露实验中的添加剂量,微塑料结构和组分也更为复杂,野外观测结果与室内培养实验之间还不能建立直接的对应关系。因此,未来的相关研究应集中在如何有效联系野外观测结果与室内培养实验结果,进一步聚焦建立可靠的、可应用推广的微塑料浓度与初级生产者之间的剂量-效应关系模型,探究微塑料对湖泊初级生产者的作用机制,为刻画微塑料对湖泊生态系统初级生产者及其功能的作用机制提供科学支撑。

SO_2致CHL细胞氧化损伤及VC保护作用

目的探讨二氧化硫(SO2)对哺乳类细胞的毒性作用及其防护。方法以SO2体内衍生物-亚硫酸盐和亚硫酸氢盐(分子比为3∶1)及抗坏血酸(维生素C,VC)单独或同时处理中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL),并分别测定过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及脂质过氧化(LPO)水平。结果(1)SO2体内衍生物单独处理后,CAT活性在12,24 h时显著降低;36 h时,除5 mmol/L组外,其余各组均极显著降低;48 h时15,20 mmol/L组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。除12 h时的5 mmol/L组外,其余各组LPO水平在处理12,24 h时均明显升高。(2)VC单独处理后,各组CAT活性只在12 h时显著升高,同时LPO水平降低,但是只有0.10,0.25 mmol/L组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)0.1 mmol/L VC和不同剂量SO2衍生物共同处理后,CAT活性仍然呈下降趋势,但加添VC的组CAT活性普遍高于相应的未加VC组,且培养12 h的5,10 mmol/L组及24 h的10,15mmol/L组与未添加VC组比较,差异有统计学意义(P<0.05);VC也降低了SO2衍生物引起的LPO水平。(4)在CHL细胞中未检测到SOD。结论SO2体内衍生物可以使CHL细胞中CAT活性降低、LPO水平增高,且VC可起到一定防护作用。

Chl H/RS细胞与背景细胞蛋白表达的相关性

目的 :探讨cHL肿瘤性H/RS细胞与反应性背景淋巴细胞蛋白表达的相关性。方法 :采用免疫组化SABC法对 32例cHL进行CD2 0、CD30、CD15、CD4 5RO和LMPI蛋白表达的检测。结果 :(1) 32例cHL中LrHL11例 ,NSHL2例 ,MCHL14例 ,LDHL5例 ;(2 ) 30 / 32 (93.8% )的H/RS细胞与 14 / 32 (4 3.8% )的北景淋巴细胞表达CD30 ,2 5 / 32J(78.1% )的H/RS细胞与 7/ 32(2 1.9% )的背景淋巴细胞表达CD15 6 / 32 (18.8% )的H/RS细胞与 8/ 32 (2 5 .0 % )的背景淋巴细胞优势表达CD2 0 ,7/ 32 (2 1.9% )的H/RS细胞与 18/ 32 (5 6 .3% )的背景淋巴细胞优势表达CD4 5RO ;(3) 2 0 / 32 (6 2 .5 % )的H/RS细胞表达LMP1蛋白。结论 :H/RS及其背景细胞的在蛋白表达水平上具有一定的相关性 ,检测CD2 0、CD30、CD15、CD4

Hep G2培养条件的摸索及其与CHL、3T3细胞代谢能力的比较

目的:以MTT试验方法计算环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)对Hep G2细胞和体外安全性评价常用细胞系CHL、3T3细胞的LC50,间接比较几种细胞系的代谢能力并确定Hep G2细胞适宜的培养试验条件。方法:用需代谢活化的阳性物CP以含血清和不含血清的培养液配制染毒液,按10.0、7.21、5.19、3.73、2.69、1.93、1.39、1.00 mg/ml浓度对CHL、3T3细胞和以不同培养液培养的Hep G2细胞染毒,在24 h时间点以MTT方法对细胞存活情况进行分析,计算LC50,比较各种细胞和不同培养条件下Hep G2细胞对CP的代谢活化水平,并观察不同培养条件下Hep G2细胞的生长状态。结果:MTT试验结果表明Hep G2细胞对CP的代谢能力最强,CHL细胞次之,而3T3细胞对CP的代谢能力最弱;3种不同培养液培养的Hep G2细胞无论染毒液是含血清的还是不含血清的均观察到CP对细胞的LC50:MEM>DMEM>RPMI 1640,Hep G2细胞在DMEM、RPMI 1640两种培养液中生长状态均良好,尤其是RPMI 1640培养的Hep G2细胞,在无血清的染毒液培养下既能获得较多的细胞又能表现出较强的代谢CP的能力。结论:Hep G2细胞对CP的代谢活化能力较CHL和3T3细胞强,以RPMI 1640培养的Hep G2细胞生长状态良好且较DMEM和MEM培养的细胞表现出更强的代谢活化CP的能力,能获得较理想的培养和试验结果。

氟苯咪唑CHL培养细胞染色体畸变研究

氟苯咪唑(Fludendazole)由Gelder于1969年合成,直到最近几年才受到各国重视,我国于1983年也合成了该化合物。该药经临床应用疗效显著,抗虫效力高。

医用硅橡胶诱发CHL细胞姐妹染色单体互换的实验研究

目的 探讨医用硅橡胶体外致突变试验的方法。方法 选用体外姐妹染色单体互换试验评价医用硅橡胶材料的诱变性。从细胞遗传学角度,对材料的浸提介质及其与细胞的接触剂量进行实验性探讨。结果 以生理盐水作为浸提介质时,加入剂量以1ml为适;用Eagle'sMEM作为浸提介质时,由于可直接调控材料与细胞的接触剂量,具有较大的实用性。结论 体外姐妹染色单体互换试验可推荐作为一项检测口腔材料潜在致突变性的体外评价方法。

医用胶原膜浸提液对CHL细胞染色体畸变作用的研究

目的:研究医用胶原膜用于医学领域的遗传毒性。方法:在代谢活化和非代谢活化测试系统下对胶原膜浸提液进行中国仓鼠肺(CHL)细胞的染色体畸变试验。结果:胶原膜浸提液终浓度在31.25～250μl/ml时,观察24h和48h收集的染色体,畸变率均在正常范围(<5%)。直接诱变剂丝裂霉素C(0.20μg/ml),在非代谢活化时染色体畸变率为31%～40%,间接诱变剂环磷酰胺(60μg/ml)在S9代谢活化时染色体畸变率为37%～46%,均使染色体畸变率增加。结论:在本实验条件下医用胶原膜浸提液未诱发CHL细胞染色体畸变率增加。

CHL细胞DNA解螺旋荧光分析法实验参数的选择及其应用

为确定ＣＨＬ细胞为测试靶细胞时ＦＡＤＵ的较佳实验参数，采用变化解旋温度及解旋液碱浓度，并根据Ｂｉｒｎｂｏｉｍ等的判断标准，结果表明解旋温度先０℃３０ｍｉｎ后１５℃６０ｍｉｎ；解旋液ＮａＯＨ浓度０４Ｎ效果较佳。并以此为条件把该法应用于检测过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）诱导的ＤＮＡ过氧化损伤－适应及抗过氧化作用。