转基因细胞系CHL-3A4的建立及其代谢活化作用

目的建立ＣＨＬ３Ａ４细胞系为某些遗传毒性化合物的代谢途径研究提供模型细胞系，并用于新合成化学物质的致突变性检测。方法应用ＲＴＰＣＲ和ＤＮＡ重组技术从人肝组织中克隆细胞色素Ｐ４５０３Ａ４基因的ｃＤＮＡ至ＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＭ１３载体上，经限制性内切酶图谱分析和克隆片段部分序列测定，证实为ＣＹＰ３Ａ４ｃＤＮＡ。然后构建真核细胞重组表达质粒ｐＲＥＰ９３Ａ４，导入中国仓鼠ＣＨＬ细胞。结果建立了ＣＨＬ３Ａ４转基因细胞系，双核细胞微核试验证明该细胞系能代谢活化黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）、杂色霉菌毒素（ＳＴＣ）、环磷酰胺（ＣＰＡ）。结论所建ＣＨＬ３Ａ４细胞系确实能表达人细胞色素Ｐ４５０３Ａ４，并能代谢活化ＡＦＢ１、ＳＴＣ、ＣＰＡ。