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水解物对CHO细胞培养工艺的影响
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作者 胡振湘 黄盼盼 +2 位作者 邓钦培 徐乐意 孙梦梅 《中国医药指南》 2023年第34期69-72,共4页
目的对比3种水解物对CHO悬浮培养细胞生长的影响,以及对细胞分泌表达的抗体质量的影响。方法应用3种不同来源的水解物,采用摇瓶培养CHO细胞,观察培养过程中细胞密度、活性和代谢产物的变化,以及抗体质量的影响。结果水解物对CHO生长无... 目的对比3种水解物对CHO悬浮培养细胞生长的影响,以及对细胞分泌表达的抗体质量的影响。方法应用3种不同来源的水解物,采用摇瓶培养CHO细胞,观察培养过程中细胞密度、活性和代谢产物的变化,以及抗体质量的影响。结果水解物对CHO生长无显著促进作用、但可大幅度提高抗体产量;对抗体糖型无显著影响,可显著影响抗体电荷分布。结论3种水解物中,Preteose peptone和Phytone peptone对CHO有很好的促进作用。但Preteose peptone含有动物然产分,随着各国药监对动物来源成分监管制度的严格,将进一步限制Preteose peptone的应用,因此Phytone peptone具有优势。 展开更多
关键词 cho细胞悬浮培养 水解物 糖型 抗体电荷分布
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rCHO细胞在葡萄糖限制流加培养过程中的生长与代谢特性 被引量:14
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作者 高量 游磊 +1 位作者 朱明龙 谭文松 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第1期74-78,共5页
以调控rCHO细胞的葡萄糖代谢为主要研究目标,通过在2L生物反应器中进行的批培养和葡萄糖限制恒速流加培养的方法,考察了在培养过程中葡萄糖浓度对rCHO细胞生长、葡萄糖和谷氨酰胺消耗,以及副产物乳酸、氨和丙氨酸生成的影响。结果表明:... 以调控rCHO细胞的葡萄糖代谢为主要研究目标,通过在2L生物反应器中进行的批培养和葡萄糖限制恒速流加培养的方法,考察了在培养过程中葡萄糖浓度对rCHO细胞生长、葡萄糖和谷氨酰胺消耗,以及副产物乳酸、氨和丙氨酸生成的影响。结果表明:葡萄糖限制的流加培养过程中,活细胞密度XV达到2.35×106cells·mL-1,较批培养提高一倍;而乳酸生成大幅减少。在葡萄糖限制培养阶段,qLac和YLac/Gluc持续降低至零,而qo2/qGluc由0.7mmol·mmol-1上升至4.3mmol·mmol-1,说明更多葡萄糖进入高效释能代谢途径。同时谷氨酰胺的消耗增加,YAmm/Gln增大,YAla/Gln下降,证明谷氨酰胺的能量利用率也有所提高。 展开更多
关键词 批培养 流加培养 葡萄糖限制 cho细胞
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适于无血清贴壁培养的抗凋亡宿主细胞系CHO-IVB2的构建 被引量:4
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作者 翁少洁 来大志 +3 位作者 齐连权 于长明 付玲 陈薇 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期745-749,共5页
应用无血清培养基培养CHO细胞时 ,由于没有血清提供各种贴壁因子 ,细胞以悬浮的方式生长。在实际的大规模细胞培养中 ,CHO细胞往往以贴壁方式培养 ,要么贴壁于悬浮的微载体中 ,要么贴壁于固定的聚酯盘状介质或中空纤维中 ,而很少直接悬... 应用无血清培养基培养CHO细胞时 ,由于没有血清提供各种贴壁因子 ,细胞以悬浮的方式生长。在实际的大规模细胞培养中 ,CHO细胞往往以贴壁方式培养 ,要么贴壁于悬浮的微载体中 ,要么贴壁于固定的聚酯盘状介质或中空纤维中 ,而很少直接悬浮于培养基中。在无血清培养基中 ,Vitronectin单一组分可以促使CHO细胞的贴壁和扩增。通过双表达Igf_1和Bcl_2基因 ,已经构建了可以在无蛋白培养基IMEM中抗凋亡生长的细胞株CHO_IB3。在此基础上 ,构建了可以同时表达Igf_1、Vitronectin和Bcl_2三个蛋白的三顺反子表达载体pCI_NII_IVB。将该载体转染于CHO_dhfr- 细胞中 ,构建了一个细胞株CHO_IVB2。该细胞株可以在无蛋白培养基中抗凋亡生长 ,适于以贴壁的方式大规模培养 。 展开更多
关键词 cho细胞 细胞工程 细胞凋亡 贴壁培养 无血清培养基
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表达单克隆抗体的CHO细胞无蛋白培养基的优化 被引量:10
4
作者 刘国庆 陈飞 +2 位作者 赵亮 范里 谭文松 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第1期96-101,共6页
在自主研发无蛋白培养基的基础上,考察了氨基酸、维生素和葡萄糖对CHO细胞生长、代谢与抗体合成的影响。结果表明,对培养过程中消耗较多的氨基酸进行补充,虽然不能促进细胞生长,但有利于培养后期细胞活性维持与抗体合成;B族维生素的添... 在自主研发无蛋白培养基的基础上,考察了氨基酸、维生素和葡萄糖对CHO细胞生长、代谢与抗体合成的影响。结果表明,对培养过程中消耗较多的氨基酸进行补充,虽然不能促进细胞生长,但有利于培养后期细胞活性维持与抗体合成;B族维生素的添加能促进细胞生长并延长培养时间;作为重要的碳源和能源,葡萄糖浓度较高时会抑制细胞生长,而浓度较低时不能有效支持细胞生长与抗体合成,维持其在适当浓度有利于细胞生长并能延长培养时间,从而有利于提高抗体产量。通过合理调整各营养物的浓度配比形成了优化的无蛋白培养基,CHO细胞在该培养基中的最高密度达到52.6×105cells mL 1,抗体产量达到274 mg L 1,与初始培养基相比分别提高了33%和63%。总之,在细胞培养过程中应维持充足且平衡的营养物成分,以有效供应细胞生长与抗体合成的需求。 展开更多
关键词 cho细胞 单克隆抗体 无蛋白培养基 优化
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重组CHO细胞培养过程中代谢产物对细胞分泌HBsAg的影响 被引量:6
5
作者 李玉 姚伟 +2 位作者 张岩锐 吴玉梅 郑菊梅 《药物生物技术》 CAS CSCD 2002年第4期209-211,共3页
为了获得重组CHO细胞培养的最佳条件,使其能连续高效表达HBsAg,以含不同量谷氨酰胺的DMEM溶液培养重组CHO细胞,测定了不同阶段氨基酸、氨、乳酸含量及HBsAg滴度。结果表明谷氨酰胺的分解产物氨与乳酸均能抑制细胞的生长和分泌HBsAg,减... 为了获得重组CHO细胞培养的最佳条件,使其能连续高效表达HBsAg,以含不同量谷氨酰胺的DMEM溶液培养重组CHO细胞,测定了不同阶段氨基酸、氨、乳酸含量及HBsAg滴度。结果表明谷氨酰胺的分解产物氨与乳酸均能抑制细胞的生长和分泌HBsAg,减少细胞培养液中的谷氨酰用量可使HBsAg分泌量增加。 展开更多
关键词 重组cho细胞 代谢产物 细胞分泌 HBSAG 细胞培养 谷氨酰胺 乙肝疫苗
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通过高表达Igf1/Bcl-2或Bcl-2/Cyclin E基因组合使CHO细胞适于在无蛋白培养基中抗凋亡培养 被引量:4
6
作者 来大志 翁少洁 +4 位作者 齐连权 于长明 付玲 于婷 陈薇 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期66-72,共7页
哺乳动物细胞表达系统是生产重组蛋白药物最常用的表达系统。但在无蛋白培养基中 ,哺乳动物细胞生长活力差 ,且容易发生细胞凋亡 ,因而难以大规模培养。为解决此问题 ,应用双顺反子表达载体在CHO dhfr- 细胞中同时表达Igf 1 Bcl 2或Bcl ... 哺乳动物细胞表达系统是生产重组蛋白药物最常用的表达系统。但在无蛋白培养基中 ,哺乳动物细胞生长活力差 ,且容易发生细胞凋亡 ,因而难以大规模培养。为解决此问题 ,应用双顺反子表达载体在CHO dhfr- 细胞中同时表达Igf 1 Bcl 2或Bcl 2 CyclinE基因组合 ,通过Bcl 2使细胞获得抗凋亡能力 ;通过Igf 1或CyclinE促进细胞生长分裂 ,使细胞获得在无蛋白培养基中生长的能力。以上述基因组合转染CHO dhfr- 细胞 ,应用Westernblot从G4 18抗性克隆中分别筛选到Bcl 2高表达克隆若干个 ,对其中表达Bcl 2最高的CHO IB3和CHO BC1做进一步Westernblot和流式细胞分析 ,确认此两个细胞株分别高表达Igf 1 Bcl 2和Bcl 2 CyclinE基因组合。分别通过撤去血清和加入放线菌素D诱导细胞凋亡 ,并以流式细胞术和DNALadder法检测细胞凋亡 ,证明CHO IB3和CHO BC1均具有较强的抗细胞凋亡能力。MTT法证明两个细胞株在不含血清的IMDM培养基中的增殖活力显著高于CHO dhfr- 对照细胞。在细胞培养瓶中的连续培养实验表明 ,CHO IB3和CHO BC1在本实验室设计的IMEM无蛋白培养基中的生长速度和活细胞数显著高于CHO dhfr- 对照细胞。提示此两个细胞系能够在无血清培养基中抗凋亡高活力生长 ,适于作为生物工程宿主细胞。 展开更多
关键词 哺乳动物细胞表达系统 细胞培养 细胞凋亡 细胞周期 无蛋白培养基
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流加微载体半连续培养分泌HBsAg的rCHO细胞过程研究 被引量:3
7
作者 陈志宏 施源 丁健椿 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第2期159-163,共5页
本文在固定浓度微载体半连续培养rCHO细胞动力学研究的基础上,通过逐步补加新的微载体以不断提高供细胞生长的表面,提高了细胞密度和产物的表达量。建立了流加微载体半连续培养rCHO细胞收获HBsAg的工艺,确定了此种培养方式的最大微载体... 本文在固定浓度微载体半连续培养rCHO细胞动力学研究的基础上,通过逐步补加新的微载体以不断提高供细胞生长的表面,提高了细胞密度和产物的表达量。建立了流加微载体半连续培养rCHO细胞收获HBsAg的工艺,确定了此种培养方式的最大微载体浓度,为建立微载体连续培养rCHO细胞生产HBsAg技术,实现细胞高密度和产物高表达奠定了基础。 展开更多
关键词 细胞培养 微载体 HBSAG
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重组CHO细胞培养过程中氨对细胞代谢的影响 被引量:10
8
作者 孙祥明 张元兴 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期304-309,共6页
研究了重组CHO细胞批培养过程中 ,氨浓度对细胞的葡萄糖、谷氨酰胺及其它氨基酸代谢的影响。表明 ,细胞对葡萄糖和谷氨酰胺的得率系数随着氨浓度的增加而降低 ,起始氨浓度为 5 6 6mmol L的批培养过程与起始氨浓度为 0 2 1mmol L的批... 研究了重组CHO细胞批培养过程中 ,氨浓度对细胞的葡萄糖、谷氨酰胺及其它氨基酸代谢的影响。表明 ,细胞对葡萄糖和谷氨酰胺的得率系数随着氨浓度的增加而降低 ,起始氨浓度为 5 6 6mmol L的批培养过程与起始氨浓度为 0 2 1mmol L的批培养过程相比 ,细胞对葡萄糖和谷氨酰胺的得率系数分别下降了 78%和 74% ,细胞对其它氨基酸的得率系数也分别下降了 5 0 %~ 70 %。氨浓度的增加明显地改变了细胞的代谢途径 ,葡萄糖代谢更倾向于厌氧的乳酸生成。在谷氨酰胺的代谢过程中 ,谷氨酸经谷氨酸脱氢酶进一步生成α 酮戊二酸的过程受到了氨的抑制 ,而氨对谷氨酸经谷氨酸转氨酶反应生成α 酮戊二酸的过程有促进作用 ,但总体上谷氨酸进一步脱氨生成α 展开更多
关键词 动物细胞培养 细胞代谢 cho细胞 葡萄糖 谷氨酰胺
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淀粉微载体的制备及对CHO-K1细胞培养的初步应用 被引量:4
9
作者 张磊 李明生 +4 位作者 郑荣 张健 靳冬武 马忠仁 冯玉萍 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期454-460,516,共8页
以普通市售马铃薯淀粉为原材料,在常温下利用W/O乳化方法制备了交联淀粉微球,并以二乙胺基乙基修饰了微球的表面电荷。同时研究了制备淀粉微球的制备工艺和改性工艺,成功制备了适合细胞培养用的淀粉微载体。利用扫描电镜(SEM)、红外(FT-... 以普通市售马铃薯淀粉为原材料,在常温下利用W/O乳化方法制备了交联淀粉微球,并以二乙胺基乙基修饰了微球的表面电荷。同时研究了制备淀粉微球的制备工艺和改性工艺,成功制备了适合细胞培养用的淀粉微载体。利用扫描电镜(SEM)、红外(FT-IR)、X射线衍射仪(XRD)对微球进行了表征。结果表明,最佳制备条件为:淀粉溶液浓度为7%,搅拌速度为500 rpm,交联剂用量为8%,水油相体积比1∶6;微球表面修饰最佳条件为:加入微球质量2倍体积的3.5 mol/L NaOH溶液和2.5 mol/L DEAE-HCl溶液,60℃密闭反应4 h。对比Cytodex-1微载体,培养CHO-K1细胞至144 h时,淀粉微载体表面细胞密度达到1.8×10~6cells/mL,且两者培养效果相似,表明了自制淀粉微载体是一种潜在的贴壁细胞培养用高分子材料。 展开更多
关键词 马铃薯淀粉 淀粉微球 二乙氨基乙基 cho-K1细胞 细胞培养
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葡萄糖对重组CHO细胞生长代谢及EPO表达的影响 被引量:4
10
作者 孙祥明 张元兴 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期698-702,共5页
在CHO细胞批培养中 ,葡萄糖浓度从 8 9增加到 4 9 6mmol L ,最大活细胞密度没有明显的差异 ,乳酸对葡萄糖的得率系数首先随着葡萄糖浓度的增加而增加 ,葡萄糖浓度达到 17 9mmol L后 ,乳酸对葡萄糖的得率系数基本上维持恒定。在本实验中 ... 在CHO细胞批培养中 ,葡萄糖浓度从 8 9增加到 4 9 6mmol L ,最大活细胞密度没有明显的差异 ,乳酸对葡萄糖的得率系数首先随着葡萄糖浓度的增加而增加 ,葡萄糖浓度达到 17 9mmol L后 ,乳酸对葡萄糖的得率系数基本上维持恒定。在本实验中 ,葡萄糖浓度对谷氨酰胺代谢没有明显的影响。EPO的累积浓度首先随着起始葡萄糖浓度的增加 ( 8 9~ 17.9mmol L)而增加 ,进而又随着葡萄糖浓度的增加 ( 17 9~ 4 9.6mmol L)而下降 ,表明存在一最适浓度 ,在此浓度下重组CHO细胞的EPO表达最大。 展开更多
关键词 cho细胞 葡萄糖 代谢 红细胞生成素 动物细胞培养
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pH值和新生牛血清浓度对CHO-C_(28)细胞分泌HBsAg的影响 被引量:1
11
作者 寇桂英 林杰 +2 位作者 张平 徐枫 姚伟 《药物生物技术》 CAS CSCD 2006年第2期112-114,共3页
为解决CHO-C28细胞在大规模培养中易增厚、大片脱落、不易维持以及HBsAg滴度低的问题,对细胞培养液pH值和新生牛血清(NCS)浓度进行调整。结果表明,CHO-C28细胞在2个月维持时间内未出现明显增厚和大片脱落,HBsAg表达量明显提高。该实验... 为解决CHO-C28细胞在大规模培养中易增厚、大片脱落、不易维持以及HBsAg滴度低的问题,对细胞培养液pH值和新生牛血清(NCS)浓度进行调整。结果表明,CHO-C28细胞在2个月维持时间内未出现明显增厚和大片脱落,HBsAg表达量明显提高。该实验为大规模培养CHO-C28细胞提供了依据。 展开更多
关键词 cho-C28细胞 乙型肝炎表面抗原 培养
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不同时间采集的小牛血清对CHO-C_(28)细胞培养及表达的影响 被引量:2
12
作者 周长军 戴长河 +3 位作者 何巍 乔宏雷 宋泽民 赵小琳 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期68-70,共3页
通过研究小牛血清对CHO-C28细胞培养及HBsAg表达的影响,探讨小牛血清的不同采集时间对血清质量的影响。采集出生后4、8、12h(未进食)小牛的血清,对CHO-C28细胞进行传代、换液培养,并检测乙肝表面抗原(HBsAg)表达量。结果可见:①在细胞传... 通过研究小牛血清对CHO-C28细胞培养及HBsAg表达的影响,探讨小牛血清的不同采集时间对血清质量的影响。采集出生后4、8、12h(未进食)小牛的血清,对CHO-C28细胞进行传代、换液培养,并检测乙肝表面抗原(HBsAg)表达量。结果可见:①在细胞传代4次时,4h采集的血清细胞生长状态良好,8h采集的血清细胞出现明显的衰老,12h采集的血清细胞大面积死亡;②在细胞维持换液方面,4h采集的血清可维持细胞换液25次以上,8h采集的血清可勉强维持20次,12h采集的血清维持细胞换液10次时已大部分死亡;③乙肝表面抗原(HBsAg)表达量的检测结果,同批培养上清,4h采集的血清培养细胞表达量最高。可见,小牛出生后采集血清时间越早越好。 展开更多
关键词 小牛血清 cho—C28细胞 细胞培养 HBsAg表达量
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丁酸钠对重组CHO细胞生长及产物EPO表达的影响 被引量:1
13
作者 周玲 孙祥明 张元兴 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期310-312,319,共4页
在 CHO- S- SFM II无血清培养基中维持培养重组 CHO细胞 ,考查添加丁酸钠对细胞生长、糖代谢及产物 EPO表达的影响。丁酸钠浓度达到 2 mmol/L时完全抑制了细胞的生长 ,同时 ,丁酸钠的添加也降低了葡萄糖比消耗速率 ( 30 %左右 )。在本... 在 CHO- S- SFM II无血清培养基中维持培养重组 CHO细胞 ,考查添加丁酸钠对细胞生长、糖代谢及产物 EPO表达的影响。丁酸钠浓度达到 2 mmol/L时完全抑制了细胞的生长 ,同时 ,丁酸钠的添加也降低了葡萄糖比消耗速率 ( 30 %左右 )。在本培养系统中 ,丁酸钠并不能促进产物的表达 ,但有助于维持 EPO表达的稳定性。 展开更多
关键词 丁酸钠 cho细胞 重组人促红细胞生成素 细胞培养 EPO表达 细胞生长 糖代谢
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微囊化重组CHO细胞制备和培养条件的优化 被引量:1
14
作者 张英 王为 +4 位作者 吕国军 于炜婷 郭昕 雄鹰 马小军 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期502-507,共6页
微囊化重组基因细胞移植治疗肿瘤是一种新兴的肿瘤基因治疗方法,然而由于目前微囊化细胞规模化制备和培养技术还不成熟,阻碍了其在临床治疗中的推广与应用。以重组CHO细胞为模型,考察了不同的微囊制备和培养条件对微囊化细胞生长和内皮... 微囊化重组基因细胞移植治疗肿瘤是一种新兴的肿瘤基因治疗方法,然而由于目前微囊化细胞规模化制备和培养技术还不成熟,阻碍了其在临床治疗中的推广与应用。以重组CHO细胞为模型,考察了不同的微囊制备和培养条件对微囊化细胞生长和内皮抑素表达的影响。实验表明,种子细胞所处的生长阶段和细胞接种密度对微囊化细胞生长和内皮抑素表达的影响较大,对数生长期的细胞进行包囊并且细胞接种密度为1×106~2×106cells/mL微囊时微囊内细胞生长良好、内皮抑素表达量高。微囊制备时间对细胞活性和内皮抑素表达也有较大的影响,制备时间延长对细胞的损伤增大,因此制备时间应控制在5h以内。生物微胶囊在制备过程中会造成细胞损伤,而体外培养是恢复细胞活性的良好方法,在培养过程中微囊接种量为5%时对细胞生长和内皮抑素表达有利。 展开更多
关键词 细胞移植 肿瘤抗血管治疗 微囊制备和培养 重组cho细胞 内皮抑素
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用高效廉价载体培养CHO细胞生产rHuEPO的研究 被引量:1
15
作者 陈英文 黄任远 +2 位作者 沈树宝 高坤 胡云龙 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第6期855-858,共4页
研究了以自制胶原蛋白载体及C-DISK载体培养CHO细胞生产rHuEPO蛋白的过程,并以进口A-DISK载体作为对照培养。对培养过程中细胞贴壁过程、葡萄糖代谢速率、rHuEPO浓度及葡萄糖代谢速率与rHuEPO的浓度变化关系进行了实验研究分析和对比。... 研究了以自制胶原蛋白载体及C-DISK载体培养CHO细胞生产rHuEPO蛋白的过程,并以进口A-DISK载体作为对照培养。对培养过程中细胞贴壁过程、葡萄糖代谢速率、rHuEPO浓度及葡萄糖代谢速率与rHuEPO的浓度变化关系进行了实验研究分析和对比。结果表明:自制胶原蛋白载体培养细胞具有良好的生物代谢活力和蛋白表达能力,葡萄糖代谢速率高达14.2mmol?mL?1?h?1,比自制C-DISK载体高16.4%,比进口A-DISK载体高12.7%;在自制胶原蛋白载体上培养CHO细胞时EPO表达量也最高,培养10天后EPO浓度达到282U?mL?1,比自制C-DISK载体高30%,也比进口A-DISK载体高18%。自制胶原蛋白载体具有较佳的性价比,是一种高效、廉价的动物细胞培养载体。细胞的葡萄糖代谢水平对蛋白表达有着重要的影响,但两者又不同步,因此可用葡萄糖的代谢速率变化对该培养过程和目的蛋白表达进行适当监测和调控。 展开更多
关键词 细胞培养 载体 cho动物细胞 rHuEPO(重组人红细胞生长素)
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定点整合人Bcl-2基因的CHO/dhfr-细胞株的建立 被引量:1
16
作者 许凌峰 刘志刚 +4 位作者 孙志伟 林建波 杜韫 刘姗 俞炜源 《生物技术通讯》 CAS 2005年第6期605-608,共4页
构建重组载体质粒pMCEfrt-Bcl-2,利用FIp-InTM定点重组系统,在CHO-dhfr-细胞内定点整合人Bcl-2基因,通过Western印迹检测重组细胞Bcl-2蛋白的表达。通过流式细胞仪和DNALadder检测在高NH4Cl条件下细胞的凋亡情况;用台盼蓝染色检测在无血... 构建重组载体质粒pMCEfrt-Bcl-2,利用FIp-InTM定点重组系统,在CHO-dhfr-细胞内定点整合人Bcl-2基因,通过Western印迹检测重组细胞Bcl-2蛋白的表达。通过流式细胞仪和DNALadder检测在高NH4Cl条件下细胞的凋亡情况;用台盼蓝染色检测在无血清IMDM培养基中细胞的活细胞数目和活细胞比例。结果获得了稳定表达Bcl-2基因的细胞株CHO-Bcl-2,该细胞株能高水平表达Bcl-2蛋白。在无血清培养过程中,CHO-Bcl-2细胞比对照细胞保持高约15%的活细胞比例,细胞总数高25%。CHO-Bcl-2在高NH4+(50mmol/L)培养条件下具有较低的凋亡水平。建立了能够高表达Bcl-2基因并具有一定的抗凋亡能力的重组CHO/dhfr-细胞株。 展开更多
关键词 cho/dhfr^-细胞 BCL-2基因 细胞培养 凋亡
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用天冬酰胺代替谷氨酰胺培养产尿激酶原CHO工程细胞
17
作者 陈昭烈 刘红 +2 位作者 吴本传 李世崇 林福玉 《生物技术通报》 CAS CSCD 2001年第2期25-27,共3页
以产尿激酶原CHO工程细胞CL - 11G的细胞生长和目的产物的表达为观察指标 ,对用天冬酰胺替代培养基中谷氨酰胺的可行性进行研究。结果表明 ,溶液中游离态的天冬酰胺的自发分解速度明显低于谷氨酰胺 ,用天冬酰胺替代培基中的谷氨酰胺培养... 以产尿激酶原CHO工程细胞CL - 11G的细胞生长和目的产物的表达为观察指标 ,对用天冬酰胺替代培养基中谷氨酰胺的可行性进行研究。结果表明 ,溶液中游离态的天冬酰胺的自发分解速度明显低于谷氨酰胺 ,用天冬酰胺替代培基中的谷氨酰胺培养 11G细胞不影响细胞的生长和目的产物的表达 。 展开更多
关键词 细胞培养 cho工程细胞 尿激酶原 培养基 天冬酰胺 谷氨酰胺 替代品
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多孔微球固定化CHO工程细胞生产rt-PA的研究
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作者 陈昭烈 吴本传 +3 位作者 刘红 林福玉 李世崇 黄培堂 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期451-454,共4页
以 Cytopore 多孔微球固定产重组组织型纤溶酶原激活剂(rt P A) C H O 工程细胞株4 B3 ,在2 L 搅拌式生物反应器用无血清培养基 D F5 S 连续灌流培养。4 B3 细胞的最大活细胞密度和rt P A 生产... 以 Cytopore 多孔微球固定产重组组织型纤溶酶原激活剂(rt P A) C H O 工程细胞株4 B3 ,在2 L 搅拌式生物反应器用无血清培养基 D F5 S 连续灌流培养。4 B3 细胞的最大活细胞密度和rt P A 生产水平分别达到883 ×106/ m L 和12473 I U/ m L。含rt P A 的4 B3 细胞培养上清经 M P G 吸附层析和 Lysinesepharose 4 B 亲和层析两步纯化,rt P A 的纯度达到98 % 。 展开更多
关键词 细胞培养 cho工程细胞 组织型 纤溶酶原激活剂
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表达内皮抑素的rCHO细胞的微囊化培养
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作者 张英 王为 +4 位作者 吕国军 于炜婷 郭昕 雄鹰 马小军 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1-7,共7页
微囊化重组细胞移植治疗肿瘤是一种新兴的肿瘤基因治疗方法,如果将此技术应用到临床研究,就需要制备大量的细胞活性良好、重组蛋白表达量高的生物微胶囊。种子细胞是生物微胶囊治疗作用的执行者,是构建微囊微反应器的基本元素。如何获... 微囊化重组细胞移植治疗肿瘤是一种新兴的肿瘤基因治疗方法,如果将此技术应用到临床研究,就需要制备大量的细胞活性良好、重组蛋白表达量高的生物微胶囊。种子细胞是生物微胶囊治疗作用的执行者,是构建微囊微反应器的基本元素。如何获得大量高活性的种子细胞已经成为规模化制备生物微胶囊所面临的关键的限制因素。考察了搅拌式生物反应器内扩增的rCHO细胞进行包囊及微囊化细胞在生物反应器内规模化培养的可行性。实验结果显示:rCHO细胞在生物反应器内可以快速生长,并且对数期细胞包囊,微囊化细胞活性良好。制备的微囊化细胞可以在生物反应器内培养,与培养板培养比较细胞生长较快、内皮抑素表达量较高。应用生物反应器培养技术能够在体外快速、大量扩增rCHO细胞,满足微囊化细胞制备对种子细胞量与质的要求,微囊化细胞可以在生物反应器内培养。 展开更多
关键词 微胶囊 种子细胞培养 生物反应器 规模化培养rcho细胞
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用改装的Super-Spinner搅拌瓶连续灌流培养产凝血酶原CHO工程细胞
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作者 陈昭烈 Kai Iding +1 位作者 Dirk Lütkemeyer JürgenLehmann 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期109-112,共4页
A Super\|Spinner was Modified by mounting a stainless steel filter(pore size 75 μm)to the impeller shaft to retain cells while fresh nutrient is perfused.Using Macroporous microcarrier Cytopore 1,continuously perfuse... A Super\|Spinner was Modified by mounting a stainless steel filter(pore size 75 μm)to the impeller shaft to retain cells while fresh nutrient is perfused.Using Macroporous microcarrier Cytopore 1,continuously perfused cultivation of a recombinant CHO cell line,CHO2DS producing prothrombin was performed with the perfusion of a protein\|free medium DF6S.The cell retention rate was more than 90% during the 24 days continuously perfused cultivation.The viable cell density of CHO2DS and prothrombin concentration reached 4.62×10 6(cells.m/L) and 11.3(mg/L)respectively after 9 days culture. 展开更多
关键词 连续灌流培养 cho工程细胞 凝血酶原 动物细胞 细胞培养
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