常染色体显性遗传夜发性额叶癫痫家系及散发病例临床特征和CHRNA4基因突变分析

目的研究中国常染色体显性遗传夜发性额叶癫痫（autosomaldominantnocturnalfrontallobeepilepsy，ADNFI．E）人群的临床特征及CHRNA4基因突变情况。方法收集257例ADNFI。E患者血样，其中散发患者215例，家系患者42例，应用PCR产物直接测序方法进行筛查CHRNA4基因全部外显子。选取200名汉族健康人作为对照。结果所有患者cHRNA4基因全部外显子未发现已报道的突变。在1例家系患者CHRNA4基因第5外显子发现新同义突变D190D（C．570C〉T），D190D表现为杂合子变异，200名健康对照结果显示阴性。在另6例患者CHRNA4基因第5外显子发现新单核苷酸多态（c．639T、／C，C．678T／C，C．1209G／T，c．1227T／c，c．1659G／A，C．1629C／T），上述变异在200名健康对照结果均为阴性。结论cHRNA4基因可能不是中国南方人群散发ADNFLE患者的主要致病基因，新同义突变D190D尚未见国内外报道，是否致病有待进一步研究证实。

中国人CHRNA4基因的多态性分析

目的对中国人神经型烟碱性胆碱能受体alpha4亚单位(CHRNA4)全基因进行扫描,检测CHRNA4基因多态位点及基因变异频率。方法随机抽取100名北京地区流行病学调查老年人和100例原发性帕金森病患者(从2000年至2002年首都医科大学宣武医院就诊的原发性帕金森病患者中随机抽取),用PCR扩增CHRNA4的6个外显子及邻近内含子区。用变性高效液相色谱和限制性酶切片段长度多态检测CHRNA4的多态位点,测序确定变异的碱基,统计各多态位点基因频率。结果检测出10个CHRNA4多态性位点,420C/T(0.873/0.127),870C/T(0.828/0.172),1440A/C(0.858/0.142),1860C/T(0·738/0.262),1890C/T(0.605/0.395),第5内含子+14T/C(0.553/0.447),第2内含子+22G/A(0·873/0·127)与以往报道相同(GenBank NM00074)。新发现3个多态位点,第3内含子+182Del22bp(0·813/0·187),1758C/T和1809C/T。帕金森病组第3内含子+182Del22bp缺失变异频率(0·235)高于对照组(0·140)(P=0.015)。结论CHRNA4是高度多态的基因,多态位点多在第5外显子。帕金森病患者第3内含子+182Del22bp缺失变异者多。

南粤地区6个常染色体显性遗传夜间发作性癫癎家系患者中未发现CHRNA4基因突变

目的分析常染色体显性遗传夜间发作性癫癎（ADNFLE）患者CHRNA4基因序列的变异性，探讨其与ADNFLE发病的关系。方法收集临床诊断为ADNFLE的主要来源于广东和广西的6个家系，其总成员66例，发病24例，同时收集健康志愿者200例作为健康对照。提取二基因组中DNA并特异性扩增CHRNA4的1～6号外显子片段，对其进行纯化与测序。对测序结果进行序列对比分析。采用SPSS13．0软件进行统计学分析。结果在CHRNA4基因第5号外显子中发现4个碱基替换．c.909T〉G、c．1440G〉T、c．1458T〉C及c．942C〉T，均为同义替换。前3种替换属纯合变异，在24例ADNFLE患者和200例健康对照者中均存在，发生率为100％，而942C〉T替换仅出现在1例患者中，属杂合变异。结论ADNFLE患者CHRNA4基因1—6号外显子片段中均未发现已报道的热点突变。CHRNA4基因是否参与ADNFLE的发病，需进一步扩大样本量和进行功能学的研究。

CHRNA4基因多态性与重度抑郁发作治疗反应的关系研究

目的分析烟碱型胆碱能受体α4亚单位(CHRNA4)基因多态性与重度抑郁发作(major depressive disorder,MDD)治疗反应之间的相关性.方法收集304例接受抗抑郁药治疗的MDD患者.应用MassArray质谱分析法对CHRNA4基因的2个SNPs位点(rs4522666和rs4603829)进行分型.用HAMD-17量表评估基线和治疗1、2、4和6周后的效果.结果共290名受试者完成了研究,其中rs4522666基因多态性与抗抑郁治疗的效果存在显著的相关性,有效组和无效组的基因型、等位基因分布频率的差异具有统计学意义(P=0.015,P=0.006).经错误发现率校正后,上述差异仍具有统计学意义(P=0.029,P=0.011),治疗有效的患者中等位基因G和GG基因型的频率更高(OR=0.58,95%CI=0.40~0.86;OR=0.38,95%CI=0.17~0.82).而痊愈组rs4522666多态性的等位基因频率与有效未痊愈组差异无统计学意义(P>0.05).未发现rs4603829基因多态性和抗抑郁药疗效存在相关性(P>0.05).结论CHRNA4基因rs4522666位点多态性可能与抗抑郁药疗效存在一定的关联.

CHRNA5-A3-B4基因簇与吸烟行为及肿瘤发生关系的研究进展

烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)是细胞膜上超家族配体门控离子通道受体,依赖尼古丁及其代谢产物的活性,激活各种代谢通路。这些代谢通路与肿瘤细胞的增殖、生存、迁移、侵袭、凋亡和血管生成有密切的联系,而CHRNA5-A3-B4是编码nAChRα5、α3和β4亚基的一组基因簇。研究证实,CHRNA5-A3-B4基因的多种单核苷酸多态性(SNP)与肿瘤的发生发展相关,这种突变的多样性,促进了更为主效的基因位点的探索,为肿瘤的靶向治疗提供依据。本文结合相关研究,从肺癌、食管癌及其他相关肿瘤疾病的发生来阐述CHRNA5-A3-B4相关SNP基因位点,以便获取主效基因位点。

CHRNA5-A3-B4基因簇多态性与烟草依赖易感性研究进展

烟草依赖又称尼古丁依赖,即对烟草中成瘾性物质尼古丁的依赖。尼古丁主要与烟碱型乙酰胆碱受体结合引起多巴胺释放继而导致吸烟成瘾。全基因组关联研究已确定了CHRNA5-A3-B4基因簇与吸烟严重程度和尼古丁依赖之间的关联,CHRNA5编码的α5亚基作为其他nAChRs亚基的“附件”,被证实参与尼古丁对多巴胺神经元的刺激作用,其基因多态性使CHRNA5蛋白序列改变而导致烟草依赖的发生。CHRNA3在大脑某些特定区域表达并在多巴胺神经元调节中发挥作用,其多个SNP位点通过调节mRNA而影响烟草依赖的发生。CHRNB4编码的β4亚基主要与α3亚基共组装共表达,具有缓慢脱敏和对尼古丁低亲和的特点。现综述CHRNA5-A3-B4基因簇多态性与烟草依赖的相关性,为烟草依赖的干预及靶向治疗提供新思路。

1例MRI阴性额叶癫痫患儿及其父母的基因检测结果和治疗分析

目的分析1例MRI阴性额叶癫痫患儿及其父母的基因检测结果和治疗方法。方法对1例MRI阴性额叶癫痫患儿及其父母的基因检测结果和治疗方法作回顾性分析。结果3月龄患儿,因“4天内无热抽搐6次”就诊,患儿有频繁抽搐发作,头颅MRI检查未见异常,血尿异常代谢筛查未见异常。脑电图检查提示异常儿童脑电图,捕获一次左侧额部起源的临床发作。经患儿家长同意知情后,取患儿及其父母外周血进行Trio-全外显子组基因测序,结果显示患儿20号染色体长臂检测到杂合缺失(chr20:61,886,324~62,965,020),该杂合缺损区包含KC⁃NQ2基因、CHRNA4基因等,属于致病性变异。患儿父母该基因组区域未见异常,该缺失为新生突变。根据患儿发作表现、脑电图特点等相关检查结果,明确诊断为KCNQ2基因、CHRNA4基因缺失所致MRI阴性额叶癫痫,给予奥卡西平及苯巴比妥治疗后症状显著改善。结论KCNQ2、CHRNA4基因缺失导致的额叶癫痫起病年龄早、发作频繁,患儿临床表现结合基因检测可明确诊断,奥卡西平、苯巴比妥治疗有效。

肺腺癌CHRNA3-CHRNA5-CHRNB4基因簇表达预后意义TCGA数据库资料分析

目的尼古丁乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)作为一种尼古丁依赖相关性受体,其与吸烟行为以及吸烟量存在明显相关性,然而其在吸烟作为主要危险因素的肺癌发生发展中是否有重要作用目前尚罕见报道。本研究探讨nAChR在肺腺癌组织中的表达情况,以及CHRNA3-CHRNA5-CHRNB4基因簇在肺腺癌组织中的表达及预后意义。方法从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库收集486例肺腺癌数据集,下载CHRNA3-CHRNA5-CHRNB4基因簇表达谱资料及临床信息资料。应用免疫组化方法检测江苏省苏北人民医院2015-07-01-2017-12-31收治60例肺腺癌患者CHRNA3-CHRNA5-CHRNB4基因簇表达情况,分析其与临床病理特征关系及对预后的影响。采用基因集富集分析(genes enrichment analysis,GSEA)方法预测CHRNA5的调控基因。结果CHRNA5基因表达水平与患者吸烟情况(χ~2=20.175,P<0.001)、总生存期(overall survival,OS;χ~2=19.113,P<0.001)及无复发生存期(recurrence free survival,RFS;χ~2=22.116,P<0.001)有关联,CHRNB4基因表达水平与吸烟情况(χ~2=4.523,P=0.034)以及OS(χ~2=18.071,P<0.001)有关联。CHRNA5 mRNA表达水平与患者预后有关联,χ~2OS=6.666,P=0.010;χ~2RFS=8.239,P=0.004。CHRNA5高表达患者OS以及RFS短于低表达患者。免疫组化结果示,肿瘤恶性程度越高,CHRNA5表达越高。60例肺腺癌患者CHRNA5阳性表达率为58.3%(35/60)。CHRNA5高表达样本富集到细胞循环、骨架蛋白调控、紧密连接和TGFβ通路等基因集。结论在肺腺癌组织中,CHRNA3-CHRNA5-CHRNB4基因簇高表达是一种预后不良因素。CHRNA5可以作为预测患者转移及判断预后的有效生物标志物。

CHRNA5-A3-B4基因簇与吸烟行为的相关性研究进展

烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)是一种配体门控离子通道受体,可与乙酰胆碱、尼古丁等物质结合而释放多种神经递质,进而参与物质的合成与分泌。CHRNA5-A3-B4基因簇位于nAChRs 15q25.1染色体上,可编码α5、α3、β4亚基,其可相互协调,共同调控基因位点,增强基因表达,影响生物性状。越来越多的研究发现,多种因素均可对吸烟行为产生影响,其中全基因组关联研究(GWASs)已明确CHRNA5-A3-B4基因簇与尼古丁依赖性和吸烟量具有强关联性。本文就CHRNA5-A3-B4基因簇与吸烟行为的相关性进行综述,以期为戒烟药物新靶点的开发和烟草相关疾病的基因干预治疗提供新思路。