CHRNA5-A3-B4基因簇多态性与烟草依赖易感性研究进展

烟草依赖又称尼古丁依赖,即对烟草中成瘾性物质尼古丁的依赖。尼古丁主要与烟碱型乙酰胆碱受体结合引起多巴胺释放继而导致吸烟成瘾。全基因组关联研究已确定了CHRNA5-A3-B4基因簇与吸烟严重程度和尼古丁依赖之间的关联,CHRNA5编码的α5亚基作为其他nAChRs亚基的“附件”,被证实参与尼古丁对多巴胺神经元的刺激作用,其基因多态性使CHRNA5蛋白序列改变而导致烟草依赖的发生。CHRNA3在大脑某些特定区域表达并在多巴胺神经元调节中发挥作用,其多个SNP位点通过调节mRNA而影响烟草依赖的发生。CHRNB4编码的β4亚基主要与α3亚基共组装共表达,具有缓慢脱敏和对尼古丁低亲和的特点。现综述CHRNA5-A3-B4基因簇多态性与烟草依赖的相关性,为烟草依赖的干预及靶向治疗提供新思路。

烟碱型乙酰胆碱受体亚基α5基因rs16969968位点与吸烟行为相关性的Meta分析

目的本研究系统评价CHRNA5基因rs16969968位点与吸烟行的相关性。方法通过检索中国知网(CNKI)、万方数据库及PubMed数据库,检索时间为建库至2021年2月。按照拟定的纳入排除标准筛选文献,提取相关信息,评价数据质量,采用RevMa n 5.0、Stata12.0软件进行Meta分析,计算合并OR值及其95%CI,并进行敏感性分析及发表偏倚评估。结果共纳入7篇文献。在等位基因模型(G vs A:OR=0.90,95%CI:0.70~1.16,P=0.42)、相加模型(GG vs AA:OR=0.83,95%CI:0.62~1.22,P=0.22)和显性模型(GG+GA vs AA:OR=0.90,95%CI:0.71~1.15,P=0.41)中,rs16969968位点与吸烟行为无相关性;在隐性模型中(GG vs GA+AA),rs16969968位点与吸烟行为具有相关性,基因型为GG的人群发生吸烟行的风险高于基因型为GA+AA的人群,差异具有统计学意义(OR=0.84,95%CI:0.72~0.89,P=0.03);在共显性模型(GG vs GA)中,rs16969968位点与吸烟行为具有相关性,基因型为GG的人群发生吸烟行为风险高于基因型为GA的人群,差异具有统计学意义(OR=0.92,95%CI:0.85~0.99,P=0.02)。结论CHRNA5基因rs16969968与吸烟行为具有相关性,携带A等位基因人群与吸烟行为具有更强的相关性。

CHRNA5基因表达下调对肺癌细胞VEGF表达的影响

目的体外研究非小细胞肺腺癌A549细胞中CHRNA5基因表达下调对尼古丁促肺癌细胞增殖及VEGF表达的影响。方法实验分为0μmol/L尼古丁组、1μmol/L尼古丁组、转染阴性对照组(1μmol/L尼古丁+si-NC)和转染组(1μmol/L尼古丁+CHRNA5-siRNA)。设计合成编码α5-nAChR的CHRNA5基因siRNA片段,脂质体介导转染A549细胞,RT-PCR检测CHRNA5-siRNA转染后α5-nAChR和VEGF mRNA水平的表达,Western blotting检测转染后α5-nAChR蛋白水平的表达,ELISA法检测转染后细胞上清液中VEGF蛋白水平的表达,CCK-8方法检测α5-nAChR下调对尼古丁促肺癌细胞增殖的影响。结果 CHRNA5-siRNA转染A549细胞后,转染组α5-nAChR和VEGF mRNA表达和蛋白表达量明显低于转染阴性对照组(P<0.05),且显著抑制尼古丁促肺癌细胞的增殖(P<0.05)。结论α5-nAChR表达下调能抑制尼古丁促肺癌细胞的增殖,降低VEGF的表达。α5-nAchR及其信号转导系统在吸烟相关性肺癌发生、发展中可能发挥重要作用,可作为肺癌预后预测指标和治疗靶点。

肺腺癌CHRNA3-CHRNA5-CHRNB4基因簇表达预后意义TCGA数据库资料分析

目的尼古丁乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)作为一种尼古丁依赖相关性受体,其与吸烟行为以及吸烟量存在明显相关性,然而其在吸烟作为主要危险因素的肺癌发生发展中是否有重要作用目前尚罕见报道。本研究探讨nAChR在肺腺癌组织中的表达情况,以及CHRNA3-CHRNA5-CHRNB4基因簇在肺腺癌组织中的表达及预后意义。方法从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库收集486例肺腺癌数据集,下载CHRNA3-CHRNA5-CHRNB4基因簇表达谱资料及临床信息资料。应用免疫组化方法检测江苏省苏北人民医院2015-07-01-2017-12-31收治60例肺腺癌患者CHRNA3-CHRNA5-CHRNB4基因簇表达情况,分析其与临床病理特征关系及对预后的影响。采用基因集富集分析(genes enrichment analysis,GSEA)方法预测CHRNA5的调控基因。结果CHRNA5基因表达水平与患者吸烟情况(χ~2=20.175,P<0.001)、总生存期(overall survival,OS;χ~2=19.113,P<0.001)及无复发生存期(recurrence free survival,RFS;χ~2=22.116,P<0.001)有关联,CHRNB4基因表达水平与吸烟情况(χ~2=4.523,P=0.034)以及OS(χ~2=18.071,P<0.001)有关联。CHRNA5 mRNA表达水平与患者预后有关联,χ~2OS=6.666,P=0.010;χ~2RFS=8.239,P=0.004。CHRNA5高表达患者OS以及RFS短于低表达患者。免疫组化结果示,肿瘤恶性程度越高,CHRNA5表达越高。60例肺腺癌患者CHRNA5阳性表达率为58.3%(35/60)。CHRNA5高表达样本富集到细胞循环、骨架蛋白调控、紧密连接和TGFβ通路等基因集。结论在肺腺癌组织中,CHRNA3-CHRNA5-CHRNB4基因簇高表达是一种预后不良因素。CHRNA5可以作为预测患者转移及判断预后的有效生物标志物。

CHRNA5-A3-B4基因簇与吸烟行为的相关性研究进展

烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)是一种配体门控离子通道受体,可与乙酰胆碱、尼古丁等物质结合而释放多种神经递质,进而参与物质的合成与分泌。CHRNA5-A3-B4基因簇位于nAChRs 15q25.1染色体上,可编码α5、α3、β4亚基,其可相互协调,共同调控基因位点,增强基因表达,影响生物性状。越来越多的研究发现,多种因素均可对吸烟行为产生影响,其中全基因组关联研究(GWASs)已明确CHRNA5-A3-B4基因簇与尼古丁依赖性和吸烟量具有强关联性。本文就CHRNA5-A3-B4基因簇与吸烟行为的相关性进行综述,以期为戒烟药物新靶点的开发和烟草相关疾病的基因干预治疗提供新思路。

α5-烟碱型乙酰胆碱受体表达下调对肺癌细胞HIF-1α表达的影响

目的通过下调α5-烟碱型乙酰胆碱受体(α5-nAChR)的表达,体外研究尼古丁促肺癌细胞增殖过程中α5-nAChR对缺氧诱导因子(HIF-1α)表达的影响。方法以不同浓度尼古丁作用人肺腺癌细胞株A549,分别采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测A549细胞中α5-nAChR、HIF-1αmRNA和蛋白的表达。MTT法、实时荧光定量PCR、Western blotting检测CHRNA5-siRNA转染后,尼古丁促A549细胞增殖的作用和HIF-1α表达的变化。结果尼古丁浓度为1μmol/L时,α5-nAChR和HIF-1α表达明显升高(P<0.05),二者表达呈尼古丁浓度依赖性。CHRNA5-siRNA转染显著抑制α5-nAChR、HIF-1α表达(P<0.05),尼古丁促A549细胞增殖的作用明显受到抑制(P<0.05)。结论α5-nAchR通过调节HIF-1α的表达,在尼古丁促肺癌细胞增殖中起作用,提示α5-nAChR/HIF-1α信号轴可能是吸烟相关性肺癌发生的重要分子机制之一。

乙酰胆碱受体亚单位α5基因启动子区-10位T/A多态和肺癌易感性的关联分析

目的:研究中国汉族人群烟碱型乙酰胆碱受体亚单位α5(nicotine acetylcholine receptor subunits alpha5,CHRNA5)基因启动子区-10位T/A多态(rs503464)与肺癌遗传易感性之间的关系。方法:采用SNaPshot技术对505例经组织病理学确诊的肺癌患者和496例健康人的CHRNA5基因启动子区-10位T/A多态进行检测。结果:与携带纯合基因型TT/AA的个体相比较,杂合基因型TA携带者患肺癌的风险明显降低[校正后优势比(odds ratio,OR)=0.624,P<0.001]。等位基因频率分布在病例组和健康对照组间差异无统计学意义(P=0.97)。病理分型分析结果显示,杂合基因型TA携带者患肺腺癌和肺鳞癌的发病风险明显低于纯合基因型TT/AA携带者(OR值分别为0.597和0.542,均P=0.002)。分层分析后显示,这种保护作用在年龄大于60岁及无肿瘤家族史的人群中更显著(P<0.001)。结论:CHRNA5基因启动子区-10位杂合基因型TA可能与中国汉族人群罹患肺癌的遗传风险降低有关联。