应用rDNA ITS区测序评估API20C AUX及CHROMagar对酵母菌的鉴定

目的 使用真菌内转录间隔区（ITS ）测序分析鉴定酵母菌的方法评估API 20C AUX和CHROMagar两种鉴定方法,为临床实验室选择快速、准确鉴定酵母菌的方法提供依据.方法 收集同济医院2010～2012年临床分离的172株酵母菌,以ITS区测序分析鉴定方法为标准,对API 20C AUX及CHROMagar 24 h,48 h显色鉴定方法进行评估,计算其鉴定符合率.结果 与测序分析比较,API20C AUX鉴定对白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌的鉴定符合率均为100%,对新型隐球菌及近平滑念珠菌的鉴定符合率分别为95%和97.6%;CHROMagar对白色念珠菌和克柔念珠菌24 h和48 h鉴定符合率均为100%,对热带念珠菌24 h和48 h鉴定符合率分别为85.3%和94.1%,对光滑念珠菌24 h和48 h鉴定符合率分别为70%和83.3%,对新型隐球菌和近平滑念珠菌不能进行鉴定.结论 API 20C AUX鉴定系统可以作为临床实验室常规鉴定的手段,对于CHROMagar鉴定培养基只能用于实验室对酵母菌的初步筛查,对白色念珠菌、克柔念珠菌、光滑念珠菌和热带念珠菌的鉴定效果较好,对其他念珠菌及隐球菌的鉴定还需其他方法进行补充.

CHROMagar显色培养基在口岸从业人群沙门菌检测中的应用与评价

[目的]评价CHROMagar显色培养基在沙门菌检测中的应用效果。[方法]以API生化鉴定和血清凝集为金标准,用CHROMagar显色培养基对上海口岸2006年3～9月食品和公共场所从业人群进行检测,比较其敏感性、特异性和一致性。[结果]与金标准相比,CHROMagar显色培养基敏感性为89.66%,特异度为99.97%,符合率99.92%,Youden指数为0.8963,并具有较好的一致性(Kappa=0.928)。[结论]CHROMagar显色培养基具有敏感性高、特异性强,一致性好等特点,可用于口岸从业人员的沙门菌检测。

18h判读CHROMagar MRSA显色筛查培养基的研究

目的评估CHRO Magar耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)显色培养基在孵育18h时判读的敏感性和特异性等试验指标。方法选择2007年7月至2009年5月临床分离的176株MRSA阳性菌株和738株MRSA阴性菌株,分别孵育18h和24h判读后进行特异性和敏感性比较。结果 18h和24h判读结果的特异性分别为84.1%、90.0%;敏感性分别为92.1%、87.0%;阳性预测值分别为72.0%、67.0%;阴性预测值分别为96%、97%;阳性似然比分别为10.5、8.2;阴性似然比分别为0.17、0.11。与18h比较,在24h判读结果中有11株阳性菌株在孵育24h时变色(18h判读为阴性),20株阴性菌株在孵育18h时出现红色。假设MRSA的患病率分别为15%、25%、35%时孵育18h的判读阳性预测值分别为65%、78%、85%;孵育24h的判读阳性预测值分别为60%、74%、82%。结论数据证明CHROMagar MRSA用于MRSA的筛查在18h时就具有较高的特异性和敏感性;随着患病率的增高,18h和24h判读阳性预测值差距缩小;在实际工作中,18h判读可缩短样本报告周期,并且使临床医生在选择抗生素时更加快速、准确。

CHROMagar ECC显色培养基在肠道菌鉴定中的应用

目的总结CHROMagarECC显色培养基在肠道菌鉴定中的应用,在鉴定肠道杆菌方面为临床微生物实验室推荐一种简便实用的方法。方法利用CHROMagarECC显色培养基和API等鉴定1247株来自全国18家大型综合性医院的肠道杆菌。结果总共770株大肠埃希菌中,90.5%(697株)在CHROMagarECC显色培养基上为蓝色,另外9.5%(73株)为无色,328株克雷伯氏菌在ECC上有327株显示为紫色,100株阴沟、产气等肠杆菌中98株显示为紫色,13株沙雷氏100%、29株枸橼酸杆菌96.6%显示为紫色,7株摩根摩根菌中6株为无色。结论CHROMagarECC显色培养基在肠道菌鉴定中有其快速、方便等优点,特别适用于细菌耐药性监测的大批量的肠道细菌筛选鉴定及重新鉴定。

CHROMagar念珠菌显色培养基细菌干扰分析

目的探讨CHROMagar念珠菌显色培养基上生长的细菌来源、组成、显色变化及生长规律。方法随机选取标本同时接种于CHROMagar念珠菌显色培养基(以下简称显色培养基)和传统沙保罗培养基上,35℃培养,24,48,72 h各观察并记录杂菌菌落生长时间、大小及颜色,分离、鉴定到种。结果显色培养基上细菌生长率为16.7%,沙保罗培养基为36.5%;干扰显色培养基的细菌主要为革兰阴性杆菌(91.9%);部分细菌呈现出非特异性显紫色或深紫色,与光滑假丝酵母菌所显示的颜色相似,须区分。结论显色培养基对杂菌的抑制作用明显优于传统沙保罗培养基,但仍有待改善。

CHROMagar Candida培养基分离鉴定白色念珠菌

目的探讨念珠菌特别是白色念珠菌鉴定的简便可靠方法。方法采用传统培养基沙保罗氏琼脂及CHROMagarCandida培养基和API-20C-AUX酵母菌鉴定板对临床送检的73份标本进行念珠菌的分离及鉴定,并比较其结果。结果对念珠菌的分离两种培养基基本一致,而CHROMagarCandida培养基通过显色能对念珠菌作出鉴定。结论与传统培养基相比,CHROMagarCandida培养基具有培养结果明显,鉴定简便快速的优点。

经修饰CHROMagar不动杆菌显色培养联合MALDI-TOF-MS快速筛查肠道耐碳青霉烯鲍氏不动杆菌的研究

目的探讨初步建立经修饰的CHROMagar不动杆菌显色培养联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)的方法用于快速筛查肠道耐碳青霉烯鲍氏不动杆菌(CRAB)。方法采集2017年4-6月入住医院ICU的319名患者直肠拭子并接种至含4μg/ml美罗培南的CHROMagar不动杆菌显色培养基,MALDI-TOF-MS鉴定可疑菌株。快速筛查结果用recA基因测序分析及美罗培南MIC值进行验证。结果快速筛查到18.18%(58/319)的患者肠道携带CRAB。recA基因测序分析显示该58株菌全为鲍氏不动杆菌,且有57株对美罗培南耐药,符合率高达98.28%(57/58)。结论经修饰的CHROMagar不动杆菌显色培养联合MALDI-TOF-MS可快速筛查肠道耐碳青霉烯鲍氏不动杆菌,特异性高、稳定性好,对医院感染早期监测与积极防控具有重要的应用价值。

激光解析质谱联合CHROMagar显色培养技术鉴定环境表面MRSA的效果评价

目的评价激光解析质谱联合CHROMagar MRSA显色培养基在鉴定环境表面耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的应用价值。方法采用CHROMagar MRSA显色培养技术,对5家医院重症监护病房(ICU)环境表面现场采集的标本中MRSA进行培养鉴定。结果从CHROMagar MRSA显色培养基上获得573株可疑菌落,经MALDI-TOF-MS鉴定确认MRSA菌株147株,检出率为25.7%。同时用常规PCR方法和头孢西丁药敏试验验证确认MRSA菌株分别为145株和140株,符合率分别为98.6%和95.2%。结论 MALDI-TOF-MS技术联合CHROMagar MRSA显色培养基可作为更快速、更准确的MRSA筛查方法,适用于医院感染的快速诊断与防控。

口腔黏膜真菌鉴定方法的比较

比较常见用于黏膜真菌菌种鉴别的多种方法,探寻最佳的鉴别方法。采集230例普通人群口腔黏膜样本,分别用玉米吐温-80培养观察厚膜孢子法、糖发酵生化反应法、CHROMagar假丝酵母菌显色培养基法、ITS基因的PCR-RFLP（聚合酶链反应-限制性片段长度多态性）法、ITS测序菌种鉴定法,鉴别真菌各菌株。结果显示：有56例菌株至少通过1种方法检出真菌;玉米吐温-80分离培养假丝酵母菌37株;50例菌株ITS基因测序共鉴定出8个菌种,白假丝酵母菌（C.albicans）29株,近平滑假丝酵母菌（C.parapsilosis）10株,热带假丝酵母菌（C.tropicalis）5株,Candida metapsilosis 1株,Lodderomyces elongisporus 1株,克柔假丝酵母菌（Candida krusei）1株,乙醇假丝酵母菌（C.ethanolica）1株,季也蒙毕赤酵母菌（Pichia guilliermondii）2株;CHROMagar假丝酵母菌显色培养基法鉴定出3种菌株,分别是白假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌;PCR-RFLP法检出5种菌株,分别是白假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌、季也蒙毕赤酵母菌、克柔假丝酵母菌,与基因的测序鉴定一致率为91%;糖发酵生化反应法阳性标本占被检出真菌例数的46.4%（26/56）。结果表明：ITS基因的测序法可以准确鉴定真菌各个菌种;PCR-RFLP法能鉴定常见的菌种,但操作繁琐;CHROMagar假丝酵母菌显色培养基法能快速准确鉴别3种常见假丝酵母菌菌种;玉米吐温-80可以准确培养鉴别白假丝酵母菌;糖发酵生化反应法,缺乏足够的敏感度和特异性,难以准确鉴别各个菌种。

科玛嘉真菌显色培养基的临床应用

随着免疫抑制剂、激素、广谱抗生素、抗癌药物的广泛使用,器官移植、各种侵袭性操作、骨髓移植等技术应用增多,临床上念珠菌的感染率逐年呈上升趋势[1]。科玛嘉念珠菌显色培养基（CHROMagar）是通过菌落的不同颜色和不同形态特征来快速分离培养鉴定真菌的培养基[2]。自2012年4月至2012年11月,共收集我院1138例住院标本,检测结果报告如下。

科玛嘉念珠菌显色培养基的临床应用评价

目的评价科玛嘉(CHROMagar)念珠菌显色培养基在临床念珠菌鉴定中的应用价值。方法将标本同时接种沙氏基和CHROMagar念珠菌显色培养基,沙氏基上生长的酵母菌经ATB鉴定,CHROMagar念珠菌显色培养基根据菌落颜色直接判读。结果94份标本中CHROMagar念珠菌显色培养基鉴定出白色念珠菌35株,热带念珠菌8株,光滑念珠菌6株,克柔念珠菌2株,其他念珠菌6株,与ATB鉴定结果对比,白色念珠菌符合率为100%,热带念珠菌为100%,光滑念珠菌为85.7%,克柔念珠菌为100%。结论CHROMagar念珠菌显色培养基能快速、简便、准确鉴定临床常见念珠菌,明显提高对混合感染的识别。

科玛嘉显色培养基在快速检测呼吸道念珠菌感染的应用

目的 检测科玛嘉显色培养基(CHROMagar)在快速检测呼吸道念珠菌感染的价值。方法 将临床呼吸道标本接种于CHROMagar显色培养基及沙氏培养基上。沙保罗培养基上生长的念珠菌经MICROSCAN AS-4微生物及药敏分析仪鉴定,CHROMagar显色培养基上生长的直接根据菌落的颜色及形态进行判读。结果 306份标本经沙保罗培养基分离出并经仪器鉴定的白色念珠菌为62株、热带念珠菌为28株、克柔氏念珠菌16株、光滑珠拟酵母菌25株、季也蒙念珠菌2株。CHROMagar显色培养基上分离及鉴定与前者的符合率为96.5％。结论 科玛嘉显色培养基能替代传统的沙保罗培养基且具有快速鉴定、简便、价廉的优点,但只能鉴定出白色、热带、克桑氏、近平滑四种念珠菌。

CHROMager显色培养基分离沙门菌的初步应用和评估

目的 初步评估CHROMagar 显色培养基(CAS)检测肛拭中沙门菌的效果。方法 以实验室保存沙 门菌和非沙门菌作为测试菌共190株,测试CAS、武汉SS平板(WS)上细菌生长的敏感性、特异性;并应用CAS 与WS对1717份餐饮业人员肛拭作沙门菌的现场分离效果比较。结果 CAS对测试菌和现场检测的敏感性均 为100%,明显优于WS的57.14%和31.58%;两者在肛拭样品中沙门菌检出率分别为1.11%(19/1717)和 0.35%(6/1717)。结论 CAS平板具有敏感性高、检出率高、易于掌握等特点,建议作为粪便常规分离或鉴别沙 门菌的首选培养基。

rDNA-ITS 序列测定等三种方法鉴定假丝酵母菌结果比较

目的通过三种假丝酵母菌鉴定方法的比较,为临床选择假丝酵母菌的鉴定方法提供参考。方法用科玛嘉显色培养基、API 20C AUX生化系统和rRNA-ITS序列测定分析鉴定住院患者口腔培养出的198株假丝酵母菌,比较3种鉴定方法的结果。结果 API 20C AUX生化系统与rDNA-ITS序列测定分析鉴定结果一致,科玛嘉显色培养基与API 20C AUX生化系统和rDNA-ITS序列测定分析鉴定的符合率白假丝酵母菌为97.84%,热带假丝酵母菌的符合率为93.33%,光滑假丝酵母菌和克柔假丝酵母菌的符合率分别为90.91%、88.89%,其他假丝酵母菌科玛嘉不能鉴定。结论 API 20C AUX生化系统与rDNA-ITS序列测定分析鉴定假丝酵母菌的结果有较好的一致性,rDNA-ITS序列测定分析鉴定假丝酵母菌有望成为假丝酵母菌鉴定较好的方法。科玛嘉显色培养基方法可以简便有效的鉴定最常见的4种假丝酵母菌。

科玛嘉念珠菌培养基在儿童牙菌斑中白色念珠菌分离培养的应用

目的：探讨科玛嘉念珠菌培养基（CAC）对儿童牙菌斑中白色念珠菌分离培养的有效性。方法：分别采用CAC和沙保培养基（SDA）分离培养儿童龋损牙体组织及无龋牙体龈上菌斑中的白色念珠菌，通过生化鉴定及PCR技术等方法对分离菌株进行鉴别，运用卡方检验比较两种培养基对白色念珠菌的检出情况。结果：CAC和SDA对牙菌斑中白色念珠菌的检出率分别为35．3％、31．7％（P〈0．05）。培养24—48h后，CAC平板通过颜色判读白色念珠菌的结果与生化鉴定和PCR基因分型的结果一致。结论：CAC是一种快速、有效、特异性较强的念珠菌培养基，适合用于分离培养儿童牙菌斑中的白色念珠菌。

定位显色培养基快速鉴定尿路感染病原菌的临床应用评价

目的探讨显色培养基对尿路感染病原菌的快速鉴定作用。方法对临床疑为尿路感染患者中段尿标本,同时用科玛嘉定位显色培养基和血平板进行对比实验。结果在1 369例临床尿标本中,1 023例标本在两种培养基上都无细菌生长,344例有细菌生长,另外2例在血平板上不生长而在显色培养基上有生长;显色培养基显色鉴定与VITEK-32全自动微生物检测分析仪鉴定结果相符。结论显色培养基对引起尿路感染常见病原菌的生长无抑制作用,两种培养基对病原菌的鉴定结果差异无统计学意义,显色培养基能快速确定病原菌的属别,对及时合理使用抗菌药物和识别混合感染也有一定意义。