枸杞子-菊花药对提取物对豚鼠光源性近视模型的影响及机制研究

目的考察枸杞子与菊花药对配伍对发育期豚鼠光源性近视发生及发展的影响。方法采用三基色荧光灯照射发育期豚鼠,建立光源性近视模型,枸杞子-菊花提取物添加饲料饲养豚鼠,利用眼科A型超声测量仪检测眼轴,HE染色观察豚鼠视网膜病理损伤,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测豚鼠视网膜多巴胺(DA)及褪黑素(MT)含量,转录组学分析等方法探讨枸杞子-菊花对豚鼠光源性近视的影响。结果造模6周后,与正常组相比,模型组豚鼠眼轴显著增长(P<0.01),近视模型建立成功;枸杞子-菊花提取物可有效减缓模型组豚鼠晶状体加厚、玻璃体腔加深,进而延缓整体眼轴的过度增长;模型组豚鼠视网膜组织变薄,视网膜内核层及外核层的厚度及细胞数目显著降低,神经节细胞核稀疏,神经节细胞层空泡化明显,枸杞子-菊花提取物能保护视网膜细胞,视网膜内核层及外核层的厚度及细胞数目增加,神经节细胞核增多;ELISA检测显示模型组豚鼠视网膜内DA、MT水平显著降低(P<0.05),中、高剂量枸杞子-菊花提取物能够有效提升模型组豚鼠视网膜及血清中DA含量(P<0.01,P<0.001);眼部转录组学分析筛选的差异基因主要富集于过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)信号通路、含胶原蛋白的细胞外基质等相关途径;ELISA结果显示,高剂量枸杞子-菊花提取物能显著增加PPARγ、COL1A1含量(P<0.01),降低SMA含量(P<0.05)。结论枸杞子-菊花药对具有延缓发育期豚鼠光源性近视发生及发展效用,保护视网膜细胞,改善人工光环境导致的DA分泌紊乱,参与调控眼部PPARγ水平,对光源性近视的防控具有积极意义,为临床合理用药和创制眼功能健康产品提供了科学依据。

陈新宇教授重用菊花治疗头痛经验

头痛在临床非常常见,既可以疾病的形式出现,亦可为其他疾病的伴随症状。陈新宇教授临床处方常重用菊花,以取其平抑肝阳、潜降摄纳之功用,通过合用桂枝汤加川芎、白芷、细辛等辛温之品,佐制其苦寒之性,用于治疗以阴阳失调为主要病机变化类型的头痛患者,通过辛温通阳、平抑肝阳、收敛潜阳、温补阳气等方法起到治疗作用,疗效明显。

菊花茎叶清除自由基动力学特性及抗氧化活性成分的在线筛选

目的本研究对菊花茎叶抗氧化活性和清除自由基动力学特性进行考察,在线筛选与清除自由基相关的活性成分。方法采用DPPH法和ABTS法观察菊花茎叶提取物的抗氧化活性,比较了样品浓度、反应温度和反应时间等影响因素对自由基清除率的影响,测定了菊花茎叶清除自由基活性的半数清除率(IC50)。以木犀草素葡萄糖醛酸苷、木犀草苷和咖啡酸等黄酮成分、绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、B、C等酚酸成分为指标,采用HPLC法对反应前后菊花茎叶进行了含量测定,计算上述成分的消耗率。结果菊花茎叶的样品浓度、反应温度和反应时间均对其对清除DPPH自由基和ABTS自由基清除率有影响;菊花茎叶清除DPPH和ABTS自由基的IC50分别为0.395 mg·mL^(-1)、2.039 mg·mL^(-1)。与DPPH和ABTS自由基反应后,菊花茎叶样品中上述测定成分的含量均明显下降,推测上述成分可能是菊花茎叶抗氧化的活性成分。结论菊花茎叶具有较好的清除自由基活性,本研究初步明确其动力学特性,在线筛选出了抗氧化活性成分,为今后菊花茎叶的综合开发提供实验依据。

基于CiteSpace的国内近30年野菊文献计量可视化分析

系统梳理野菊研究进展,明确野菊各领域研究现状和发展态势。以中国知网CNKI数据库收录的1994~2023年发表的野菊相关中文期刊文献为数据样本,结合CiteSpace软件,对文献年发表数量、所属学科、发表期刊、资金支持、研究作者和机构合作网络、关键词等进行动态、可视化分析。研究结果表明,近30年我国野菊研究经历了快速发展期和衰退期两个时期,对应的研究热点分别为临床应用和质量评价。高被引文献主要与野菊药理活性和进化育种相关,研究经费主要来自国家自然科学基金。发文机构和期刊主要集中于医药类和农学类,南京农业大学为主要研究机构,华润三九医药股份有限公司为研究最活跃的单位,发文量最多的作者是陈发棣,其次是郭巧生和韩正洲。

菊欧氏杆菌(Erwinia chrysanthemi)产生新抗生素Echcin Ⅰ的化学结构分析

Echcin Ⅰ是一种新的广谱抗生素,EI/MS谱显示Echcin Ⅰ的分子离子峰为654,FAB/MS和SCI/MS谱均有一强的655峰(M+H)^+,根据高分辨质谱和元素分析结果显示Echcin Ⅰ的分子式为C_(10)H_(87)ON_5,精确分子量为653,6856。Echcin Ⅰ的紫外吸收为189nm;主要的红外吸收峰是3367,3282,1605(-NH_2)∶2920,2849(-CH_2-),722(-C-(CH_2)_n-C-)。~1H-NMR的主要谱线有(δ_(TMS)^(CD_3OD))∶0.84t,1.25s,1.36d,1.46m,1.55m,2.63s,2.70m和3.56d。尽管使用了高分辨的核磁共振仪进行测量,Echcin Ⅰ的^(13)C-NMR谱仅出现15条谱线,即(ppm)∶14.7(-CH_3),23.9,26.9,27.0,27.1,27.2,30.8,31.1,33.4,37.6,39.0,39.7,40.9(-CH_2-),52.5(-CH-)和71.2(-CH-),结合使用无畸变极化转移增强法分析,得出Echcin Ⅰ的化学结构为3-羟基-11,19,27,35-四氨基-正四十烷胺。

不同前处理方法对5种中药农药残留量检测的影响

目的:研究分析不同前处理方法对当归、菊花、枸杞子、黄芪、金银花中农药残留测定结果的影响。方法:样品分别经QuEChERS法和高速匀浆结合亲水亲油平衡(HLB)材料固相萃取法处理,采用超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)同时测定克百威、3-羧基克百威、甲拌磷、甲拌磷砜、甲拌磷亚砜、甲基异柳磷等5种农药残留量。采用超高效液相色谱柱Agilent Poroshell 120 SB-C_(18)(2.1 mm×100 mm,2.7μm);采用梯度洗脱方式,水相为含5 mmol·L^(-1)甲酸铵的0.1%甲酸溶液,有机相为含5 mmol·L^(-1)甲酸铵的0.1%甲酸溶液-乙腈(体积比5∶95);柱温为35℃;质谱分析中以电喷雾离子源正离子模式扫描,多反应监测模式检测。结果:QuEChERS法和HLB固相萃取法测得结果偏差在9.09%~55.56%之间。结论:中药农药残留量检测前处理方法的选定,建议以阳性样本的测定数据为评价指标与依据,选择测定值较高、提取效率高的方法。

Effect of Lanthanum on Growth and Extracellular Enzyme Acitivty of Erwinia Chrysanthemi in vitro

The effect of lanthanum on the growth and extracellular enzyme activity of Erwinia chrysanthemi(Ech) was studied. Lanthanum inhibited the growth of Ech in solid culture at the concentration of 50, 100, 150, 200, 250, 300 and 350 mgL-1, and the inhibition increased with the increase of the RE concentration. The formation of colony delayed and the diameter of colony decreased. Lanthanum stimulated the growth of Ech within 24h when the lanthanum concentration was less than 200 mgL-1 in liquid medium, but significantly inhibited the growth of Ech with the increase of lanthanum concentration and culture time. When the concentration was higher than 350 mgL-1, the growth of Ech was inhibited completely both in solid and liquid culture. The extracellular enzyme acitivity of Ech was affected by lanthanum at 200 mgL-1. The activity of cellulose was promoted more than that of protease but the activity of pectinase was decreased. The maceration to potato tuber tissue decreased when the cell free filtrate was tr

Bacteriostatic Effect of Extracts from 10 Kinds of Traditional Chinese Medicinal Materials and Garlic on Pectobacterium chrysanthemi

Pectobacterium chrysanthemi is one of the main pathogens of soft rot disease of Amorphophallus konjac.The bacteriostatic effect of extracts from 10 kinds of traditional Chinese medicine and garlic on Pectobacterium chrysanthemi was studied in this experiment.The results showed that the extracts of Coptis chinensis,garlic,Scutellaria baicalensis,Mume Fructus and Bupleurum had significant bacteriostatic effect.Among them,Coptis chinensis and garlic had the best bacteriostatic effect on Pectobacterium chrysanthemi,and the diameter of inhibition zone was 2.27 and 2.19 cm,respectively,followed by Scutellaria baicalensis,with the diameter of inhibition zone of 1.68 cm.The extracts of Coptis chinensis,Scutellaria baicalensis and garlic with good bacteriostatic effect were diluted by double dilution method,and the bacteriostatic effect was determined.The results showed that 2-fold dilution of Coptis chinensis and 2-fold and 4-fold dilution of Scutellaria baicalensis had significant bacteriostatic effect,but the bacteriostatic effect of garlic extract was not obvious after dilution.

怀菊花中化学成分的分离与鉴定

目的研究怀菊花Chrysanthemum morifolium Ramat的化学成分。方法怀菊花提取物采用Diaion HP-20、Toyopearl HW-40、MCI Gel CHP-20、ODS、硅胶、半制备液相等进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从怀菊花提取物中分离得到18个化合物,分别鉴定为3β-hydroxy-β-ionone-3-O-β-D-glucopyranoside(1)、pisumionoside(2)、(2E)-2-methyl-2-butene-1,4-diol-1-O-β-D-glucopyranoside(3)、(Z)-5′-hydroxyjasmone-5′-O-β-D-glucopyranoside(4)、(2E,8E)-十四烯-4,6-二炔-1,12,14-三羟基-1-O-β-D-葡萄糖苷(5)、对羟基苯丙醇(6)、3,4-二羟基苯乙醇(7)、6,7-二羟基香豆素(8)、对羟基苯乙酮(9)、芝麻素(10)、2-methylphenyl-O-β-D-xylopyranosyl-(1→6)-O-β-D-glucopyranoside(11)、chakyunglupalin B(12)、(R)-vicianin(13)、尿嘧啶(14)、胸腺嘧啶(15)、尿嘧啶核苷(16)、2′-脱氧胸腺嘧啶核苷(17)、L-苯丙氨酸(18)。结论化合物1~17为首次从该植物中分离得到。

LC-MS/MS测定菊花中氟虫腈残留量的不确定度评定

目的:评定高效液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)测定菊花中氟虫腈残留量的不确定度。方法:根据《中华人民共和国药典》2020年版(四部)通则2341的要求,采用LC-MS/MS对菊花中氟虫腈残留量进行测定,并通过bottom-up法评定其不确定度。结果:在0.01、0.02、0.05 mg·kg^(-1)添加水平下,当菊花中氟虫腈残留量为0.015 mg·kg^(-1),扩展不确定度为0.0034 mg·kg^(-1),其残留量结果表示为(0.0150±0.0034)mg·kg^(-1)(k=2)。结论:不确定度的主要来源是标准工作溶液的配制与标准曲线的拟合。

LC-MS/MS测定菊花不同加工方式下8种农药的加工因子

目的:通过考察菊花中8种易检出农药在不同加工方式下的加工因子,为菊花服用安全性评估提供参考依据。方法:使用菊花农药残留阳性样品,模拟菊花常用的加工方法(水煎煮、冲泡、70%乙醇提取),并采用液相色谱-质谱法测定加工过程中菊花各阶段的农药残留量,计算农药转移率和加工因子。结果:采用水煎煮和冲泡法,8种农药的转移率差异较大,呈现与农药的极性正相关的变化规律;而采用70%乙醇提取,8种农药转移至终产品中的残留量均较高。结论:通过对不同加工方式下菊花农药加工因子进行研究,为菊花中农药残留限度的制定提供参考依据,并为科学评估菊花中农药残留风险提供数据支持。

基于网络药理学探究枸杞子-菊花药对治疗糖尿病视网膜病变的作用机制

目的:基于网络药理学探究枸杞子-菊花药对治疗糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy, DR)的干预机制。方法:利用中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform, TCMSP)检索枸杞子、菊花的活性成分及相关靶点。利用Cytoscape 3.9.1绘制“药对-活性成分-作用靶点”网络图,并进行拓扑分析筛选枸杞子-菊花药对治疗DR的主要活性成分。利用GeneCards数据库、在线人类孟德尔遗传数据库及药物靶标数据库检索DR相关靶点。将活性成分相关靶点与疾病靶点导入Venny 2.1在线平台,绘制韦恩图,交集靶点即为枸杞子-菊花药对治疗DR的潜在靶点。将潜在靶点上传至STRING数据库构建PPI网络关系,导入Cytoscape 3.9.1软件进行可视化,PPI网络拓扑分析筛选枸杞子-菊花药对治疗DR的核心靶点。将核心靶点输入Metascape在线平台进行基因本体(gene ontology, GO)富集分析及京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG)信号通路富集分析。将活性成分、核心靶点、信号通路导入Cytoscape 3.9.1软件构建“活性成分-作用靶点-信号通路-DR”网络图。结果:利用TCMSP数据库得到52种活性成分及247个相关靶点。“枸杞子菊花药对-活性成分-作用靶点”网络分析筛选出槲皮素、β-谷甾醇、山柰酚等为枸杞子-菊花药对治疗DR的主要活性成分。检索得到DR相关靶点2 347个,枸杞子-菊花药对治疗DR的潜在靶点133个。PPI网络分析筛选出蛋白激酶Bα(protein kinase Bα,AKT1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3,CASP3)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、前列腺素内过氧化物合酶2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2)等为核心靶点。GO富集分析得到生物过程919个、细胞组分23个、分子功能47个。KEGG信号通路富集分析得到134条信号通路。“活性成分-作用靶点-信号通路-DR”网络分析发现枸杞子-菊花药对通过槲皮素、β-谷甾醇、山柰酚等活性成分作用于PTGS2、CASP3、AKT1等靶点调控糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、IL-17信号通路、TNF信号通路、PI3K-AKT信号通路、MAPK信号通路等进而改善DR。结论:枸杞子-菊花药对通过多成分、多靶点、多通路作用于DR。

不同产地野菊花挥发油化学成分比较研究

目的 :通过研究分析不同产地野菊花挥发油的成分 ,为野菊花的开发利用提供实验依据。方法 :采用水蒸气蒸馏法提取野菊花挥发油 ,用GC毛细管柱进行分析 ,归一化法测其相对含量 ,并用气相色谱 质谱法对化学成分进行鉴定。结果 :广西野菊花含主要成分 18个 ,广东野菊花 17个 ,湖北野菊花 2 0个。结论 :广西、广东、湖北野菊花挥发油化学成分种类和含量均有明显的差别。

HPLC测定野菊花中蒙花苷与木犀草素的含量

目的：建立野菊花中蒙花苷与木犀草素的含量测定方法。方法：运用高效液相色谱法测定，色谱柱为Thermo Hypersil BDSC18（4．6mm×250mm，5μm），流动相为甲醇-四氢呋喃-水（50：4：46），流速0．6mL·min^-1；检测波长350nm。结果：蒙花苷与木犀草素分别在0．0152～0．152mg·mL^-1和0．0018～0．018mg·mL^-1线性关系良好，r分别为0．9998，0．9994。平均回收率分别为98．9％，97．2％，RSD均小于3．0％。结论：本法方便，准确，可以用于野菊花药材的质量控制。

魔芋软腐病菌分子鉴定与遗传多样性

通过对分离的魔芋软腐病菌株和其它参试菌株的致病性测定、选择性培养基培养性状观察和16S-23S rDNA转录间隔区PCR(ITS-PCR)分析,将测试的33株软腐病菌株主要分为3个组群。第1组群为胡萝卜软腐欧文氏杆菌胡萝卜软腐亚种(Erwinia carotovorasubsp.carotovora,E.c.c.);第2组群为菊欧文氏杆菌(Erwinia chrysanthemi,E.ch.);还有一组未能确定的菌株。利用细菌基因组重复序列通用引物BOX和J3进行Rep-PCR特异性扩增,引起软腐病的菌株E.c.c.和E.ch.(ITS-PCR鉴定)种内的Rep-PCR指纹存在明显的遗传分化,经聚类分析,在0.1水平上把E.c.c.13株区分为5个类群。

野菊花中黄酮类成分的抗菌活性及指纹图谱

目的评估野菊花中黄酮类成分的抗菌活性并建立其HPLC指纹图谱的测定方法。方法采用微量肉汤稀释法检测野菊花总黄酮及蒙花苷对临床常见致病菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。采用如下液相条件进行指纹图谱分析:Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,3μm),乙腈-水(0.05%磷酸)流动相梯度洗脱,流速1.0 ml/min,室温,检测波长326 nm,并采用指纹图谱相似度软件对野菊花总黄酮成分进行质量评价。结果野菊花总黄酮对葡萄牙假丝酵母的MIC值为61.6μg/ml,蒙花苷对其MIC值为18.0μg/ml。在抗菌活性基础上,建立了14批野菊花药材黄酮类指纹图谱共有模式,标定出野菊花中指纹图谱的15个共有峰,归属了其中8个黄酮类化合物。结论野菊花总黄酮及蒙花苷单体对葡萄牙假丝酵母的体外抗菌活性较好。HPLC指纹图谱方法重现性好,可用于野菊花黄酮类活性成分的质量控制,为野菊花质量控制研究提供前期基础。

红外光谱和聚类分析法在药用菊花产域分类鉴别中的应用

目的:对不同产地的213个药用菊花样本进行产域模式识别方法学研究。方法:运用模式识别技术的SIMCA法,凭借红外光谱具有的指纹特性,构建药用菊花样品的红外谱图库,作为模式识别提取的特征数据,以随机分取的150个样品为训练集,剩余为实验集。结果:该方法的每类产区的正确识别率均达到了60%以上,取得了较满意的分类效果。结论:红外光谱法结合聚类分析法可作为中药材产域分类鉴别的一种新的现代化方法。

杭白菊与野菊花的微量元素比较研究

采用火焰原子吸收光谱法对同属不同种菊科植物杭白菊及野菊的Ni,Zn,Mn,Cu,Mg,Fe,Ca和Pb等无机元素进行了分析测定。该方法的加标回收率为94.20%～110.50%,RSD<4.12%,具有良好的准确度和精密度。结果表明:杭白菊中的Ni,Zn,Fe,Pb的含量较高,而野菊花的Mn,Ca含量较高。此测定结果可为探讨杭白菊和野菊花中元素含量与其药效的相关性提供科学数据。

广东野菊花挥发油的化学成分

采用水蒸汽蒸馏法从野菊花中提取挥发油 ,试用不同类型的毛细管柱进行分析 ,找出了最佳分析条件 ,共分离出54个峰 ,用归一化法测定其相对含量 ,并用气相色谱 -质谱法对化学成分进行鉴定 ,共鉴定18个成分 ,占挥发油总量的99.8 %。

硫磺熏蒸前后菊花的HPLC指纹图谱比较研究

目的:建立菊花药材指纹图谱检测方法,并对硫磺熏蒸前后菊花药材的指纹图谱进行分析比较。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Waters C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.5%磷酸水溶液,梯度洗脱;柱温35℃,检测波长268 nm。结果:测定未经硫磺熏蒸和经过硫磺熏蒸的菊花药材样品共11批,建立了菊花药材HPLC指纹图谱的共有模式,确立12个共有峰,并且采用聚类分析方法对11批样品进行分析比较。结论:该方法准确可靠,重复性好,可用于硫磺熏蒸前后菊花药材的质量评价与控制。