基于CIMS的计算机集成编辑出版系统（CIEPS）研究

借鉴计算机集成制造系统(CIMS)基本哲理在机械行业的成功经验,提出将其哲理和技术应用于编辑出版行业;阐述了计算机集成编辑出版系统(CIEPS)的基本概念、功能构成、体系结构;介绍了基于CIMS的CIEPS模型;分析了CIEPS的特点并展望其发展前景.

对流免疫电泳(CIEP)实验试剂的研究

目的:研究与改良对流免疫实验试剂。方法:将破伤风梭菌经疱肉培养基培养后,培养液经离心、滤菌器过滤制备成未脱毒的破伤风梭菌外毒素。再将外毒素进行脱毒(化学法)和动物毒力试验,以获得无毒力的破伤风梭菌外毒素(粗制类毒素)。最后,以脱毒的破伤风梭菌外毒素作为抗原与TAT(抗体)进行对流免疫电泳实验。结果:改良后的试剂,其实验结果优于其它三种试剂。结论:改良后的试剂具有容易制备、低费用和安全性好的特点。

水貂阿留申病毒VP2蛋白主要抗原表位基因原核表达及其检测应用

将构建好的重组质粒pMD-VP2a、pMD-VP2b分别经双酶切获得基因片段VP2a、VP2b,分别将其定向插入到原核表达载体pMAL-c2中,构建原核表达载体pMAL-VPa和pMAL-VPb。阳性重组质粒转化宿主菌TB1,经IPTG诱导,两段基因均获得表达;Westernblot分析表明表达蛋白具有良好的抗原性。用KCI染色后,切胶回收的方法对表达蛋白进行纯化,以纯化的目的蛋白作为诊断抗原初步建立了水貂阿留申的VP2-CIEP诊断方法。结果表明该方法具有较高的灵敏性和特异性,与传统的CIEP方法的检出符合率达94.3%。

对流免疫电泳法诊断水貂病毒性肠炎

水貂病毒性肠炎是由水貂细小病毒引起的,以剧烈下痢为特征的急性传染病,常呈暴发性地方流行,死亡率高达90%,给养貂业造成重大损失。

斑点免疫结合试验与间接血凝试验和对流免疫电泳试验在包虫病诊断中的比较

目的：为了进一步了解斑点免疫结合试验（ＤＩＢＡ）诊断包虫病的敏感性和特异性，进行血清特异抗体的检测，并与间接血凝试验（ＩＨＡ）和对流免疫电泳试验（ＣＩＥＰ）作比较。方法：用羊肝细粒棘球蚴液抗原对９４例包虫病患者、２２例非包虫病患者和４５例健康人血清进行了ＤＩＢＡ、ＩＨＡ和ＣＩＥＰ。结果：ＤＩＢＡ、ＩＨＡ、ＣＩＥＰ的阳性率分别为９２．６％、８６．２％和６３．８％，ＤＩＢＡ的阳性率明显高于ＣＩＥＰ（Ｐ＜０．０１），而与ＩＨＡ无统计学差别；假阳性率分别为５．８％、９．０％和０。结论：ＤＩＢＡ的敏感性高于ＩＨＡ和ＣＩＥＰ，且与ＣＩＥＰ有显著差异；ＤＩＢＡ的特异性高于ＩＨＡ，但低于ＣＩＥＰ。在诊断包虫病时，应同时使用两种以上免疫试验。

应用对流免疫电泳诊断狐和貉细小病毒性肠炎的研究

建立的诊断狐和貉细小病毒性肠炎的对流免疫电泳（ Ｃ Ｉ Ｅ Ｐ） ，抗原最佳稀释度为１∶１６ ，血清最佳稀释度为１∶８ ，最佳电泳时间为６０ ｍｉｎ 。用该方法检测发病早期的病料，阳性检出率达９８ ％ ，对发病１０ ｄ 以上的病料阳性检出率为３０ ％ 。

应用对流免疫电泳试验诊断水貂病毒性肠炎

水貂病毒性肠炎(MVE)的快速诊断有着重要意义。已建立的诸多诊断方法中,以AGPT,HA—HI试验较为常用。我国1984年由韩慧民等始建HA-HI试验,对MVE的防制起了很大作用。但近年来,人们陆续发现HA-HI试验的特异性、重复性存在一些缺陷。本试验表明,CIEP用于MVE的诊断较HA-HI更为优越。

两种检测水貂阿留申病毒抗体方法敏感性的比较研究

本研究对胶体金试纸条检测法与对流免疫电泳检测法检测水貂阿留申病毒抗体的敏感性进行对比研究。试验采用实验室制备的检验合格的试纸条,分别对20份不同效价的水貂阿留申病毒阳性质控血清和100份自然感染的田间血清进行检测,分析不同稀释度的阳性血清检出数量和阳性检出率,从而对两种检测方法的敏感性进行评估。结果显示,阳性质控血清在1:64倍以下稀释时,试纸条对阳性血清和弱阳性血清的检出率均为100%,对100份自然感染阳性血清检出率为96%,表明该试纸条的检测具有较高的敏感性。

脑包虫病的免疫诊断

作者报道了16例经手术证实的脑包虫病,手术前用皮内试验(ID)、间接血凝试验(IHA)和对流免疫电泳试验(CIEP)三项试验方法检查结果,三项试验的阳性率分别为56.2％、46.1％和15.4％,其阳性率远远低于人体其它各部位包虫病。其主要原因与中枢神经系统的解剖学和免疫学特性有关,可能是血脑屏障阻止了脑组织中棘球蚴的代谢产物进入全身免疫系统。但在临床应用上,免疫学试验检查还是有助于流行区内脑囊性病灶的鉴别诊断。

水貂阿留申病诊断抗原研究概述

近年来,随着水貂养殖行业的不断发展,一些疫病也成为了制约水貂养殖业发展的重要因素。水貂阿留申病作为毛皮动物的三大疫病之一(阿留申病、犬瘟热、病毒性肠炎),是导致母貂产仔率下降、公貂配种能力降低和毛皮质量下降的一种高度接触性传染病。至今为止,还没有商品化的疫苗来控制该病的传播及蔓延。控制水貂阿留申病最好的方法是通过检测淘汰所有抗体为阳性的水貂,进而达到净化貂群的目的。而在抗体检测过程中,诊断抗原的制备和纯化决定着检测方法的敏感性、特异性和准确性。论文对目前阿留申病毒细胞抗原及基因工程抗原研究进展做一综述,为今后该病病原检测工作提供参考。

水貂血液阿留申病病毒及其抗体的检测与分析

为了确定鉴定阿留申病的适宜方法,尤其在阿留申病毒高感染貂场,本试验联合应用对流免疫电泳(CIEP)和PCR方法,对1个貂场连续2年于11~12月间检测1次貂血液的阿留申病毒及其抗体。用CIEP检测产仔(断乳成活数≥5只/窝)母貂及其仔貂。通过比较貂群的检测结果来分析2种检测方法鉴别阿留申病貂的适用性。2次检测结果显示各貂群CIEP阳性率为60%~97%,PCR阳性率为20%~63%,水貂的CIEP与PCR检测阳性结果不完全匹配。根据CIEP和PCR联合检测结果,貂群被分为4个群体CIEP+PCR+、CIEP-PCR-、CIEP-PCR+和CIEP+PCR-。2次检测的CIEP+PCR-貂在当年母貂中分别占48%、39%,在老母貂中分别占43%、77%,在公貂中分别占21%、51%。2次检测的CIEP+PCR-貂在貂群所占比例大,而CIEP-PCR-和CIEP-PCR+貂在貂群中所占比例小。公貂、老母貂经PCR阳性淘汰间隔1年再次检测,CIEP+PCR-貂在群体中比例明显提高。产仔2~4年龄母貂有72%~80%CIEP+貂,而其60日龄仔貂仅有11%~16%CIEP+貂。结果分析指出,中国阿留申病病毒高感染率养殖貂群不适宜单纯采用CIEP检测淘汰阳性貂净化阿留申病。发现每年11至12月用CIEP和PCR联合检测貂血样,易检出CIEP+PCR-的潜在阿留申病毒感染康复貂。

水貂阿留申病毒串联表位重组抗原的表达及血清学初步评价

为探究水貂阿留申病毒(ADV)VP2主要抗原表位在水貂阿留申病血清学诊断中的作用,本试验将VP2蛋白主要抗原区的表位基因用柔性肽串联连接,将其克隆到表达载体pET-30a(+)中进行原核表达,并对诱导条件进行优化。利用Ni-NTA His-Bind纯化系统对融合蛋白进行纯化,经SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物,并将融合蛋白作为检测抗原进行CIEP试验。结果显示,融合蛋白在IPTG终浓度为1mmol/L、37℃诱导表达4h,蛋白表达量最高,其大小约为30000,以可溶性表达形式为主;融合蛋白能与6×His单克隆抗体及ADV多克隆抗体发生特异性反应,说明该蛋白具有较好的反应原性;且该蛋白作为对流免疫电泳技术(CIEP)检测抗原与ADV阳性血清之间产生了明显的沉淀线,证实了该蛋白作为CIEP检测抗原的可能性。以纯化后的重组蛋白为抗原初步建立的间接ELISA方法具有较高的准确性。结果表明该蛋白具有良好的血清学检测价值,为水貂阿留申病血清学诊断方法的建立奠定了基础。

复方中草药添加剂抗水貂阿留申病的研究

为了探讨复方中草药添加剂对水貂阿留申病毒检出率的影响,试验于配种前1个月应用对流免疫电泳法（CIEP）对黑色和咖啡色母水貂进行阿留申病毒抗体检测,根据检测结果,选取240只水貂,均分为4组,每组60只（包括20月龄和8月龄黑色水貂及咖啡色水貂各15只）,A、B组为阿留申病毒抗体检测阳性水貂,C、D组为阿留申病毒抗体检测阴性水貂; A、C组在基础日粮中添加复方中草药添加剂,连续饲喂5 d,每天5 g/只,B、D组只饲喂基础日粮; 1个月后采集4组水貂血清,应用CIEP法进行阿留申病毒抗体水平检测,并对水貂阿留申病毒检出率进行统计分析。结果表明：4组水貂不论毛色和月龄,强阳性检出率方面差异均不显著（P〉0. 05）;弱阳性检出率方面,A组水貂显著低于B组（P〈0. 05）,C、D两组水貂差异均不显著（P〉0. 05）;阴性率方面,A组水貂显著高于B组（P〈0. 05）,C、D两组水貂差异不显著（P〉0. 05）。说明复方中草药添加剂对阿留申病毒抗体水平为强阳性水貂的检出率,不论毛色和年龄,均没有影响;可降低阿留申病毒抗体水平为弱阳性水貂的检出率,尤其是对幼龄水貂和黑色水貂效果显著（P〈0. 05）;可降低阿留申病毒抗体水平为阴性的水貂对阿留申病毒的自然感染率,特别是对幼龄水貂效果最为显著（P〈0. 05）,同时该复方中草药添加剂可以促进阿留申病毒抗体水平为弱阳性的幼龄及黑色水貂的抗体转为阴性,效果显著（P〈0. 05）。表明该中草药制剂能降低阿留申病毒对幼龄水貂的感染率,降低幼龄水貂和黑色水貂阿留申病毒抗体水平为弱阳性的检出率。