子宫内膜癌患者外周血细胞CK20 mRNA的表达及其临床意义

目的:检测子宫内膜癌患者外周血细胞中细胞角蛋白20(CK20)基因mRNA表达,探讨其表达对子宫内膜癌微转移的诊断价值。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测44例子宫内膜癌患者、34例子宫良性病变患者和32名健康志愿者外周血细胞中CK20mRNA表达水平,分析其表达与子宫内膜癌患者病理学参数之间的关系。结果:44例子宫内膜癌患者外周血细胞CK20mRNA检测出阳性12例,阳性率为27.3%;子宫良性病变患者及健康女性外周血中均未见其表达,子宫内膜癌患者CK20mRNA阳性表达率高于子宫良性病变患者及健康女性(χ2=20.204,P<0.05);子宫内膜癌患者外周血细胞CK20mRNA表达水平与临床分期(χ2=16.712,P<0.05)、淋巴结转移(χ2=6.381,P<0.05)和浸润深度(χ2=6.381,P<0.05)存在关联性,而与病理分级(χ2=0.229,P>0.05)及是否绝经(χ2=0.004,P>0.05)无关联。结论:相对于子宫良性病变患者及健康女性,CK20mRNA在子宫内膜癌患者中阳性表达率明显升高,且表达水平与临床分期、是否有淋巴结转移及浸润深度有关;CK20的特异性强,可作为判断子宫内膜癌血源性微转移的参考指标。

应用多重RT-PCR技术检测食管癌患者外周血多种肿瘤基因标志物的研究

目的:建立多重RT-PCR同步检测技术,联合检测黑色素瘤抗原MAGEA3基因、人类斯钙素hsTC1基因、上皮细胞角质蛋白CK20、CK19基因及癌胚抗原CEA基因mRNA在食管癌患者外周血中的表达。方法:在分析MAGEA3、hSTC1、CK20、CK19、CEA和β-actin六种基因mRNA全长序列资料的基础上,自行设计并筛选出6对引物及6条寡核苷酸探针,利用多重RT-PCR技术并结合基因芯片对样本进行检测。结果:全部样品均可检出β-actin,55例食管癌患者外周静脉血中MAGEA3、hSTC1、CK20、CK19和CEA的阳性表达率分别为25.45%、47.27%、49.09%、34.55%和52.73%;多重RT-PCR技术同时检测MAGEA3、hSTC1、CK20、CK19和CEA基因,如果至少表达其中一种即可作为阳性表达者,其阳性表达率可达72.73%。而10例食管癌组织中均为阳性,28例正常健康捐献者的外周血中有2例CEA表达阳性,27例非肿瘤病人的外周血中有3例CK20阳性,3例CK19阳性,3例CEA阳性。测序结果证实RT-PCR产物确为MAGEA3、hSTC1、CK20、CK19和CEA基因。结论:联合检测MAGEA3、hSTC1、CK20、CK19和CEA可以增加外周血循环癌细胞检测的敏感性,本研究建立的多重RT-PCR技术可以做为一种快速、灵敏的检测手段。

染色质解旋酶DNA结合蛋白5、细胞角蛋白20在胃癌中表达及临床意义

目的探讨染色质解旋酶DNA结合蛋白5(CHD5)和细胞角蛋白20(CK20)在胃癌组织中的表达情况以及其临床意义。方法选取解放军202医院自2013年6月至2016年6月经临床确诊为胃癌并经手术治疗的56例患者病理蜡块标本为研究对象。采用免疫组化方法(IHC-P)检测胃癌及其对应的癌旁组织标本中CHD5和CK20的表达情况。结果 CHD5基因在胃癌及其相应的癌旁组织中的阳性表达率分别为12.5%(7/56)和87.0%(49/56),差异有统计学意义(P<0.05);CK20基因在胃癌及其相应的癌旁组织中的阳性表达率分别为71.4%(40/56)和0,差异有统计学意义(P<0.05)。CHD5与CK20基因在胃癌组织中的表达呈负相关。CHD5和CK20基因的表达与胃癌组织标本的浸润深度、分化程度、淋巴结受累情况、远处转移以及TNM分期有关(P<0.05),而与患者的年龄、性别以及肿瘤的大小无关(P>0.05)。结论 CHD5基因在胃癌组织的的阳性表达明显低于其在相应的癌旁正常组织;CK20基因在胃癌癌旁正常组织中无表达,在胃癌组织中高表达,两种肿瘤标志物同时检测可能为胃癌的治疗提供新的基因靶点。