前列腺癌CK5^+CK8^+细胞的分选及其分子生物学特性

目的在人前列腺癌细胞系中分选CK5^+CK8^+细胞,了解其分子生物学特性。方法流式细胞术在人前列腺癌细胞系PC3和LNCaP中分选CK5^+CK8^+细胞,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法方法检测LNCaP细胞分选的CK5^+CK8^+细胞CK5、CK8、雄激素受体(AR)和前列腺特异抗原(PSA)的表达,细胞迁移实验检测CK5^+CK8^+细胞迁移能力,琼脂糖凝胶克隆形成实验检测CK5^+CK8^+细胞成瘤能力。采用t检验进行统计学分析。结果采用流式细胞术可以在PC3中分选出(21.3±4.6)%的CK5^+CK8^+细胞,在LNCaP中分选出(1.2±0.4)%的CK5^+CK8^+细胞。与非CK5^+CK8^+细胞相比,LNCaP中分选的CK5^+CK8^+细胞CK5 mRNA表达差异有统计学意义(t=10.435,P<0.001),CK8 mRNA表达差异无统计学意义(t=1.974,P=0.121),AR和PSA mRNA表达差异有统计学意义(t=4.317,3.232;P=0.016,0.037)。蛋白质印迹法检测得到类似结果。细胞培养7 d后,CK5^+CK8^+细胞和非CK5^+CK8^+细胞均可以在Transwell小室迁移生长,迁移细胞数分别为(60±7)个和(32±5)个,2者比较差异有统计学意义(t=6.031,P=0.004)。细胞培养14 d后,CK5^+CK8^+细胞和非CK5^+CK8^+细胞均可以在软琼脂糖凝胶中克隆性生长,阳性克隆数分别为(71±5)个和(27±3)个,差异有统计学意义(t=13.009,P<0.001)。结论人前列腺癌细胞系LNCaP和PC3都可以分选出CK5^+CK8^+细胞,LNCaP中CK5^+CK8^+细胞AR和PSA均有一定程度表达,迁移和成瘤能力增强。

非小细胞肺癌组织中CK5/6的表达及与临床病理特征和预后的关系

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中细胞角蛋白5/6(CK5/6)的表达及与临床病理特征和预后的相关性。方法 收集52例NSCLC患者的临床资料,检测其CK5/6表达情况,并比较不同临床病理特征者癌组织CK5/6表达差异。以1年为观察终点,比较不同癌组织CK5/6表达者总生存及无瘤生存情况。结果52例中22例癌组织CK5/6表达阳性,阳性率为42.31%。年龄≥65岁、有吸烟史、组织类型为鳞癌、低分化、淋巴结转移及TNM分期Ⅲ~Ⅳ期者癌组织CK5/6表达阳性率更高(均P <0.05)。肺鳞癌CK5/6表达阳性与表达阴性者1年总生存率、1年无瘤生存率及无瘤生存时间差异均无统计学意义(均P> 0.05)。肺腺癌CK5/6表达阳性者1年无瘤生存率、无瘤生存时间均低于表达阴性者(均P <0.05)。结论 CK5/6的表达不仅与NSCLC组织类型、恶性程度有关,还能辅助预测肺腺癌不良预后,指导临床诊疗。

CK5、CK8和Oct-4在乳腺上皮干细胞分化及演变中的表达

为探讨CK5、CK8和Oct-4在乳腺上皮良、恶性增生病变中的表达及其作为标记物分析乳腺导管上皮干细胞分化及演变规律,对41例人乳腺导管上皮良、恶性增生病和10例正常人乳腺组织标本,采用免疫组化S-P法分别检测Oct-4、CK5和CK8的表达,应用SPSS10.0软件进行统计分析。结果表明,CK5在正常乳腺组织、乳腺增生病及乳腺癌中的阳性率呈下降趋势,且存在明显差异(P<0.05),在部分乳腺侵袭性导管癌中,CK5阳性染色主要集中在外层尚未侵袭的基底层细胞中,在肿瘤细胞中没有表达或很少表达;CK8主要在肿瘤细胞中表达,在基底层细胞中完全不表达;Oct-4在正常乳腺组织、乳腺增生病及乳腺侵袭性导管癌中均有表达,无显著性差异(P=0.381)。结论:成人乳腺上皮细胞谱系分化进程中,CK5表达下调,最终缺失,被CK8取代,表明乳腺上皮恶性转化时趋向腺系分化的方向发展;表达Oct-4基因的成人乳腺上皮细胞可能具有定向干细胞的分化特征,是癌变起源的靶细胞。

非小细胞肺癌活检标本中CK7、TTF-1、NapsinA、CK5/6及p63的表达及其意义

目的检测CK7、TTF-1、Napsin A、CK5/6及p63在非小细胞肺癌(NSCLC)活检标本中的表达及其意义。方法采用免疫组化SP法检测100例NSCLC活检标本中CK7、TTF-1、Napsin A、CK5/6及p63的表达,并结合NSCLC的临床病理特征进行分析。结果 CK7、TTF-1和Napsin A在68例肺腺癌中的阳性率分别为98.5%(67/68)、92.6%(63/68)和97.1%(66/68),表达水平明显高于CK5/6(7.3%,5/68)和p63(8.8%,6/68)(P<0.05);而CK5/6和p63在32例肺鳞状细胞癌中的阳性率分别为96.9%(31/32)和93.8%(30/32),表达水平明显高于CK7、TTF-1和Napsin A的阳性率28.1%(9/32)、9.4%(3/32)和3.1%(1/32)(P<0.05),两者差异均具有统计学意义。结论 CK7、TTF-1、Napsin A、CK5/6及p63在对肺活检标本腺癌和鳞状细胞癌的鉴别中具有重要意义,可作为非小细胞肺癌鉴别诊断的特异性免疫组化套餐。

CK5/6、P63、TTF-1和CK8/18在NSCLC组织中的表达及意义

目的检测细胞角蛋白5/6(cytokeratin5/6,CK5/6)、P63蛋白、甲状腺转录因子-1(thyroid transcription factor-1,TTF-1)和细胞角蛋白8/18(cytokeratin8/18,CK8/18)在人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达情况,研究其表达对于肺鳞癌和肺腺癌的诊断和鉴别诊断价值,探讨其临床意义。方法采用免疫组化(EnVision法)检测CK5/6、P63、TTF-1和CK8/18在1 067例病理确诊的NSCLC中的表达情况,分析其表达与NSCLC临床及病理资料的相关性。结果 CK5/6、P63、TTF-1和CK8/18在NSCLC中的阳性表达率分别为50.2%(227/452)、59.6%(164/275)、61.6%(257/417)和94.3%(116/123)。CK5/6诊断肺鳞癌的灵敏度和特异度分别为96.1%和89.8%,准确度为92.9%。P63诊断肺鳞癌的灵敏度和特异度分别为97.0%和73.9%,准确度为86.1%。TTF-1诊断肺腺癌的灵敏度和特异度分别为88.1%和91.7%,准确度为89.2%。CK8/18诊断肺腺癌的灵敏度和特异度分别为100.0%和13.5%,准确度为70.9%。CK5/6和P63共同表达阳性诊断肺鳞癌的灵敏度和特异度为84.1%和94.5%,准确度为89.0%。TTF-1和CK8/18共同表达阳性诊断肺腺癌的灵敏度和特异度为86.5%和100.0%,准确度为90.7%。CK5/6、P63主要表达在肺鳞癌,在男性、吸烟患者中升高明显(P<0.05);TTF-1、CK8/18主要表达在肺腺癌,TTF-1在女性、不吸烟患者中升高明显(P<0.01)。NCSLC患者T分期越晚,其CK5/6、P63、TTF-1的阳性表达率越高(P<0.01)。NSCLC患者淋巴结转移N分期越早,其CK5/6、P63的阳性表达率越高(P<0.01)。P63的表达与肿瘤TNM分期呈负相关(P<0.05)。结论单个指标中CK5/6、TTF-1的阳性表达对于肺鳞癌、肺腺癌的鉴别诊断具有较高价值。CK5/6和P63,TTF-1和CK8/18联合诊断有利于提高诊断的特异性。NSCLC中CK5/6、P63和TTF-1的表达与肿瘤生长浸润程度呈正相关,CK5/6、P63的阳性表达程度与淋巴结转移分期呈负相关,P63的表达与肿瘤TNM分期呈负相关。

CK8寡糖链结构及翻译水平改变与人肝癌细胞转移相关性研究

糖组学方法筛查人肝癌细胞转移过程中发挥重要作用的核心岩藻糖基化蛋白质分子,解析比较筛出的差异蛋白——细胞角蛋白8(CK8)翻译及糖基化修饰改变与人肝癌细胞转移潜能的关系.应用双向电泳(2-DE)、凝集素亲和印迹、凝集素亲和沉淀联合质谱分析技术,筛查并验证与肝癌转移相关的核心岩藻糖基化蛋白;应用细胞免疫荧光和蛋白质免疫印迹检测CK8的蛋白质表达情况;应用免疫沉淀结合多种凝集素亲和印迹,推测其与肝癌转移相关的寡糖链结构改变.研究发现,3种不同转移潜能人肝癌细胞Hep3B、MHCC97-L和MHCC97-H的扁豆凝集素(LCA)亲和印迹表达谱中,分子质量55～60ku、等电点4～6区域处有核心岩藻糖基化蛋白呈差异表达,质谱鉴定为CK8.LCA亲和沉淀及蛋白质印迹进一步验证CK8异常核心岩藻糖基化与肝癌转移相关;研究发现,CK8分布于细胞浆内,在MHCC97-L和MHCC97-H细胞中蛋白质表达水平较Hep3B高,在MHCC97-H中与LCA和蓖麻凝集素(RCA-1)的亲和力较Hep3B强.以上结果提示,2-DE和凝集素印迹技术联合MALDI-TOF-MS/MS分析可用于筛查疾病过程相关的异常糖基化蛋白质分子,CK8蛋白水平、核心岩藻糖基化及β-1,4末端半乳糖基化的增加均与肝癌细胞转移潜能相关.

慢性紫外线损伤小鼠模型皮肤角质形成细胞中CK5和CK14表达研究

目的:观察慢性紫外线(utraviolet,UV)损伤对小鼠角质形成细胞CK5和CK14表达的调控效应。方法:采用模拟日光UV(UVA+UVB)光源对实验小鼠进行照射,照射从最小红斑量(MED,UVB0.07.J/cm^2,UVA0.7 J/cm^2),每周增加0.5个MED,每日1次,每周照射5 d,共9周,UVB总剂量达9.45 J/cm^2,UVA总剂量达94.5.J/cm^2,通过组织学观察、特殊化学染色和表皮厚度测量确定皮肤损伤,应用免疫组化法分别对照射前后(W0和W9)CK5和CK14的表达进行检测。应用Wilcoxon符号秩和检验和Spear-man秩相关系数进行统计分析。结果:对照组小鼠实验前、后CK5和CK14表达差异均无统计学意义(P>0.05)。损伤组小鼠实验前CK5和CK14的表达差异均有统计学意义(P<0.05),并且损伤组小鼠的CK5和CK14表达呈现明显的定位改变,在增厚的表皮中呈现弥漫的表达,失去在正常表皮中表达于基底细胞层的定位特点。损伤组小鼠表皮角质形成细胞内的CK5和CK14表达均显著上调,且二者的表达呈现正相关性(r=0.840,P<0.05)。结论:重复UV暴露导致小鼠角质形成细胞中CK5和CK14表达上调和定位异常。以上述两种角蛋白为标志物的基底层细胞过度增殖可能参与了慢性UV皮肤损伤出现表皮增厚的发生。

人细胞角蛋白8(CK8)基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的:克隆人细胞角蛋白8(CK8)基因cDNA并在大肠杆菌中表达CK8蛋白产物。方法:运用DNA重组技术,设计CK8基因特异引物,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术从人肝细胞癌7721细胞中扩增CK8编码区cDNA,将其插入克隆载体pMD18-T simple vector中,获得重组质粒pMD18-CK8,转化感受态大肠杆菌DH5α。继而采用PCR技术从重组质粒pMD18-CK8中扩增出约1500bp目的片段,再次级克隆到原核表达质粒pET-28a(+)载体中,获得pET-28a-CK8重组原核表达质粒;经酶切、PCR及测序鉴定后转化入BL21(DE3)菌株,在IPTG诱导下进行融合蛋白的表达。采用SDS-PAGE电泳及Western blot检测CK8蛋白表达水平。结果:成功建立了人CK8基因cDNA重组体的无性繁殖系。②在原核细胞中成功地表达出人CK8蛋白,该蛋白具有很好的免疫原性。结论:运用原核细胞基因工程技术成功构建和表达了人细胞角蛋白8(CK8)基因,为进一步研究CK8的基因型及探讨该基因编码的CK8蛋白的性质和生物学活性创造条件。

TTF-1、CK7、p63、CK5/6免疫组化检测在低分化非小细胞肺癌分类中的应用

目的探讨TTF-1、CK7、P63、CK5/6免疫组化检测在低分化非小细胞肺癌的表达情况及亚分类中的应用。方法选取安徽医科大学第一附属医院、安徽医科大学第二附属医院、安徽省立医院共104例经病理组织学确诊的低分化非小细胞肺癌,其中低分化腺癌62例、低分化鳞癌42例,采用免疫组织SP法检测,镜下观察TTF-1、CK7、P63、CK5/6在不同细胞中的表达情况,比较不同临床病理特征非小细胞肺癌TTF-1、CK7、P63、CK5/6的表达差异及影响其阳性表达的因素。结果TTF-1、CK7阳性诊断低分化腺癌的灵敏度分别为87.88%、78.94%特异度分别为93.10%、95.83%;两者联合诊断低分化腺癌的灵敏度、特异度分别为90.91%、96.55%。CK5/6、P63阳性诊断低分化鳞癌的灵敏度分别为93.55%、83.33%,特异度分别为93.55%、96.15%;两者联合诊断低分化鳞癌的灵敏度、特异度分别为96.66%、90.91%。肿瘤的分期、大小、及有无淋巴结转移等特征对TTF-1、CK7、CK5/6、P63的阳性表达无明显影响。结论免疫组化分子标记物单独或联合检测在低分化非小细胞肺癌鉴别诊断中具有重要意义。

宫颈上皮内瘤变和浸润性鳞状细胞癌中CK8、CK17的表达

目的检测宫颈上皮内瘤变(CIN)及浸润性鳞状细胞癌中CK8、CK17的表达,并探讨其病理意义。方法应用免疫组化MaxVision法检测宫颈上皮内瘤变(CIN)44例(Ⅰ级20例,Ⅱ、Ⅲ级24例)、浸润性鳞状细胞癌25例和正常宫颈组织20例中的CK8、CK17的表达情况。结果正常对照组鳞状上皮CK8、CK17均为(-);浸润性鳞状细胞癌的阳性率分别为88%和92%,其表达均以中等强度及强阳性为主;CIN高级别组的阳性率分别为58.3%和58.3%,以中等强度为主;CIN低级别组的阳性率分别为10%和30%,其均以弱及中等强度为主。结论 CK8、CK17的阳性表达率及程度与宫颈鳞状细胞病变的严重程度密切相关。CK8、CK17在宫颈癌变过程中起到重要作用。

乳腺导管增生性病变中CK5/6、P63、CK8/18、SMA、ER的表达意义

目的探讨乳腺导管增生性病变中CK5/6、P63、CK8/18、SMA、ER的表达水平变化,并分析其意义。方法回顾性分析2018年3月至2019年3月于本院就诊的128例乳腺导管增生性病变患者的临床资料,均为女性,其中24例普通型导管增生、32例平坦型上皮不典型增生、44例非典型性导管增生、28例导管原位癌,均先后对4组标本的CK5/6、P63、CK8/18、SMA、ER表达水平进行检测,观察分析4组患者的CK5/6、P63、CK8/18、SMA、ER的表达水平状况及意义。结果普通型导管增生组CK5/6阳性率高于平坦型上皮不典型增生组、导管上皮不典型增生组、导管原位癌组高,差异有统计学意义(P<0.05);4组CK8/18、SMA、P63阳性率比较差异无统计学意义;普通型导管增生组ER阳性率低于平坦型上皮不典型增生组、导管上皮不典型增生组、导管原位癌组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乳腺导管增生性病变中CK5/6、P63、CK8/18、SMA、ER的表达状况检测评估能够准确反馈乳腺导管增生性病变情况,为临床下一步治疗方案的制定提供可靠的科学依据。

宫颈癌HeLa细胞中Bcrp1^+、CK17^+及CD44v5^+表型细胞的检测与分离

目的:检测Bcrp1、CK17及CD44v5在宫颈癌HeLa细胞中的表达情况及相互关系,推测该3种抗体成为宫颈癌干细胞标记物的可能。方法:采用免疫荧光标记物流式细胞仪分选并检测HeLa细胞中的CK17+、CD44v5+、Bcrp1+表型细胞;利用免疫细胞化学染色法,检测Bcrp1+及Bcrp1-1两组HeLa细胞中CK17及CD44v5的表达情况。结果:HeLa细胞中存在CD44v5+细胞,所占比例为0.1%,CK17+细胞为0.7%,Bcrp1+细胞为11%;Bcrp1+组HeLa细胞中存在CK17+及CD44v5+细胞,而Bcrp1-组中则无,组间比较差异有显著性(P<0.05)。结论:表达CK17及CD44v5的HeLa细胞同时表达Bcrp1转运蛋白,CK17及CD44v5均有可能成为宫颈癌干细胞的标记物。

CK5、CK8及EZRIN在乳腺良恶性病变中的表达及意义

乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一.近年来我院女性乳腺癌发病率明显上升,并且发病年龄也有年轻化趋势.现代医学虽然已经取得较大的成就,针对乳腺病变的检测方法也很多,但对于乳腺良恶性病变的鉴别仍是临床及病理医生常遇到的难题,在临床病理工作中乳腺良、恶性病变有时仅凭HE染色片诊断有较大的困难.

缺乏形态学分化的非小细胞肺癌活检标本的进一步分类:一组实用的免疫组化试剂TTF-1,Napsin A,p63和CK5/6

靶向治疗的应用越来越需要非小细胞肺癌（NSCLCs）的精确分型。该研究的目的评价一组免疫组化试剂在低分化非小细胞肺癌分型中的实用价值,并将活检组织的免疫组化结果与相应的术后标本进行对照分析。39例经切除后证实的NSCLC标本,活检组织中均不能进一步分型。依据WHO分类标准对肿瘤切除标本进行分类。

肺鳞状细胞癌组织中p63、CK5/6和p40的表达及其病理诊断价值

目的:探讨p63蛋白、细胞角蛋白5/6(cytokeratin5/6,CK5/6)和p40(ΔNp63)蛋白在人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其表达对于肺鳞状细胞癌和肺腺癌的诊断和鉴别诊断价值。方法:采用免疫组化(SP法)检测p63、CK5/6和p40在100例病理确诊的NSCLC组织中的表达情况,并结合NSCLC的临床病理特征进行分析。结果:p63、CK5/6和p40在肺鳞状细胞癌组织中的阳性表达率分别为98.28%、100.00%和98.28%。p63、CK5/6和p40在肺腺癌组织中的阳性表达率分别为45.24%、30.95%和21.43%。肺鳞状细胞癌组织中p63、CK5/6和p40的阳性表达率明显高于肺腺癌组织(P<0.01)。p63、CK5/6和p40诊断肺鳞癌的灵敏度分别为98.28%、100.00%和98.28%,特异度分别为54.76%、69.05%和78.57%。p63、CK5/6和p40在肺鳞状细胞癌中的诊断准确率分别为80%、87%和90%。三者联合检测时三项均阳性诊断肺鳞癌的特异度达90.48%,诊断准确率为95%;三项中至少一项阳性诊断肺鳞癌的灵敏度达100.00%,诊断准确率为75%。结论:p63、CK5/6和p40主要表达在肺鳞状细胞癌组织中。单个指标中p40对诊断肺鳞状细胞癌具有较高的灵敏度和特异度。p63、CK5/6和p40联合检测对肺鳞状细胞癌与肺腺癌的鉴别诊断有重要价值。

细胞角蛋白CK5/6和EGFR在乳腺癌组织中的表达

目的观察检测表皮生长因子受体(EGFR)和细胞角蛋白CK5/6在乳腺癌组织中的表达。方法回顾性分析医院经病理确诊的乳腺癌患者60例临床及病理资料。免疫组化检测EGFR和CK5/6在乳腺癌组织中的表达。结果 EGFR和CK5/6在乳腺癌组织中阳性表达率分别为16.7%(10/60)和25.0%(15/60);EGFR和CK5/6在三阴乳腺癌组织中的表达比非三阴乳腺癌组织中的表达更高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论EGFR和CK5/6在乳腺癌组织中的高表达提示CK5/6和EGFR可作为乳腺癌预后不良因素。

CK2介导幽门螺杆菌CagA蛋白诱导人胃腺癌上皮细胞内IL-8表达的机制研究

目的探讨蛋白激酶CK2在幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A(CagA)蛋白诱导人胃腺癌上皮细胞(AGS)中白细胞介素-8(IL-8)表达中的作用。方法培养人AGS细胞,依据CagA蛋白加入与否分为S1组(加入CagA蛋白)、S2组(未加入CagA蛋白);依据是否转染或加入p65 siRNA、CagA分为A1组(未转染p65 siRNA且未加入CagA)、A2组(转染p65 siRNA但未加入CagA)、A3组(未转染p65 siRNA但加入CagA)、A4组(转染p65siRNA且加入CagA);依据芹菜素(apigenin)、CagA加入与否分为B1组(未加入apigenin和CagA)、B2组(加入apigenin但未加入CagA)、B3组(未加入apigenin但加入CagA)、B4组(加入apigenin和CagA)。根据p65 siRNA转染情况分为A组(转染ConsiRAN但未转染p65 siRNA)、B组(转染p65 siRNA但未转染ConsiRAN);将加入CagA蛋白0、20 min时的细胞分为C组、D组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测IL-8蛋白表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测β-actin、p65和p65-p的表达,采用双荧光素酶报告系统检测相对荧光强度。结果 S1组AGS细胞中IL-8蛋白的表达水平为(871.25±12.89)pg/ml,高于S2组的(119.00±12.70)pg/ml,差异有统计学意义(P﹤0.05)。A1组和A2组细胞的IL-8蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);A4组细胞的IL-8蛋白表达水平明显低于A3组(P﹤0.01)。B组细胞的p65蛋白表达水平低于A组。B1组和B2组细胞的IL-8蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);B4组细胞的IL-8蛋白表达水平明显低于B3组,差异有统计学意义(P﹤0.01)。D组细胞的p65-p蛋白表达水平高于C组,B4组细胞的p65-p蛋白表达水平低于B3组。B1组和B2组细胞的相对荧光强度比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);B4组细胞的相对荧光强度水平明显低于B3组,差异有统计学意义(P﹤0.01)。结论 CK2可能参与了CagA诱导AGS细胞中核因子κB(NF-κB)激活及IL-8表达的过程。

人参皂苷CK联合5-氟尿嘧啶对人胰腺癌PANC-1细胞的增殖、凋亡及上皮间质转化的影响

目的:研究人参皂苷CK联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对人胰腺癌PANC-1细胞的增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的影响。方法:将对数生长期的PANC-1细胞分为空白对照组、人参皂苷CK组(30 mg/L)、5-FU组(25 mg/L)和联用组(人参皂苷CK 30 mg/L+5-FU 25 mg/L)。采用MTT法检测各组细胞作用24、48、72 h后的细胞增殖抑制率,流式细胞术检测作用48 h后的细胞凋亡率,酶联免疫吸附法检测作用24、48、72、96 h后细胞中纤连蛋白表达,Western blot法检测作用48 h后细胞中波形蛋白、N-钙黏蛋白、E-钙黏蛋白、蛋白激酶(Akt)及磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达。结果:人参皂苷CK、5-FU及其二者联用对细胞的增殖均有抑制作用;与空白对照组比较,人参皂苷CK组、5-FU组和联用组各作用时间点的早期和晚期凋亡率、E-钙黏蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),纤连蛋白、波形蛋白、N-钙黏蛋白表达水平和p-Akt/Akt水平均明显降低(P<0.05),其中联用组上述指标效果均优于人参皂苷CK组和5-FU组(P<0.05)。结论:人参皂苷CK和5-FU均可抑制PANC-1细胞增殖、诱导细胞凋亡、抑制EMT,该作用可能与抑制磷脂酰肌醇3-激酶/Akt通路有关;且二者联用效果更好。

p40、CK5/6、NapsinA联合CT对晚期非小细胞肺癌的分型诊断效能

目的:本研究旨在探讨p40、细胞角蛋白5/6(cytokeratin 5/6,CK5/6)、天冬氨酸蛋白酶A(aspartic acid protease A,NapsinA)在非小细胞肺癌组织中的表达情况,及其联合肺部电子计算机断层扫描(computed tomography,CT)对非小细胞肺癌诊断及分型的价值。方法:回顾性分析2017年04月至2019年03月本院收治的91例经皮肺穿刺活检或支气管镜检确诊的不可手术的非小细胞肺癌患者的病例资料,采用χ^(2)检验比较p40、CK5/6和NapsinA表达情况,分析其与CT影像表现间的关系,ROC曲线分析其联合诊断效能。结果:p40的表达与病变部位有关(P<0.05);CK5/6的表达与病变部位、胸腔积液有关(P<0.05);NapsinA的表达与病变部位有关(P<0.05)。p40、CK5/6、CT对鳞癌诊断的灵敏度分别为96.00%、88.00%、79.17%,特异度分别为90.24%、90.24%、76.74%,准确度分别为93.41%、89.01%、78.02%;NapsinA、CT对腺癌诊断的灵敏度、特异度及准确度分别为85.36%、96.00%及92.22%和72.09%、75.00%及73.62%。p40、CK5/6及CT诊断鳞癌的ROC曲线下面积(AUC)为0.987(P<0.001),NapsinA及CT诊断腺癌的AUC为0.953(P<0.001)。结论:p40、CK5/6、NapsinA及CT能够为非小细胞肺癌的病理分型提供精确的数据参考,但联合多个指标有更高的诊断准确度。

EPCAM联合CK8免疫磁珠制备及循环肿瘤细胞检测

目的研究循环肿瘤细胞(CTCs)富集和鉴定方法。方法分别用羧基磁珠制备EPCAM、CK82种免疫磁珠,分成EPCAM组、CK8组、2种磁珠均等混合检测的EPCAM/CK8组3组,对循环肿瘤细胞进行富集,采用HE染色和免疫细胞化学法鉴定细胞。结果 EPCAM组、CK8组、EPCAM/CK8组检测值分别为12.4±7.3、9.8±4.2、21.6±5.9个肿瘤细胞,检测效率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 EPCAM与CK8联合检测可有效提高非小细胞肺癌CTCs检出效率。