CK5/6、P63、TTF-1和CK8/18在NSCLC组织中的表达及意义

目的检测细胞角蛋白5/6(cytokeratin5/6,CK5/6)、P63蛋白、甲状腺转录因子-1(thyroid transcription factor-1,TTF-1)和细胞角蛋白8/18(cytokeratin8/18,CK8/18)在人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达情况,研究其表达对于肺鳞癌和肺腺癌的诊断和鉴别诊断价值,探讨其临床意义。方法采用免疫组化(EnVision法)检测CK5/6、P63、TTF-1和CK8/18在1 067例病理确诊的NSCLC中的表达情况,分析其表达与NSCLC临床及病理资料的相关性。结果 CK5/6、P63、TTF-1和CK8/18在NSCLC中的阳性表达率分别为50.2%(227/452)、59.6%(164/275)、61.6%(257/417)和94.3%(116/123)。CK5/6诊断肺鳞癌的灵敏度和特异度分别为96.1%和89.8%,准确度为92.9%。P63诊断肺鳞癌的灵敏度和特异度分别为97.0%和73.9%,准确度为86.1%。TTF-1诊断肺腺癌的灵敏度和特异度分别为88.1%和91.7%,准确度为89.2%。CK8/18诊断肺腺癌的灵敏度和特异度分别为100.0%和13.5%,准确度为70.9%。CK5/6和P63共同表达阳性诊断肺鳞癌的灵敏度和特异度为84.1%和94.5%,准确度为89.0%。TTF-1和CK8/18共同表达阳性诊断肺腺癌的灵敏度和特异度为86.5%和100.0%,准确度为90.7%。CK5/6、P63主要表达在肺鳞癌,在男性、吸烟患者中升高明显(P<0.05);TTF-1、CK8/18主要表达在肺腺癌,TTF-1在女性、不吸烟患者中升高明显(P<0.01)。NCSLC患者T分期越晚,其CK5/6、P63、TTF-1的阳性表达率越高(P<0.01)。NSCLC患者淋巴结转移N分期越早,其CK5/6、P63的阳性表达率越高(P<0.01)。P63的表达与肿瘤TNM分期呈负相关(P<0.05)。结论单个指标中CK5/6、TTF-1的阳性表达对于肺鳞癌、肺腺癌的鉴别诊断具有较高价值。CK5/6和P63,TTF-1和CK8/18联合诊断有利于提高诊断的特异性。NSCLC中CK5/6、P63和TTF-1的表达与肿瘤生长浸润程度呈正相关,CK5/6、P63的阳性表达程度与淋巴结转移分期呈负相关,P63的表达与肿瘤TNM分期呈负相关。

IHC联合FISH 检测胃癌中HER2与CK8/18、p53、CEA的表达及其相关性研究

目的 探讨IHC联合FISH检测胃癌中HER2及其与CK8/18、p53、CEA表达的相关性研究。方法 以我院2017-01-2018-06月收治的120例胃癌手术患者为研究对象,分别采用免疫组织化学(IHC)检测胃癌组织中HER2蛋白表达情况与荧光原位杂交技术(FISH)检测胃癌组织中HER2基因扩增情况,并采用IHC方法检测胃癌组织中CK8/18、p53、CEA蛋白的表达情况,分析HER2与CK8/18、p53、CEA表达的相关性。结果 120例胃癌组织中HER2表达水平,IHC检测结果显示为HER2蛋白过表达(3+)的阳性率为11. 7%(14/120),FISH检测结果显示HER2基因扩增的阳性率为17. 5%(21/120);HER2基因扩增与CK8/18、p53及CEA蛋白的表达越高,则胃癌发生淋巴结转移及浸润深度的概率越大(P<0. 05);HER2基因扩增与CK8/18、p53及CEA蛋白的表达呈正相关(P<0. 05)。结论 胃癌HER2基因扩增与CK8/18、p53及CEA蛋白的表达与其是否发生淋巴结转移及浸润深度有关,可作为患者病情严重程度与预后的一个有效评估指标。

联合检测ER、Vimentin、CK8/18、CEA对子宫内膜腺癌和宫颈腺癌鉴别诊断的意义

目的:探讨肿瘤标志物联合检测对于鉴别子宫内膜腺癌和宫颈腺癌的意义。方法:收集手术标本的石蜡切片61例,其中原发性子宫内膜腺癌35例,宫颈腺癌26例。用免疫组化法检测子宫内膜腺癌和宫颈腺癌中Vim entin,ER,CK8/18,CEA的阳性率。结果:子宫内膜腺癌Vim entin,ER,CK8/18,CEA的阳性率分别为74.3%,54.3%,91.4%,40.0%,宫颈腺癌的阳性率分别为11.5%,11.5%,50.0%,92.3%,子宫内膜腺癌Vim entin,ER,CK8/18的阳性率明显高于宫颈腺癌(P<0.005),而宫颈腺癌CEA的阳性率明显高于子宫内膜腺癌(P<0.005)。联合检测结果发现,Vim entin+ER+CK8/18+CEA四项联合与Vim entin+CK8/18+CEA三项联合的诊断符合率相同(总符合率为93.4%,子宫内膜腺癌91.4%,宫颈腺癌96.2%),均高于Vim entin+ER+CEA的诊断符合率(总符合率为86.9%,子宫内膜腺癌85.7%,宫颈腺癌88.5%)。结论:肿瘤标志物CK8/18有助于临床上鉴别原发性子宫内膜腺癌和宫颈腺癌,联合检测中以Vim entin+ER+CK8/18+CEA或Vim entin+CK8/CK18+CEA为佳。

Cervista高危HPV分型与CK8/18、P120ctn表达在预测低级别鳞状上皮内病变进展和转归中的价值

目的探讨Cervista高危人乳头瘤病毒(HR-HPV)分型与CK8/18、P120ctn在预测低级别鳞状上皮内病变(LSIL)进展和转归中的价值。方法收集2012年12月~2016年12月就诊于南方医科大学附属佛山妇幼保健院同时行TCT及组织活检确诊为LSIL患者119例,其中进展组28例,持续组41例,消退组50例。另收集HSIL宫颈鳞癌(SCC)对照组20例,正常对照组15例。采用Cervista HR-HPV分型方法检测各组HR-HPV分型,运用Ventana全自动免疫组化法检测各组CK8/18、P120ctn表达情况。结果进展组A9型阳性率均高于A7及A5/A6型,高于持续组及消退组,LSIL组间HR-HPV分型比较,差异有统计学意义(P<0.05);CK8/18阳性表达率进展组为67.9%、持续组为41.5%、消退组为20.0%;LSIL组分别与HSIL\SCC对照组、正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);P120ctn阳性表达率进展组为82.1%、持续组为90.2%、消退组为100.0%;LSIL组P120ctn阳性表达率低于正常对照组,高于HSIL\SCC对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论联合检测Cervista HR-HPV分型及CK8/18、P120ctn表达对预测LSIL进展和转归有一定价值。

乳腺导管增生性病变中CK5/6、P63、CK8/18、SMA、ER的表达意义

目的探讨乳腺导管增生性病变中CK5/6、P63、CK8/18、SMA、ER的表达水平变化,并分析其意义。方法回顾性分析2018年3月至2019年3月于本院就诊的128例乳腺导管增生性病变患者的临床资料,均为女性,其中24例普通型导管增生、32例平坦型上皮不典型增生、44例非典型性导管增生、28例导管原位癌,均先后对4组标本的CK5/6、P63、CK8/18、SMA、ER表达水平进行检测,观察分析4组患者的CK5/6、P63、CK8/18、SMA、ER的表达水平状况及意义。结果普通型导管增生组CK5/6阳性率高于平坦型上皮不典型增生组、导管上皮不典型增生组、导管原位癌组高,差异有统计学意义(P<0.05);4组CK8/18、SMA、P63阳性率比较差异无统计学意义;普通型导管增生组ER阳性率低于平坦型上皮不典型增生组、导管上皮不典型增生组、导管原位癌组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乳腺导管增生性病变中CK5/6、P63、CK8/18、SMA、ER的表达状况检测评估能够准确反馈乳腺导管增生性病变情况,为临床下一步治疗方案的制定提供可靠的科学依据。

联合检测在非小细胞肺癌中鉴别诊断的价值

目的探讨细胞角蛋白5/6(CK5/6)、细胞角蛋白HMW(CK-HMW)、甲状腺转录因子-1(TTF-1)和细胞角蛋白8/18(CK8/18)联合检测在低分化非小细胞肺癌中鉴别诊断鳞癌和腺癌的价值。方法采用免疫组化(En Vision法)检测CK5/6、HMW、TTF-1和CK8/18在478例肺鳞癌和腺癌中的表达情况并对结果进行分析。结果单个免疫组化指标中,CK5/6和TTF-1对于肺鳞癌和腺癌的鉴别诊断具有较高价值。CK5/6和HMW联合诊断能提高肺鳞癌诊断的特异性和准确度。TTF-1和CK8/18联合诊断能提高肺腺癌诊断的特异性和准确度。结论 CK5/6、HMW、TTF-1和CK8/18的联合检测对于低分化肺鳞癌和腺癌的鉴别诊断具有很高的价值。

E16.5d胚胎小鼠皮肤细胞作为毛囊重建模型种子细胞的可行性研究

目的研究胚胎小鼠皮肤及其毛囊的发育规律,探讨胚胎小鼠的皮肤细胞作为毛囊重建模型种子细胞的可行性。方法对80只胎龄14.5-18.5 d小鼠及新出生的小鼠皮肤进行连续石蜡切片,连续切片进行HE染色,观察其组织学结构并了解其附件形成情况。免疫荧光染色观察胚胎表皮特异性蛋白细胞角蛋白8(cytokeratin 8,CK8)和18(CK18)在胚胎小鼠皮肤表达。结果胎龄14.5 d(embryonic day 14.5,E14.5 d)的胚胎小鼠,表皮层形成表皮细胞仅为1-2层;E16.5 d的胎鼠背部皮肤较薄,表面凹凸不平并形成褶皱,未见毛囊形成;E18.5 d胎鼠毛囊发育达到旺盛的时期,毛囊数量明显增加;新出生的小鼠皮肤附件基本发育成熟。E16.5 d小鼠皮肤中表皮干细胞标记物CK8和CK18为阳性。结论 16.5 d胚胎小鼠(E16.5)的皮肤细胞可以作为毛囊重建模型的种子细胞。

膀胱癌不同TNM分期患者外周血循环肿瘤细胞的表达探索

目的研究不同TNM分期膀胱癌患者外周血循环肿瘤细胞（cTCs）的表达情况，探讨免疫芯片分选法的可行性，评估检测结果的临床意义。方法2014年6月至2015年2月收治的T1～T4不同分期膀胱癌患者15例，其中男12例，女3例。年龄48~78岁，平均62岁。依据2009年UICC的TNM分期标准：T1期5例，T2期5例，T3期3例，T4期2例，淋巴结转移2例。所有患者均无远处转移，均行膀胱癌根治手术。且于治疗前采取外周血7．5ml，0～4℃ADC管内保存，24h内送检。用免疫芯片分选法对患者外周血进行CTC定量检测，选用抗细胞角蛋白CK8／18／19荧光抗体作为筛选标记物。结果4例膀胱癌患者外周血CTC定量检测为阳性（T1～T4期各1例），共发现6个CK8／18／19阳性的细胞，并在1例分期为T1N0M0的患者外周血中检测到3个CTCs。结论本研究并未发现肿瘤分期与CTC检出率有关。抗CK8／18／19抗体可以作为免疫芯片分选法检测膀胱癌CTC的标记物。

肾细胞癌外周血循环肿瘤细胞检测方法的初步探讨

目的探讨应用细胞搜索系统（cell-search system，CSS）检测肾细胞癌患者外周血循环肿瘤细胞（circulating tumor cell，CTC）的方法及可行性。方法2012年1—6月收治的中晚期肾细胞癌患者8例，男5例，女3例。年龄57～70岁，平均64岁。依据2009年UICC的TNM分期标准：T3N0M0期2例，T4N0M1期6例。3例行肾癌根治手术，5例进行靶向药物治疗。所有患者治疗前采取外周血7．5ml，15℃～30℃专用试管内保存，96h内送检。用CSS对患者外周血进行CTC定量检测，标志物选用抗细胞角蛋白CK8／18／19荧光抗体。结果8例外周血CTC定量检测结果均为阴性，1例T4N0M1患者外周血中发现25个CK8／18／19和CD45的双阳性细胞。结论利用上皮细胞肿瘤标志物CK8／18／19抗体标记肾癌CTC，采用CSS方法未能检测出中晚期肾癌患者血中的CTC，抗CK8／18／19抗体不能作为所有上皮来源肿瘤的细胞标志物来检测CTC。