Cyclin-CDK-CKI及UPP参与生殖调控及在甲壳动物性腺发育中的研究进展

Cyclin-CDK-CKI是参与真核细胞周期调控的3个重要的调节因子。泛素蛋白酶体途径(ubiquitin proteasome pathway,UPP)是真核细胞内非溶酶体途径的蛋白质选择性降解的重要途径。细胞周期中许多时相特异性周期蛋白通过泛素化被周期性的降解对于细胞分裂的调控进程具有重要的作用。主要综述了Cyclin-CDK-CKI和UPP的组成、生理生化特性及其参与生殖调控的作用机制,同时阐述了这两大系统之间的联系及其在甲壳动物性腺发育中的研究进展。

CKIp15^(INK4B)高表达对人黑色素瘤细胞cyclinD1和c-myc表达的影响及生长特性的改变

通过 DNA体外重组和转染技术 ,将已构建好的含有 p1 5基因的质粒 p XJ- 41 - p1 5转染 p1 5缺失的人黑色素瘤细胞 A 375,经 G 41 8筛选出阳性单克隆 ,并经 PCR、Western等检测 ,证明建立了 p1 5稳定高表达的细胞模型 .生长曲线和 FCM实验表明 ,与对照组细胞相比 ,实验组细胞增殖能力减弱 ,G1期细胞增加 ,S期细胞减少 .同时 ,细胞血清依赖性有所恢复 ,在软琼脂的集落形成能力下降 ,显示出细胞部分恶性表型逆转 .进一步免疫印迹实验表明 ,癌基因 c- myc的蛋白表达水平明显下降 .Cyclin D1的表达受到抑制 ,而 CDK4的表达则基本不变 .以上结果显示出 ,p1 5基因高表达能够抑制人黑色素瘤细胞的增殖及部分恶性表型 ,负调细胞周期进程 ,而 c- Myc蛋白和 G1期引擎分子 Cyclin D1表达的被抑制可能是 p1

CDKs和CKIs在胃癌细胞周期调控中的相关性

研究 CDKs和 CKIs在调节胃癌细胞周期进程中的作用表明 ,全反式视黄酸 ( ATRA)通过诱导细胞滞留在 G1/G0 期而抑制胃癌细胞生长 .Western blot分析显示 ,ATRA可上调 p2 1 waf1/ cip1的表达 ,而抑制 p1 6ink4 的表达 .免疫沉淀及活性测定表明 ,CDK2 激酶活性可被 ATRA抑制 ,而CDK4 活性先被诱导上升 ,2 4 h后逐渐下降 .另外 ,ATRA可以调节 Rb蛋白的磷酸化和 c- myc蛋白的表达 .由此证实 ,ATRA诱导胃癌细胞滞留于 G1/G0 期与其上调 p2 1 waf1/ cip1的表达和抑制CDK2 和 CDK4 激酶活性 ,进而抑制 Rb蛋白的磷酸化和 c- myc的表达有关 . Rb蛋白是 ATRA抑制胃癌细胞生长的下游调节因子 .另外 ,p1 6ink4 的功能在胃癌细胞中可能丧失 .

CKIs蛋白在视黄酸诱导HL-60细胞分化中的作用研究

从细胞周期调控这一途径探讨视黄酸抑制细胞增殖、诱导细胞分化的分子机制。结果显示：５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ全反式视黄酸（ＡＴＲＡ）及芳维甲（ＡＥ）处理的ＨＬ－６０细胞生长受抑，４ｄ后９０％细胞停滞于Ｇ０／Ｇ１期，Ｇ１→Ｓ期转换受阻，同时ＮＢＴ还原反应增强，ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析及免疫细胞化学染色表明处理后的细胞ｐ１６、ｐ２１两种细胞周期素依赖激酶抑制物（ＣＫＩｓ）表达增加，而ＣｙｃｌｉｎＤ１和ｐＲｂ蛋白则降低，其中尤以ＡＴＲＡ作用为明显。结果提示，细胞周期调控相关蛋白可能在视黄酸及其衍生物抑制细胞增殖、诱导细胞分化过程中起重要作用。

细胞周期的网络调控系统cyclins-CDKs-CKIs及其与肿瘤的关系

近年研究表明,CDK活性调节在细胞周期调控中起关键作用。CKI对CDK起抑制作用,因而在细胞周期调控中也起负性调控因子的作用。cyclins-CDKs-CKIs共同构成了一个对细胞周期进行调控的网络系统。在肿瘤发生机制中,CDK与CDK调节亚基cyclin有可能作为癌基因,而CKI有可能作为抑癌基因起重要作用。

细胞周期素依赖蛋白激酶抑制蛋白(CKIs)与肿瘤

细胞增殖失和细胞凋亡障碍癌变的根本原因。由细胞周期素（Ｃｙｃｌｉｎｓ）、细胞周期素依赖蛋白激酶（ＣＤＫｓ）、细胞周期素依赖蛋白激酶抑制蛋白（ＣＫＩｓ）等组成的细胞周期调控系统决定着细胞增殖周期中Ｇ１、Ｓ、Ｇ２、Ｍ期的转换，其异常便有可能导致恶性增殖。...

CKIs对人乳腺癌细胞侵袭转移的影响

目的利用CKI肽类似物抑制CDK激酶活性,以明确CKI对人乳腺癌细胞的作用,探讨其对乳腺癌细胞体外侵袭转移的影响。方法利用作用于CDK4/CDK6的CKI肽类似物p20和p21,分别干预人乳腺癌MDA-MB-231细胞株24h。然后应用细胞与纤维连结蛋白黏附实验测定肿瘤细胞黏附率,通过单层细胞划痕实验观察细胞转染前后迁移能力的变化,Transwell侵袭实验检测细胞体外侵袭力。结果人乳腺癌MDA-MB-231细胞株经CKI肽类似物p20和p21分别干预后,细胞黏附、迁移及侵袭能力明显减弱。结论 CDK4/CDK6激酶对乳腺癌侵袭转移过程具有重要的作用。CKI肽类似物可以抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的黏附、侵袭和迁移。因此CKI肽类似物可能阻抑肿瘤细胞的转移,显示此类细胞穿膜肽在恶性肿瘤治疗上的潜在作用。

拟南芥CKI1基因上游转录调控因子筛选及鉴定

拟南芥CKI1(cytokininindependent 1)是双组分信号系统中一个组氨酸激酶蛋白,通过作用于下游组氨酸磷酸转移蛋白激活双组分信号通路,在调控胚囊中央细胞命运分化和发育过程中具有重要作用。然而目前对于CKI1基因上游转录调控因子还知之甚少。本研究分析了不同长度的CKI1启动子在拟南芥胚囊中的活性,并利用酵母单杂交技术对CKI1上游转录调控因子进行了筛选和鉴定。结果表明,位于内含子区域中的F5/R2片段表现出与CKI1启动子全长相一致的表达活性。进一步选取3个串联重复的F5/R2片段用于构建诱饵表达载体,同时,选取拟南芥雌蕊构建cDNA文库,通过酵母单杂交筛选获得226个阳性克隆。去除低质量及冗余重复的序列后共获得66条可读序列,其中8条序列对应的基因编码具有DNA结合功能的蛋白。研究结果为进一步揭示CKI1基因的转录调控机制提供了重要参考信息。

细胞周期调控系统Cyclins-CDKs-CKIs在创面愈合中作用的研究进展

细胞周期调控系统相关因子调控细胞周期进展,在创面愈合炎症期与修复期均发挥重要作用。细胞周期蛋白(Cyclin)通过Cyclin依赖性激酶(Cyclin-dependent kinases,CDKs)调控细胞周期,而CDKs的抑制剂(Cyclin-dependentkinaseinhibitor,CKI)具有抗炎作用,在炎症期抑制cyclinD1基因的表达可能通过防止巨噬细胞过度增殖,从而消退炎症反应,利于慢性创面的愈合;在创面修复期下调细胞周期正向调控因子CyclinD,CyclinE1,上调细胞周期负向调控因子p21cip1,p27kip1等的表达可抑制成纤维细胞的异常增殖从而减少瘢痕增生。Cyclins-CDKs-CKIs的潜在治疗价值是消退炎症反应,促进创面愈合,并抑制瘢痕增生,深入了解其在创面愈合不同阶段中的作用,对探索促进创面愈合、抑制瘢痕增生的治疗靶点具有重要意义。

DeepCKI:一个基于变分图自编码器预测细胞-细胞因子相互作用的生物信息学模型

细胞因子(cytokine)是一类由免疫细胞和某些非免疫细胞合成和分泌的信号分子,在免疫系统中通过结合相应受体调节细胞生长、分化和调控免疫应答。目前研究多侧重于通过实验方法检测细胞因子和受体的相互作用来研究细胞间的通讯网络,但存在实验周期长、设备要求高和成本高等不足。因此,有必要通过计算方法来加快对细胞-细胞因子相互作用(cell-cytokine interactions,CKI)的系统研究。本文提出一种基于变分图自编码器(variational graph auto-encoder,VGAE)预测细胞-细胞因子相互作用的深度学习模型——DeepCKI。该模型可有效融合蛋白质相互作用网络和不同类型的蛋白质特征,充分挖掘网络拓扑结构和节点属性中的有效信息,实现对细胞-细胞因子相互作用的高效预测。与变分自编码和深度神经网络方法相比,采用图结构设计的DeepCKI表现出了最优的预测性能。DeepCKI模型对4种不同类型细胞-细胞因子相互作用的ROC曲线下面积均高于0.8,模型具有一定的鲁棒性和有效性。预测打分排名前100的细胞-细胞因子相互作用中,有36对已被最新发表文献验证,表明该模型具有发现新的细胞-细胞因子相互作用的能力。

从Cyclin E1-CDK2-CKIs通路探讨芪灵扶正清解方抑制肝癌细胞株Hep1-6增殖的作用机制

目的从周期蛋白Cyclin E1-细胞周期依赖性蛋白激酶2(CDK2)-CDKs抑制因子CKIs(Cyclin E1-CDK2-CKIs)信号通路角度探讨芪灵扶正清解方(QL)调控小鼠肝癌Hep1-6细胞株增殖的机制.方法体外培养Hep1-6细胞,分别给予不同剂量的QL醇提物(0、31.25、62.5、125、250、500、1000μg/mL)干预Hep1-6细胞株24h、48h和72h.MTT法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞周期各个时相的比例;Western blot检测CDK2、周期蛋白Cyclin E1、视网膜母细胞瘤Rb、磷酸化Rb(p-Rb)以及CDKs抑制因子(CKIs)p57^(KIP2)和p27^(KIP1)的蛋白水平.结果QL醇提物能显著抑制Hep1-6细胞的生长活力,呈剂量依赖性;Hep1-6细胞周期被阻滞在G0/G1期,S期的DNA合成被抑制;QL醇提物下调了CDK2、Cyclin E1、p-Rb的蛋白水平,上调了p57^(KIP2)和p27^(KIP1)的蛋白水平.结论QL方通过抑制CDK2与Cyclin E1的结合,同时正向调控CKIs抑制Cyclin E1-CDK2复合物的激酶活性,从两方面抑制下游Rb的磷酸化水平,进而有效抑制肝癌Hep1-6细胞的增殖.

佛波酯对CKI p15^(INK4B)高表达的人黑色素瘤细胞生长及凋亡的影响

通过DNA体外重组和转染技术 ,将已构建好的含有p15基因全长的质粒 pXJ 41 p15转染p15缺失的人黑色素瘤细胞A375 ,经G418筛选出阳性单克隆 ,并经PCR、蛋白质印迹等检测 ,证明建立了 p15稳定高表达的细胞模型 .实验表明 ,经佛波酯 (PMA)长期处理 ,实验组细胞中的 p15表达水平进一步上升 ,同时观察到蛋白激酶C (PKC)活性下降 ,与对照组细胞相比 p15高表达的细胞PKC活性及细胞生长均受到较强烈的抑制 ,并能引起约 30 %的实验组细胞发生凋亡 .凋亡细胞中Caspase3P2 0亚基的水平上升 .结果表明 ,CKIp15与PKC信号系统在调节细胞增殖、凋亡的过程中具有一定的相关性 ,它们的协同作用可能启动了细胞中与Caspase相关的凋亡通路 ,使细胞发生凋亡 .

CKI大连设立软件开发公司

CKI公司近日宣布，日冲信息（大连）有限公司正式成立并运营。新成立的日冲信息（大连）有限公司是冲信息株式会社在海外的第一个软件开发公司，除了从事面向中国打印机市场的产品开发，以及从事面向全球销售产品的软件开发外，同时还负责面向亚洲、大洋洲地区的彩色页式打印机、多功能一体机的本地化语言对应以及对特定用户的定制开发。

复方苦参注射液预防放射性肠炎有效性的meta分析

目的 探讨复方苦参注射液(compound Kushen injection, CKI)预防放射性肠炎(radiation induced bowel injury, RBI)的有效性,为临床使用CKI预防RBI提供循证参考。方法 选取建库至2023年7月20日中国知网、万方数据库、维普数据库、PubMed及The Cochrane Library等数据库公开发表的关于CKI治疗RBI的随机对照试验(randomized controlled trial, RCT),依次通过浏览标题、摘要和全文,应用RevMan 5.4统计软件对提取数据进行meta分析。结果 共纳入10篇文献,包括690例患者,其中对照组(常规治疗方式)335例,联合组(对照组基础上仅加用CKI)355例。Meta分析结果显示,联合组临床有效率高于对照组,RBI发生率、1级RBI发生率及2级RBI发生率低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CKI可有效降低RBI发生率,增加患者的临床疗效,值得临床推广。

顶级数字功放——高峰CKi网络一线通

随着专业音响产品向数字化及网络化技术的过渡,很多国际名牌功放生产厂家都纷纷推出了自己的高端产品--数字功放.

SHAMROCKIN'STYLE 10Pieces That Will Have Them Green with Envy

Forget about that glaring cut-up green tee you wore during St.Patrick's Day while doing keg stands in college.Say goodbye to the shamrock necklaces.We;re elevated and beyong that now.

NGX6基因对人结肠癌细胞HT-29细胞周期的影响

NGX6基因是新克隆的候选抑瘤基因,研究表明NGX6重表达可抑制结肠癌细胞的增殖.为进一步研究NGX6对细胞周期的影响,采用流式细胞仪检测NGX6重表达对结肠癌细胞HT-29细胞周期的影响,发现NGX6重表达可增加HT-29细胞在G0/G1期的分布比例,减少了S,G2,M期细胞数.利用蛋白质印迹和流式细胞术分析NGX6转染前后HT-29细胞周期素(cyclins)和细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制物(cyclin-dependentkinaseinhibitor,CKI)的表达变化,发现NGX6可下调HT-29细胞中cyclinE、cyclinD1的表达及上调p27的表达,对cyclinA和cyclinB的表达无明显影响,p16在三组结肠癌细胞中均无表达.研究结果表明,NGX6在HT-29细胞中通过下调cyclinE、cyclinD1和上调p27的表达,阻滞细胞周期于G0/G1期,从而发挥其在结肠癌中的抑瘤作用.

复方中药白龙对G_1期人胃癌细胞中抑癌基因的影响及与PKA信号通路的相关性

目的 :探讨复方中药白龙 (简称白龙 )对人胃癌BGC82 3G1期细胞周期蛋白激酶抑制因子(CKI) p16INK4a、p2 1以及Rb、c myc等基因转录的影响和cAMP PKA信号通路的调节关系。 方法 :通过实验室常规分子生物学手段 (细胞同步化、分子杂交———Northern杂交、Western杂交等 )检测相关基因的表达变化。结果 :白龙对G1期细胞p16INK4a表达有强烈促进作用 ,mRNA和蛋白水平均显著升高 ;处理细胞的同时加入PKA抑制剂阻断该信号通路后 ,白龙作用丧失 ,p16INK4a mRNA和蛋白水平明显下降 ;白龙还可以促进抑癌基因Rb、p2 1的mRNA表达和抑制癌基因c mycmRNA的表达 ;同样在白龙作用的同时阻断该信号通路 ,则白龙的上述作用随之丧失。结论 :白龙可以通过影响BGC82 3G1期细胞中众多抑癌基因 (包括p16INK4a、p2 1、Rb)和癌基因 (包括c myc)的转录发挥其抑瘤生理效应 ,而这种变化发生的机理是与cAMP PKA信号通路的调节机制密切相关的。

苯并芘对HELF细胞周期及相关基因表达的影响

背景与目的:探讨苯并芘(benzo[a]pyrene,BaP)影响人胚肺成纤维细胞(HELF)周期的途径和作用机制。材料与方法:用5μmol/L的BaP处理HELF细胞后,采用细胞计数,流式细胞仪检测BaP对细胞生长和周期的影响,用PCR和Western_blotting检测BaP对细胞周期相关基因mRNA和蛋白的影响。结果:BaP处理HELF细胞后,显著促进细胞的生长,在处理后第8d时细胞数目约增加50%(P<0.01),细胞体积增大,促进细胞由G1期向S期和G2/M期的转换。mRNA和蛋白检测结果显示:BaP处理细胞后可以促进p53、cyclinD1、CDK2、CDK4和p21mRNA及蛋白的表达(P<0.05或P<0.01),抑制cyclinEmRNA及蛋白的表达(P均<0.01),而对cyclinA和p27mRNA及蛋白表达没有明显影响(P均>0.05)。结论:BaP对HELF细胞周期的调控逃脱了p53_p21的关卡作用,而通过诱导cyclinD1、CDK2和CDK4的表达来加快细胞周期的进程,该途径为cyclinA和p27非依赖型。