Toll样受体7活化调节脐带间充质干细胞免疫原性的实验研究

目的研究脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cell,UCMSC)的Toll样受体7(toll like receptor 7,TLR7)通路活化后,是否会增加UCMSC的免疫原性。方法用TLR7的激动剂CL264刺激UCMSC后,用流式细胞术检测UCMSC表面共刺激抗原〔人白细胞抗原-E(HLA-E),CD80,CD86〕和干细胞标志物(CD29,CD59,CD90)的表达变化;定量PCR检测CL264刺激UCMSC后多个免疫相关因子的表达变化;细胞分化实验检测TLR7活化后对UCMSC分化能力的影响;分离健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)并与UCMSC共培养,用细胞杀伤实验检测免疫细胞对UCMSC的免疫杀伤效应。结果 CL264活化TLR7通路后,可明显刺激UCMSC表面共刺激分子CD86和HLA-E的表达;定量PCR结果表明CL264诱导多个促炎症相关因子〔白细胞介素(IL)-1β,IL-6,IL-8,IL-10,干扰素(IFN)-β,IFN-γ,核因子-κB(NF-κB),转化生长因子-β(TGF-β)〕表达,并抑制多个干细胞标志物〔Kruppel样因子4(Klf4),巢蛋白(Nestin),胚胎干细胞关键蛋白质(Sox2),RNA结合蛋白质(Lin28)〕表达;TLR7通路活化不影响UCMSC的分化潜能;CL264活化TLR7通路后增加免疫细胞对UCMSC的免疫攻击。结论 TLR7激动剂CL264可增加UCMSC的免疫原性。