Snail和Claudin-3在非小细胞肺癌中的表达及意义

背景与目的上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)是肿瘤浸润和转移的关键步骤,上皮细胞极性丧失是其主要标志,表现为Claudin等上皮标记丢失。锌指转录因子Snail是调控EMT的重要转录因子,近年来对肿瘤侵袭转移机制研究发现Snail能提高多种肿瘤的侵袭能力。本研究旨在利用组织芯片技术探讨转录因子Snail和紧密连接蛋白(Claudin-3)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)及其淋巴结转移灶中的表达和意义。方法分别采用免疫组织化学MaxVision法和EnVision法检测59例癌旁正常肺组织、302例NSCLC原发灶以及57例淋巴结转移灶中Snail和Claudin-3的表达。结果 Snail在癌旁正常肺组织、NSCLC原发灶以及淋巴结转移灶中的表达逐渐增强,差异具有统计学意义(P<0.05);Claudin-3在癌旁正常肺组织、NSCLC原发灶以及淋巴结转移灶中的表达逐渐减弱,差异具有统计学意义(P<0.05)。在NSCLC原发灶中,Snail和Claudin-3的表达与肿瘤组织学类型有关(P<0.05)。Spearman等级相关分析显示Snail与Claudin-3的表达呈负相关(r=-0.178,P=0.002)。Kaplan-Meier生存分析显示肿瘤大小、组织学类型、病理分级、有无癌转移、TNM分期、Snail的表达以及Snail与Claudin-3的差异性表达影响NSCLC患者的术后生存时间(P<0.05)。Cox回归分析提示肿瘤大小、组织学类型、病理分级、有无癌转移和TNM分期是影响NSCLC患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 Snail和Claudin-3在NSCLC的浸润、转移中具有重要意义,有助于对NSCLC患者预后的评价。

Claudin-1和Claudin-3在食管鳞癌中的表达

目的:检测Claudin-1和Claudin-3蛋白在食管鳞癌组织和癌旁黏膜中的表达,探讨Claudin-1和Claudin-3蛋白在食管鳞癌发生发展中的作用。方法:用组织芯片技术及免疫组化方法检测57例食管鳞癌及相应癌旁黏膜组织中Claudin-1和Claudin-3蛋白的表达情况,分析其表达与临床病理指标的关系。结果:Claudin-1蛋白阳性表达主要见于食管鳞癌细胞质和细胞膜,Claudin-3蛋白阳性表达主要见于食管鳞癌癌旁正常黏膜的细胞质和细胞膜,其食管鳞癌组织和癌旁组织中的表达均有差异,Claudin-1在食管鳞癌和癌旁正常黏膜中的表达率为76.4%和38.3%,C1audin-3在食管鳞癌和癌旁正常黏膜中的表达率为24.6%和79.2%。C1audin-1和Claudin-3蛋白在食管鳞癌组织的表达与患者年龄、性别、肿瘤的分化程度、分级分期及淋巴结转移情况无关。结论:食管鳞癌的发生可能与Claudin-1的表达上调及Claudin-3的表达下调有关。

胃癌及癌旁组织中CDX2和claudin-3的表达及其意义

目的探讨CDX2和claudin-3在胃癌及癌旁组织中的表达及其与临床病理因素之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测CDX2和claudin-3在67例胃癌及32例癌旁组织中的表达。结果 (1)CDX2在癌旁"正常"组织中不表达,癌旁肠化上皮的阳性率(87.5%)明显高于胃癌组织(44.8%,P<0.001)。CDX2在Lauren分型肠型胃癌中的阳性率(62.9%)明显高于弥漫型胃癌(25.0%,P<0.05);CDX2表达与胃癌分化程度呈正相关(P<0.05),而与淋巴结转移和TNM分期呈负相关(P<0.05)。claudin-3在胃癌组织中的阳性率(77.6%)明显高于癌旁"正常"组织(36.7%,P<0.001),胃癌中claudin-3仅与淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。(2)5年生存分析显示:CDX2阳性组胃癌5年生存率(76.7%)明显高于阴性组(43.2%,P=0.01)。claudin-3与胃癌患者5年生存率无明显相关性(P>0.05)。根据CDX2和claudin-3在胃癌中联合表达结果进行生存分析,结果显示CDX2+/claudin-3-的胃癌患者,5年生存率最高(P=0.004)。多因素回归分析表明仅CDX2的表达(P=0.006)是影响胃癌预后的独立因素。(3)癌旁肠化黏膜及肠型胃癌中CDX2与claudin-3的表达均呈正相关(r=0.486,P=0.005;r=0.426,P=0.011)。结论胃癌组织中CDX2表达下调及claudin-3表达上调可能在胃癌的发生、发展中起重要作用,CDX2可作为胃癌诊断、胃癌的恶性程度及患者预后评估的有用指标。CDX2可能在肠化胃黏膜及肠型胃癌中调控clau-din-3的表达。

卵巢交界性肿瘤中claudin-3和β-catenin的表达及临床病理意义

目的研究claudin-3和β-连环素(β-catenin)蛋白在卵巢交界性肿瘤(borderline ovarian tumors,BOTs)组织中的表达及临床病理意义。方法采用免疫组织化学SP法检测claudin-3和β-catenin蛋白在69例BOTs组织中的表达,并与其在17例正常卵巢组织、31例卵巢上皮性良性肿瘤、39例卵巢上皮性恶性肿瘤组织中的表达进行比较。结果BOTs组织中claudin-3蛋白的阳性表达率(59.4%,41/69)低于卵巢癌组织中的阳性表达率(89.7%,35/39),而高于良性肿瘤及正常卵巢组织中的表达率(22.6%,7/31;5.9%,1/17),差异均有统计学意义(P<0.01);正常卵巢组织与良性肿瘤相比,差异无统计学意义(P>0.05)。BOTs组织中β-catenin蛋白的阳性表达率(52.2%,36/69)低于卵巢癌组织中的阳性表达率(84.7%,33/39),而高于良性肿瘤及正常卵巢组织中的表达率(29.0%,9/31;11.8%,2/17),差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05);而正常卵巢组织与良性肿瘤相比,差异无统计学意义(P>0.05)。Claudin-3和β-catenin蛋白的表达与BOTs患者的临床病理分期以及腹腔有无种植相关(P<0.05),而与组织学类型和患者年龄无关(P>0.05)。Claudin-3与β-catenin在BOTs组织中的表达呈正相关(r=0.439,P=0.000)。结论 Claudin-3与β-catenin在BOTs的发生、发展中可能起着协同作用,对其进行联合检测有助于BOTs的诊断和治疗。

组织芯片检测Claudin-3在前列腺癌中的表达

目的:检测Claudin-3在前列腺癌中的表达情况,探讨其与前列腺癌发生发展的关系。方法:采用组织芯片技术构建包含64例前列腺癌和39例前列腺增生组织的64点阵石蜡组织芯片,用免疫组化SP法检测该芯片中Claudin-3的表达,分析其与前列腺癌Gleason评分和临床分期的关系。结果:前列腺癌Claudin-3阳性表达率为60.94%(39/64),前列腺增生表达率17.95%(7/39)(P<0.05);Claudin-3与前列腺癌Gleason评分和临床分期明显相关。结论:Claudin-3异常表达与前列腺癌发生发展有密切关系。

紧密连接蛋白Claudin-3在人乳腺癌组织的表达与临床意义

目的探讨Claudin-3在不同转移淋巴结个数乳腺癌患者中表达的差异。方法将128例乳腺癌组织标本按淋巴结转移个数分组,转移淋巴结个数<4个为A组,≥4个为B组,2组各64例。应用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测2组乳腺癌组织Claudin-3的表达水平并进行比较。结果 A组Claudin-3 mRNA表达低于B组,2组比较有显著性差异(P<0.05)。不同年龄、激素受体状态、CerbB-2、p53、ki67和组织学分级患者Claudin-3表达水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 Claudin-3表达上调可促进乳腺癌的淋巴结转移,与预后不良有关。

Claudin-3 mRNA在前列腺癌组织中的表达及意义

目的探讨Claudin-3 mRNA在前列腺癌组织中的表达及其意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测34例前列腺癌组织和12例前列腺增生组织的claudin-3 mRNA的转录水平,并结合相关指标进行分析。结果Clau-din-3 mRNA在前列腺癌组织中的表达明显高于良性前列腺增生组织,差异有显著性(p<0.05)。Claudin-3 mRNA在前列腺癌中的表达与肿瘤病理分级和TNM分期无相关关系(p>0.05)。结论Claudin-3 mRNA表达上调可能与前列腺癌的发生相关。

Claudin-3在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的通过检测Claudin-3 mRNA和蛋白在膀胱移行细胞癌(TCCB)组织中的表达,探讨其在膀胱移行细胞癌发生、发展中所起的作用。方法对56例TCCB患者肿瘤组织、17例非肿瘤膀胱移行上皮组织分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Claudin-3 mRNA的表达,SP免疫组织化学法检测Claudin-3蛋白的表达。并分析Claudin-3 mRNA和蛋白的表达与TCCB的病理分级、临床分期的关系等。结果(1)TCCB组中Claudin-3 mRNA阳性率明显低于非肿瘤膀胱组织(P<0.05),且在不同临床分期、病理分级的TCCB组之间阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。(2)TCCB组中Claudin-3蛋白表达水平明显低于非肿瘤膀胱组织,不同临床分期和病理分级肿瘤组织中Claudin-3蛋白表达的阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。而在不同性别、年龄、单灶与多灶组间Claudin-3蛋白表达的阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。在初发与复发组间Claudin-3蛋白表达的阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。结论(1)TCCB组Claudin-3 mRNA和蛋白表达水平均明显低于非肿瘤组,提示Claudin-3与TCCB的发生密切相关,Claudin-3在膀胱肿瘤的发生中起抑制作用。(2)Claudin-3的转录表达与膀胱肿瘤的病理分级、临床分期、以及肿瘤复发均有显著相关。Claudin-3表达下调或缺失可能促使膀胱移行细胞癌恶性程度和复发率增高。

紧密连接蛋白Claudin-3与三阴性乳腺癌患者临床特征的相关性

目的:探讨紧密连接蛋白Claudin-3与三阴性乳腺癌患者临床特征的相关性。方法:自2012年3月至2017年3月,收集我院收治的三阴性乳腺癌患者108例,行乳腺癌根治术,术中取乳腺癌标本和癌旁标本,检测组织中紧密连接蛋白Claudin-3表达情况,分析紧密连接蛋白Claudin-3与患者临床病理参数的相关性。对患者随访1年,分析术后1年复发患者与不复发患者组织中紧密连接蛋白Claudin-3的差异。结果:乳腺癌组织和癌旁组织中紧密连接蛋白Claudin-3表达无统计学差异(P=0.331)。与紧密连接蛋白Claudin-3阴性的患者相比,紧密连接蛋白Claudin-3阳性的患者TNM分期为Ⅲ期的比例显著增高(52.46%vs 29.79%,P=0.018),淋巴结转移比例增高(55.74%vs 29.79%,P=0.007),术后复发率显著增高(26.23%vs 10.64%,P=0.042)。结论:紧密连接蛋白Claudin-3与淋巴结转移和TNM分期有关,对预测患者术后复发具有一定价值。

claudin-3、4在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨claudin-3、4在人类食管鳞状细胞癌和癌旁正常组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测54例食管鳞状细胞癌和26例癌旁正常组织中claudin-3、4的表达及其与临床病理参数的关系。结果:claudin-3在食管鳞状细胞癌中的阳性率(92.6%)显著高于癌旁正常组织(15.4%)(P<0.01),claudin-3的表达与性别、年龄、肿瘤大小、病理分级、TNM分期、淋巴结转移均无明显关系(P>0.05),但有远处转移者阳性率较无远处转移者低(P<0.05);而claudin-4在年龄≤60岁和有远处转移者阳性率均较年龄>60岁与无远处转移者低(P<0.01和P<0.05)。结论:claudin-3、4在食管鳞状细胞癌的发生中起着促进作用,但在有远处转移时出现表达缺失或低表达。

喉鳞癌组织中Claudin-3和E-cad表达的临床意义

目的检测Claudin-3及上皮型黏附素(E-cad)在喉鳞癌中的表达,探讨二者在喉鳞癌发生发展及转移中的作用。方法应用免疫组织化学法检测98例喉鳞癌组织及30例正常喉黏膜组织中Claudin-3、E-cad蛋白的表达情况,并将检测结果与临床病理特征进行综合分析。结果 Claudin-3蛋白阳性表达主要定位于喉鳞癌癌旁正常黏膜细胞质和细胞膜,E-cad蛋白阳性表达主要定位于喉鳞癌癌旁正常黏膜细胞膜,Claudin-3、E-cad蛋白在喉鳞癌中表达的阳性率明显低于正常黏膜。喉鳞癌中Claudin-3和E-cad蛋白的表达与肿物大小、分化程度、有无甲状软骨累及和淋巴结转移密切相关。结论 Claudin-3和E-cad在喉鳞癌组织中表达下调,二者可能与喉鳞癌的发生发展有关,联合检测Claudin-3和E-cad可能与喉鳞癌的预后密切相关。

Claudin-3在胃腺癌的表达及预后意义

目的探讨Claudin-3在胃腺癌组织中的表达及其临床病理学意义以及和预后的关系。方法应用组织芯片和免疫组化S-P法检测139例胃腺癌患者正常胃黏膜腺上皮/肠化生的胃腺上皮、黏膜层、肿瘤中心、侵袭前沿区及淋巴结转移灶纵向侵袭胃癌组织Claudin-3表达的动态变化,分析Claudin-3的定位及表达水平与胃癌的临床病理学特征、侵袭转移及预后关系。结果肠化生上皮Claudin-3中-强阳性表达率为100%(36/36),高于正常胃黏膜腺上皮(17.5%,18/103,χ2=78.12,P<0.05)。在胃癌组织中,Claudin-3的表达呈2种染色模式,肠型胃癌细胞Claudin-3定位于细胞膜,弥漫型胃癌细胞Claudin-3定位于细胞质,混合型胃癌细胞呈细胞膜和细胞质表达。从黏膜层、肿瘤中心、侵袭前沿及淋巴结转移灶胃癌组织,膜型染色的Claudin-3中-强阳性表达率分别为59.4%(61/88)、85.3%(75/88)、36.4%(32/88)、23.9%(21/88),呈先升后降的抛物线趋势,肿瘤中心区表达最高,淋巴结转移灶表达最低(χ2=110.83,P<0.05),而浆型染色的Claudin-3中-强阳性表达率分别为11.8%(6/51)、33.3%(17/51)、51.0%(26/51)、15.7%(8/51),呈逐渐升高的趋势,侵袭前沿区表达最高(χ2=31.32,P<0.05)。黏膜层胃癌细胞膜型Claudin-3高表达者的术后中位生存时间高于弱表达者(χ2=9.36,P<0.05)。结论胃腺癌Claudin-3的表达可能与胃癌细胞的组织学分型有关,在胃癌侵袭转移的不同部位呈异质性表达,黏膜层胃腺癌膜型Claudin-3的表达可作为胃癌患者潜在预后指标。

Claudin-3在人胰腺癌组织芯片中的表达及其临床意义

目的检测Claudin-3在人胰腺癌中的表达情况,探讨人胰腺癌发病中Claudin-3所起的作用。方法构建包含64例胰腺导管腺癌及16例慢性胰腺炎组织的80点阵的组织芯片。利用免疫组化方法检测该组织芯片中Claudin-3的表达情况,探讨其与人胰腺癌病理因素的关系。结果 64例人胰腺癌组织中,Claudin-3阳性表达率是79.69%(51/64),与慢性胰腺炎相比,提示Claudin-3与胰腺癌相关(P<0.05);Claudin-3表达与性别、年龄、组织分化程度和肿瘤临床分期无相关性。结论胰腺癌与Claudin-3的阳性表达相关,这提示Claudin-3与人胰腺癌的发生发展存在紧密关系,但和胰腺癌的临床病理无相关。

Claudin-3在结直肠癌中的表达及意义

目的观察在结直肠癌组织中紧密连接蛋白claudin-3的表达,探讨claudin-3与结直肠癌发生、发展、转移及预后的关系。方法收集南方医院2010年10月~2013年1月间手术切除结直肠癌组织40例(癌组)及癌旁正常结直肠粘膜组织22例(癌旁正常组)。应用免疫组化法检测组织中claudin-3的表达水平。分析和比较癌组不同病理参数和不同存活情况病例间的claudin-3蛋白表达情况。结果 claudin-3蛋白的表达主要分布在细胞膜上。癌组阳性表达率为92.50%,显著高于癌旁正常组的59.09%(P<0.05)。13例来自同一患者的癌组织和癌旁正常组织的claudin-3表达平均评分(染色强度评分+阳性细胞所占比例评分)分别为4.538和3.269(P=0.019)。在40例癌组患者中,高分化组、中分化组、低分化组claudin-3的强阳性表达率分别为21.43%、36.84%和85.71%,其中高分化组与低分化组间及低分化组与中分化组间的差异均有统计学意义(P<0.05);淋巴结转移组claudin-3强阳性率为61.11%,显著高于无淋巴结转移组的22.72%(P<0.05);在不同年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤最长径的分组间,claudin-3强阳性表达率差异均无统计学意义(P>0.05)。随访癌组的40例患者,失访7例,术后生存期≤3年14例(死亡组),生存期>3年19例(存活组),两组claudin-3表达平均评分分别为4.50和3.526(P<0.05)。结论结直肠癌组织中claudin-3的表达显著升高,claudin-3的高强度表达可能促进了结直肠癌的发生及发展过程,并可能成为结直肠癌早期诊断及判断预后的分子生物学指标。

Snail与Claudin-3蛋白的表达与原发性肝癌发生及预后的关联性研究

目的本研究通过收集原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者的临床资料,并检测癌及癌旁组织中Claudin-3和Snail蛋白的表达,探讨Claudin-3和Snail蛋白与肝癌患者临床病理特征与预后的关联。方法收集根治性切除的肝细胞癌病例患者资料,利用免疫组织化学的方法检测82例HCC组织及60例癌旁组织中Snail、Claudin-3蛋白的表达。采用Kaplan-Meier法进行生存分析,应用Cox比例风险模型进行多因素回归分析。结果肝癌组织中Snail蛋白阳性表达69.47%,高于癌旁组织,差异有统计学意义(P=0.001);Claudin-3阳性表达47.61%,低于癌旁组织,差异有统计学意义(P=0.002);两者的表达呈负相关(r=-0.430,P<0.01);Snail蛋白在HCC中阳性表达明显高于癌旁组织,在病理分期、微血管侵犯相关方面差异有统计学意义(P<0.05);在Cox多因素回归分析中,Snail、Claudin-3的表达是HCC患者生存的独立危险因素(P<0.05)。结论Snail与Claudin-3蛋白与HCC的发生、侵袭有一定的关联性。进行HCC患者Snail、Claudin-3蛋白的联合检测,在临床实践中对HCC患者病理学特征与预后的判断具有重要的提示作用。

卵巢上皮性癌中Claudin-3和MT1-MMP基因的表达及其意义

目的:探讨Claudin-3和MT1-MMP在卵巢上皮性癌组织中的表达及其与预后的关系。方法:用免疫组化法测定卵巢上皮性癌72例、上皮性卵巢肿瘤20例和正常卵巢组织10例中Claudin-3和MT1-MMP的表达。结果:Claudin-3和MT1-MMP在正常卵巢组织中未见表达,在癌组织中的表达高于良性囊腺瘤的表达,卵巢上皮性癌中、低分化组的Claudin-3表达显著高于高分化组(P=0.001),有淋巴结转移组的Claudin-3表达显著高于无淋巴结转移组(P=0.001);MT1-MMP在晚期卵巢上皮性癌中的表达显著高于早期癌(P=0.011)。单因素分析,Claudin-3和MT1-MMP高表达组患者的平均生存时间显著低于低表达组(P=0.029)。结论:Claudin-3和MT1-MMP在卵巢上皮性癌的转移和浸润中起着重要作用,其高表达与不良预后有关。

Claudin-1、Claudin-3在胃癌组织中的表达及意义

应用免疫组织化学pv-9000(两步法)检测胃癌组织及健康胃组织中Claudin-1、Claudin-3的表达。结果与健康胃组织比较,胃癌组织中Claudin-1的表达降低,Claudin-3的表达升高;Claudin-1、Claudin-3在胃癌中的表达呈负相关(r=0.330,P<0.05)。提示Claudin-1、Claudin-3的检测对于胃癌预后的评估有重要价值。

丁酸钠对IPI-2I细胞中Claudin-3表达的影响

以IPI-2I为细胞模型,利用1.5mmol·L-1丁酸钠对IPI-2I细胞进行处理,通过CCK8检测、通路阻断技术、蛋白质免疫印迹和实时荧光定量试验,探讨丁酸钠对IPI-2I细胞Claudin-3表达的影响及调控信号通路情况。结果表明:1.5mmol·L-1丁酸钠可通过激活细胞的GPR109A受体和Akt信号通路以增加细胞中Claudin-3的表达量。

结直肠癌组织中Claudin-3的表达及临床病理意义

目的:探讨Claudin-3与结直肠癌的发生、浸润、转移之间的相关性。方法:收集笔者所在医院2016年9月-2017年6月结直肠癌组织(32例)、结直肠腺瘤组织(25例)及正常结直肠组织(25例),采用Westernblot检测各组织中Claudin-3的表达情况。结果:Claudin-3在结肠癌组的表达水平(0.91589±0.69015)明显高于结直肠腺瘤组(0.47748±0.33780)、正常结直肠组(0.20315±0.21827),差异均有统计学意义(P<0.05);伴有淋巴结转移组Claudin-3水平(1.29604±0.49018)显著高于无淋巴结转移组(0.48504±0.65092),差异有统计学意义(P<0.05);高分化组Claudin-3水平(0.13552±0.17606)低于中分化组(0.88125±0.67663),差异有统计学意义(P<0.05);中分化组Claudin-3水平(0.88125±0.67663)也低于低分化组(1.48591±0.37522),差异有统计学意义(P<0.05);而Claudin-3水平与患者年龄、性别及肿瘤大小、部位无关。结论:Claudin-3与结直肠癌的发生及分化程度、转移密切相关,而与患者年龄、性别及肿瘤大小、部位无关;Claudin-3有可能成为结直肠癌早期诊断的检测指标,并可能为临床治疗结直肠癌提供潜在的治疗靶点。

慢性脑低灌注致大鼠肠黏膜损伤及claudin-3表达变化的研究

目的观察慢性脑低灌注(CCH)大鼠回肠黏膜形态学及紧密连接蛋白claudin-3表达变化,并探讨两者的相关性。方法将80只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)和慢性脑低灌注组(CCH组),采用永久性双侧颈总动脉结扎法建立CCH大鼠模型,Sham组只分离双侧颈总动脉而不结扎。两组分别于造模成功后1、4、12及24 w取回肠末段组织制成石蜡切片,伊红-苏木素(HE)染色,观察肠黏膜组织形态学变化;免疫荧光标记claudin-3检测其表达量的变化;对肠黏膜损伤程度与claudin-3表达量进行相关性分析。结果 CCH组较同时间Sham组回肠黏膜损伤明显(P <0.01);CCH组4 w、12 w及24 w与1 w比较损伤显著加重(P <0.01)。CCH组上皮细胞间claudin-3明显缺失(P <0.01),1 w时最显著,4、12、24 w后逐渐回升,但均较同时间Sham组显著减少。肠黏膜损伤程度与claudin-3表达水平呈负相关(P <0.05)。结论 CCH可致大鼠回肠黏膜持续性损伤及claudin-3表达减少,引发相关肠功能异常。