CLK2 mRNA在早期鸡胚中的表达及定位分析

为探究早期鸡胚(孵化后约48 h内)中蛋白激酶CLK2 mRNA的表达特点及部位,用qPCR法测定早期鸡胚中CLK2 mRNA的表达,利用分子克隆技术重组CLK2/pMD18-T质粒,制作CLK2 mRNA原位杂交探针并以地高辛标记,进而通过原位杂交技术测定不同时期鸡胚中CLK2 mRNA的表达和分布。结果表明,早期鸡胚中CLK2 mRNA在各时期均有表达但表达量有所不同;原位杂交结果显示,在鸡胚发育的各个阶段,CLK2 mRNA的表达有所差异,且在各个部位其表达的量也各不相同,头部和尾部的表达最为集中。综上,CLK2 mRNA在鸡胚中存在且表达,其表达分布提示CLK2可能与其头部和神经系统的发育密切相关。

高强度耐力运动对食源性肥胖小鼠肝脏CLK2、PGC-1α和PPARα表达的影响

目的:研究高强度耐力运动对食源性肥胖小鼠肝脏蛋白CLK2、PGC-1α和PPARα的影响。方法:雄性4周龄C57BL/6J小鼠,先常规饲料适应性喂养1周,再通过8周高脂饲料喂养建立食源性肥胖小鼠模型,对照小鼠使用常规饲料喂养。肥胖小鼠经1周适应性跑台运动后进行高强度耐力跑台运动,对照小鼠不进行运动训练。运动训练进行8周后获取各组小鼠肝脏并称量肝脏质量;取部分肝脏组织进行HE染色,观察肝脏细胞形态,剩余肝脏组织通过Western Blot方法检测CLK2、PGC-1α和PPARα的表达情况并进行组间比较。结果:①食源性肥胖小鼠肝脏质量明显增加,肝细胞正常形态受到破坏;②高脂诱导能明显增加肝脏CLK2和PGC-1α表达,明显减少PPARα表达;③高强度耐力运动能有效减轻肥胖小鼠肝脏质量并恢复肝细胞正常形态;④高强度耐力运动能明显减少肥胖小鼠肝脏CLK2和PGC-1α表达,明显增加PPARα表达。结论:高强度耐力运动能够明显减少肝脏的脂质积累,改善肝脏脂质代谢情况。

CLK2的生物学功能及相关抑制剂的研究进展

蛋白质磷酸化和选择性剪接都是基因表达调控中的重要环节。CDC2样激酶蛋白(Cdc2-like kinases,CLKs)家族兼具上述两种调控功能。近年来,越来越多的研究聚焦于阐述该家族成员中CLK2的生物学功能。一方面,CLK2作为一种蛋白激酶直接参与细胞内多条重要信号通路的调控;另一方面,CLK2通过磷酸化剪接因子间接调控其他基因的表达,参与肥胖、神经系统疾病和恶性肿瘤等疾病的发生发展。本文总结了CLK2的生物学功能及相关抑制剂进展,表明CLK2具有作为多种疾病治疗靶点的巨大潜能。