黄瓜花叶病毒(CMV)亚组Ⅰ、Ⅱ分离物生物学特性比较研究

从福建、浙江、湖南、宁夏、安徽、山西、河南、河北、北京等省市采集并收集到16个黄瓜花叶病毒(CMV)样品,用亚组特异性抗血清以ELISA方法对这些样品进行了亚组鉴定。同时,选取亚组Ⅰ、Ⅱ病毒部分分离物进行了症状、致病性和体外稳定性比较研究。结果表明,亚组Ⅱ病毒分离物的症状和致病性受温度、湿度和光照强度等的调节,在不同环境条件下呈现复杂的寄主适应性变化,总的症状比较温和。我国收集的CMV样品以亚组Ⅰ为主,检出率占样品总数的75%。但由两亚组病毒生物学特性比较研究结果表明,亚组Ⅱ病毒在采样和检测中易于被忽略或丢失,据此,探讨了CMV亚组Ⅱ存在的生态意义及其样品检出率与田间实际发生率之间可能存在的较大差异。

黄瓜花叶病毒亚组Ⅰ和Ⅱ分离物外壳蛋白基因的序列分析与比较

对我国分离的经生物学和血清学鉴定为黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）亚组Ⅰ和Ⅱ的各一分离物（ＧＢ、ＸＢ）的外壳蛋白（ＣＰ）基因进行了序列分析和比较。以提纯病毒ＲＮＡ为模板，进行逆转录及ＰＣＲ扩增，并通过常规基因克隆方法得到插入ＣＰ基因片段的重组克隆。对插入ＧＢ和ＸＢ两个分离物ＣＰ基因片段的重组克隆进行全序列测定，结果表明重组克隆序列长分别为７７７ｂｐ和７９２ｂｐ，均只含一个开放读框（ＯＲＦ），长度为６５７ｎｔ，可编码２１８个氨基酸；两个分离物的ＣＰ基因核苷酸序列同源率为７７５％，氨基酸序列同源率为８２６％。与我国已报道的７个ＣＭＶ分离物的ＣＰ基因序列比较，分离物ＧＢ的同源率为９１３％～９７３％，分离物ＸＢ的同源率为７６６％～７８４％。与国际上已报道部分ＣＭＶ株系的ＣＰ基因序列相比较，分离物ＧＢ与亚组Ⅰ株系有更密切的亲缘关系，而分离物ＸＢ则与亚组Ⅱ株系的亲缘关系更密切。

蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白对CIA大鼠的治疗作用

目的:研究蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ)对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)模型大鼠的治疗作用,观察其治疗效果并探讨其作用机制。方法:90只Wistar大鼠除空白组外均采用牛CⅡ建立CIA模型并进行随机性分组,分为模型组、牛CⅡ组、蕲蛇水提液高、中、低剂量组、蕲蛇CⅡ高、中、低剂量组,每组10只。造模后第11 d开始给药,期间采用容积法测量关节肿胀程度,连续给药20 d后观察大鼠踝关节病理改变并采用流式细胞术检测大鼠外周血中CD4+T细胞、CD8+T细胞亚群水平。结果:与模型组相比,蕲蛇高、中剂量组、蕲蛇CⅡ高、中剂量组和牛CⅡ组均能显著降低CIA大鼠右后足跖肿胀程度、CD4+T细胞水平,改善大鼠踝关节病理形态,其中蕲蛇CⅡ中剂量组和牛CⅡ组还能显著降低CD4+/CD8+比值(P<0.05)。结论:蕲蛇水提液及蕲蛇CⅡ提取物对CIA大鼠关节炎症均有一定的治疗作用,其治疗机理可能是通过主动免疫抑制降低机体亢进的免疫应答实现的。

白血病患者化疗后应用白介素Ⅱ对T淋巴细胞亚群的影响

目的探讨白血病患者化疗后应用白介素II治疗对细胞免疫功能的影响及其临床意义。方法分为化疗加白介素II组(治疗组)和单纯化疗组(对照组),治疗组于化疗后毎天加用白介素II40万U静脉滴注,连用14d,检测化疗前及治疗后T淋巴细胞亚群的变化。结果治疗组化疗14d后CD3、CD4、CD56、CD4/CD8比值明显高于本组化疗前及对照组化疗后水平。结论化疗后应用白介素II能明显提高患者T淋巴细胞亚群的水平,对提高机体的免疫功能有积极的意义。

辣椒CMV广州分离物的CP基因序列分析及亚组鉴定

从广州市呈现花叶病症的辣椒上分离纯化得到1个黄瓜花叶病毒的分离物(CMV-GZ)。利用RT-PCR技术克隆了该病毒分离物的外壳蛋白(CP)基因,其序列长度为657 bp,编码218个氨基酸。对CP基因序列进行同源性比较分析,结果表明该病毒分离物的CP基因与CMV亚组Ⅰ5个株系的同源性均在90%以上,而与亚组Ⅱ4个株系的同源性均低于80%。据此将该分离物归属于CMV亚组Ⅰ。

高频振荡通气治疗新生儿Ⅱ型呼吸衰竭27例分析

目的总结高频振荡通气(high-frequency oscillatory ventilation,HFOV)治疗新生儿Ⅱ型呼吸衰竭的疗效。方法比较我院收治的经CMV治疗失败的Ⅱ型呼吸衰竭患儿(共27例)接受HFOV治疗前后PacO2、FiO2、OI的差异。结果HFOV治疗24h后PaCO2、FiO2、OI与治疗前比较均明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论HFOV能有效改善通气及氧合,可作为新生儿Ⅱ型呼衰CMV治疗失败的补救方法。

基于生存资料探讨Ⅱ/Ⅲ期无缝设计靶向人群选择策略研究

目的尽管对临床试验的数据进行事后分析可以鉴别出有意义的亚组人群,但是,这往往需要额外的验证性试验,导致研发周期延长,成本增加。据此,本文提出在无缝试验的设计阶段既考虑全人群效应也考虑亚组效应,并对该试验设计方案的统计学性质(I类错误,检验效能)进行评价。方法采用两阶段无缝设计的思想,在一阶段结束后同时对替代指标无进展生存期及主要研究总生存期指标进行期中分析,判断是只有亚组、只有全人群或两者均进入下一阶段的研究。二阶段结束后,采用Fisher法合并两个阶段的信息对主要研究指标OS进行最终的分析。结果观察OS与PFS不同相关程度下对总I类错误的影响,结果显示I类错误均能控制在0.025以内;不同情境下做出正确选择的概率均较高,试验结果与现实接近。结论在肿瘤临床试验中,若事先已存在某个亚组人群疗效更好的假设,且能通过一定的方法筛选出这些亚组人群,则可采用本文提出的试验设计方案,达到缩短临床试验周期、降低研究成本的目的。

侵染万寿菊的黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因的克隆与序列分析

应用ELISA的方法检测到感染了黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的万寿菊。根据已报道的CMV外壳蛋白(CP)基因的保守序列设计并合成引物,提取万寿菊叶片总RNA为模板,进行cDNA合成和PCR扩增,得到约875bp的片断,与预期片断大小相符。序列分析显示:该分离物CMV-WSJ CP基因全长657bp,编码218个氨基酸,其核苷酸和氨基酸序列与CMV亚组Ⅱ的分离物有很高的同源率,分别达到98.33%～99.24%和98.63%～100%;与CMV亚组I分离物的同源率分别仅为74.43%～76.26%和77.17%～78.99%。因此,从万寿菊叶片上检测出的黄瓜花叶病毒分离物CMV-WSJ应归属于亚组Ⅱ。

中国番茄黄瓜花叶病毒血清组的鉴定

来自我国番茄主产区的 58个黄瓜花叶病毒 (CMV)分离物包含有轻花叶株系、重花叶株系、坏死株系和黄化株系。用分别代表CMV亚组Ⅰ和CMV亚组Ⅱ的两个标准毒株CMV -D和CMV -S的抗血清进行DAS -ELISA鉴定 ,有 56个CMV分离物与CMV -D的抗血清起强烈的阳性反应 ,划归为CMV亚组Ⅰ ,占CMV分离物总数的 96.6% ;有两个CMV分离物与CMV -S的抗血清起强烈的阳性反应 ,划归为CMV亚组Ⅱ ,占CMV分离物总数的 3.4 % ,这是首次从侵染我国番茄CMV中鉴定出属于CMV亚组Ⅱ的分离物。属于CMV亚组Ⅱ的两个分离物 (GD - 14和HN - 11)均为黄化株系。

黄瓜花叶病毒研究进展

介绍了近年来对黄瓜花叶病毒 (CMV)在生物学特性、血清学特性、基因组研究、卫星 RNA以及该病毒的防治等方面的最新研究进展 .此外 ,由于黄瓜花叶病毒株系众多 ,其株系的划分和分类对研究致病机理和各个株系之间的关系具有重要的作用 ,重点介绍了根据生物学。

海南黄灯笼辣椒顶死病病原病毒的分离鉴定

从海南省黄灯笼辣椒顶死病株上分离纯化得到一个病毒分离物。研究结果表明,该病毒分离物能通过汁液磨擦接种侵染供试植物中的4科11种植物,可由桃蚜传播;提纯病毒粒子呈球形,直径28￣30nm,外壳蛋白分子量约为28ku;分离物与CMV抗血清在ELISA测定中呈阳性反应;提取病毒分离物RNA,应用RT-PCR方法克隆了病毒外壳蛋白(CP)基因。CP基因675bp,编码218个氨基酸。对CP基因序列分析表明,该病毒分离物的CP基因核苷酸序列与黄瓜花叶病毒亚组Ⅰ分离物的同源性均在92.1%以上,所推导的氨基酸序列同源性在96.3%以上,而与亚组Ⅱ分离物的核苷酸序列同源性均低于77.3%,所推导的氨基酸序列同源性均低于80.7%。据此将该病毒分离物鉴定为黄瓜花叶病毒,归属于亚组Ⅰ。

重庆地区马铃薯上黄瓜花叶病毒的检测及亚组鉴定

采用抗原直接包被ELISA对采自重庆11个马铃薯主产区的259份马铃薯病毒病样品进行了黄瓜花叶病毒Cucumber mosaic virus,CMV的检测及亚组鉴定.共有233份样品检测到CMV,总检出率达91.60%;其中属CMVⅠ亚组的样品为197份,占84.55%;另36份样品为CMVⅡ亚组侵染,占15.45%;未检测到CMVⅠ和CMVⅡ的复合侵染.这些结果表明,CMVⅠ是重庆地区马铃薯上的优势CMV亚组类型.

侵染西番莲属(Passiflora)植物的五个黄瓜花叶病毒分离物的特性比较

从紫果西番莲（Ｐａｓｉｆｌｏｒａｅｄｕｌｉｓ）、杂交种西番莲（Ｐ．ｅｄｕｌｉｓＸＰ．ｅｄｕｌｉｓｖａｒ．ｆｌａｖｉｃａｒｐａ）、黄果西番莲（Ｐ．ｅｄｕｌｉｓｖａｒ．ｆｌａｖｉｃａｒｐａ）、转心莲（Ｐ．ｃａｅｒｕｌｅａ）及龙珠果（Ｐ．ｆｏｅｔｉｄａ）分离到的５个黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）分离物（ＰＥ、ＰＥ２、ＰＥｆ、ＰＣ、ＰＦ）所作的生物学性质、理化特性和血清学关系的比较研究结果表明，５个分离物在寄主反应及血清学性质上存在不同，而在病毒粒体形态、体外抗性、蚜虫传毒和病毒外壳蛋白分子量方面无明显差异。根据５个分离物的寄主反应和血清学关系，可将其区分为ＣＭＶ的两个亚组，其中ＰＥ、ＰＥ２、ＰＣ和ＰＦ属ＣＭＶ亚组Ｉ，ＰＥｆ属ＣＭＶ亚组Ｉ。

脊柱侧弯患者咬合特点的研究

目的:通过分析脊柱侧弯患者错畸形的特点,探讨脊柱侧弯与错畸形的相关性。方法:以106例平均年龄16.2岁的脊柱侧弯患者和152例平均年龄15.3岁的身体姿势正常的人群为研究对象,通过口腔正畸专科检查,了解两组人群错畸形发生情况并分析其特点;用卡方检验来比较脊柱侧弯人群与正常人群错畸形有无差异性。结果:脊柱侧弯组磨牙关系不对称、尖牙关系不对称、上中线偏斜、下中线偏斜、单侧后牙反、前牙深覆、平面倾斜的发生率明显大于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。脊柱侧弯组人群磨牙关系分布与对照组相比,安氏Ⅱ类亚类所占比例更大(P<0.05)。结论:脊柱侧弯患者左右不对称性的错畸形发病率较高,脊柱形态和身体姿势与颌位关系之间存在一定的内在联系。

黄瓜花叶病毒山东分离物外壳蛋白基因的克隆及序列分析

对侵染烟草的黄瓜花叶病毒(CMV)山东分离物(SD1)的外壳蛋白(CP)基因进行克隆和序列分析.根据已报道的黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因序列合成两条寡聚核苷酸引物,用免疫捕捉PCR的方法对黄瓜花叶病毒的外壳蛋白基因进行了扩增.将所得的PCR产物通过T4DNA连接酶连接到pET-22b(+)载体上,并转化大肠杆菌DH5a.序列分析表明:CMV-SD1的CP基因全长657bp,编码218个氨基酸;其核苷酸序列与黄瓜花叶病毒亚组Ⅰ的分离物有极高的同源性,达92.7%～94.9%;与亚组Ⅱ的同源性仅为59.3%～59.5%;由此将CMV-SD1分离物归属于CMV亚组Ⅰ.

125例基层医院老年社区获得性肺炎患者住院期间死亡影响因素分析

目的评价基层医院老年社区获得性肺炎(community acquired pneumonia,CAP)患者住院期间死亡相关影响因素。方法收集2012年1月至2015年4月间上海市徐汇区大华医院呼吸内科住院治疗的老年CAP患者125例,按出院时生存情况分为死亡组(19例)和生存组(106例)。分析比较两组患者的一般资料(年龄、基础疾病合并情况、体质指数、血红蛋白水平、血清白蛋白水平、T细胞亚组)和肺炎严重度(PSI、CURB-65和APACHEⅡ评分),并进行统计学分析。结果与生存组相比,死亡组年龄较大,体质指数、血红蛋白水平及血清白蛋白水平显著偏低,CD3+T细胞计数、CD4+T细胞计数及CD8+T细胞计数显著减少,肺炎严重度评分(PSI评分、CURB-65评分和APACHEⅡ评分)显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05),且与死亡显著相关(P<0.01),基础疾病合并情况及CD4+/CD8+与死亡不相关(P>0.05)。老年CAP患者年龄与血红蛋白水平、血清白蛋白水平呈显著负相关,与PSI评分、CURB-65评分和APACHEⅡ评分显著正相关(P<0.01),与CD3+T细胞计数和CD4+T细胞计数不相关。血红蛋白水平、血清白蛋白水平与PSI评分、CURB-65评分、APACHEⅡ评分显著负相关,血清白蛋白水平与CD3+T细胞计数及CD4+T细胞计数显著正相关(P<0.01),血红蛋白水平与CD3+T细胞计数及CD4+T细胞计数正相关(P<0.05)。CD3+T细胞计数和CD4+T细胞计数与PSI评分及APACHEⅡ评分显著负相关(P<0.01),CD3+T细胞计数与CURB-65评分负相关(P<0.05),CD4+T细胞计数与CURB-65评分不相关(P>0.05)。体质指数与死亡负相关(P<0.05)。结论高龄、营养不良、免疫功能受损、肺炎病情重是老年CAP患者住院死亡的影响因素,应给予高度关注。积极抗感染等对症治疗,努力改善患者营养状况,调节免疫力等措施对降低老年CAP患者住院死亡率至关重要。

鲁粤两省黄瓜花叶病毒辣椒分离物CP基因序列分析及亚组鉴定

从广东和山东呈现花叶病症的辣椒上分离纯化得到2个黄瓜花叶病毒Cucumber mosaic virus(CMV)的分离物.利用RT-PCR技术克隆了病毒分离物的外壳蛋白(CP)基因.核苷酸序列测定表明,CMV-GDLJ和CMV-SDLJ 2个病毒分离物CP基因序列长度为657bp,编码218个氨基酸.2个病毒分离物的CP基因序列与CMV亚组Ⅰ的6个株系CP基因序列同源性均在90%以上,而与亚组Ⅱ的3个株系同源性均低于80%,据此将分离物CMV-GD和CMV-TA归属于CMV亚组Ⅰ.

菲律宾引种香蕉花叶病毒的鉴定

根据病毒生物学特性、粒体形态和血清学性质，明确在厦门地区种植的菲律宾引种香蕉（Ｍｕｓａｓｐ．）表现花叶症状病株上分离的一个病毒分离物是属于黄瓜花叶病毒（Ｃｕｃｕｍｈｅｒｍｏｓａｉｃｃｕｃｕｍｏｖｉｒｕｓ，ＣＭＶ）亚组Ⅱ。该分离物能通过摩擦接种侵染供试１１科５２种（或品种）植物中的１０科４７种（或品种）；能够由棉蚜（Ａｐｈｉｓｇｏｓｓｙｐｉｉ）传播；失毒温度为５０～５５℃，稀释终点为１０￣（－３）～１０￣（－４），体外存活期为２４～４８ｈ。提纯病毒粒体为球状，直径约２８～３０ｎｍ。用该分离物提纯病毒免疫家兔制备的抗血清，经琼脂双扩散方法测定效价为１：６４。用法国提供的ＣＭＶ单克隆抗体，经双抗体夹心ＥＬＩＳＡ（ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ）测定，该分离物与ＴｏＲＳ血清组（亚组Ⅱ）的单克隆抗体具有强阳性反应。