TMV和CMV病毒外壳蛋白基因双靶向的RNA干涉载体构建

依据RNA干扰机制构建多病毒基因靶向的RNA干涉双元载体系统,为培育抗病毒复合侵染的番茄品种提供遗传转化载体。以烟草病毒病(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)病毒外壳蛋白基因作为RNA干扰靶标基因,针对病毒株系间外壳蛋白基因同源区域设计靶序列引物,经RT-PCR获得两段靶标基因的DNA靶序列。借助T载体将两段靶序列连接成一条DNA序列。酶切后正向、反向锚定连接到p UCCRNAi中间载体的克隆位点,形成靶序列在载体中的双向重复结构;重复结构酶切后插入含超强启动子的p C2300-35s-OCS表达载体,重组的表达载体质粒电击转化到只含辅助质粒的根癌农杆菌中,完成RNAi双元载体系统的构建。

中国献血人群感染巨细胞病毒CMV的分子流行病学调查

目的了解中国献血人群中巨细胞病毒（CMV）的感染情况,应用Q-PCR方法对中国部分地区健康献血人群CMV感染情况进行分子流行病学调查,并检测病毒载量及抗体。方法构建荧光定量PCR检测体系,调查在2014年1月—2015年2月来自乌鲁木齐、柳州、洛阳、重庆、绵阳5个地区,3 794人份献血者血浆标本中CMV的DNA流行率,并测定CMV阳性标本的病毒载量;同时随机抽取5个地区标本292（人）份,用ELISA法检测抗-Ig G和-Ig M的流行情况。结果本研究建立的Q-PCR方法对CMV的检测下限为5×10^1copies/mL。在5个地区的健康献血人群中,共发现6份标本为CMV核酸阳性,DNA阳性率占0.16%（6/3794）。CMV的抗-IgG阳性率37.3%（109/292）,抗-IgM阳性率为8.9%（26/292）,抗-IgG和-IgM双阳性率为1.71%（5/292）。结论在本次研究中,巨细胞病毒CMV在我国5个地区献血人群中的核酸流行率处于一个较低的水平,检出的CMV病毒载量均在10^3copies/mL以下,由于CMV在免疫正常的个体中为无症状感染,是否需要对免疫力较低下的受血者输血前进行血液中CMV的检测值得进一步探讨。

辣(甜)椒抗黄瓜花叶病毒(CMV)研究进展

黄瓜花叶病毒病(CMV)是为害辣(甜)椒的重要病毒,国内外对其研究较多。通过综述CMV的株系分化、抗性遗传、分子标记、抗CMV基因工程以及抗CMV育种等方面的研究结果和报道,旨在为辣(甜)椒抗CMV育种提供参考依据。

小婴儿巨细胞病毒(CMV)感染的临床特点及诊治

目的:探讨小婴儿巨细胞病毒(CMV)感染的临床特点及治疗效果。方法:选取2015年3月至2017年5月本院收治的20例CMV感染婴儿的临床资料进行回顾性分析,随机分为两组,治疗组10例,对照组10例,分析两组的治疗效果。结果:在20例患儿中先天性感染的患儿有6例,围生期感染的患儿有10例,出生后感染的患儿有4例,通过检查发现,通过有效治疗手段,其总有效率达到90.00%,而通过辅助治疗后得到的有效率为70.00%,两组差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:为了预防新生儿感染CMV病毒,为早期治疗做准备,需要对新生儿进行HCMV感染筛查,儿科医生需要加强专业素质和能力,为了防止或减少感染者的死亡率,需要对本病熟知,并进行早期的发现、诊断和治疗。

体外膜肺氧合救治移植肾合并耶氏肺孢子菌巨细胞病毒及烟曲霉感染致重度ARDS患者1例

本文回顾性分析1例肾移植术后五年出现肺部耶氏肺孢子菌(PJP)、巨细胞病毒(CMV)和烟曲霉(aspergillus fumigatus)三种病原菌感染致重度急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者的诊疗经过,经予以肺保护性通气策略、静脉-静脉体外膜肺氧合(VV-ECMO)联合连续肾脏替代治疗(CRRT)等综合治疗,患者最终得以康复且肺肾双保。对于肾移植术后并发PJP、CMV和烟曲霉中一种或多种致病菌所致重度ARDS患者,ECMO可作为其他治疗方案无效下的有效治疗手段。

茉莉酸甲酯对藜感染黄瓜花叶病毒后的生理影响

[目的]探究茉莉酸甲酯(MeJA)对黄瓜花叶病毒介导藜的抗病生理反应的影响。[方法]采用MeJA及其抑制剂没食子酸丙酯(PG)预处理藜叶片后,分别接种黄瓜花叶病毒(CMV),并于接种0、1、3、5、7、9d后测定其叶中H_2O_2质量分数、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性等生理指标的变化。[结果]与对照相比,MeJA处理的接种藜叶POD活性前期降低,中后期逐渐升高,CAT、SOD活力与POD相反。接种CMV后,MeJA能提高相关抗氧化物酶的活性,其抑制剂PG处理后对MeJA所调控的氧化酶活性具有一定的抑制作用。[结论]MeJA对藜抗CMV有一定的促进作用。

新生儿巨细胞病毒（CMV）病毒载量与听力丧失危险性有关

据Medscape．com7月4日报道（原载J Pediatr 2005：146：817-823），无症状先天性巨细胞病毒感染的儿童在婴儿早期，其尿液和外周血中病毒含量增高与进行性感觉神经性听力丧失（SNHL）发生风险增高有关。

秦巴山区孕期巨细胞病毒感染状况分析

目的 研究弱智高发区巨细胞病毒 (CMV)感染流行病学状况。方法 用ELISA和PCR方法对弱智高发区的 36 7例孕妇进行监测及问卷调查 ,并监测 6 3例孕期CMV感染者 2两周内母体乳汁CMV -DNA。结果 弱智高发区孕期CMV活动性感染率 19 6 2 %,宫内传播率 33 33%,产后乳汁排泄率 39 0 2 %;孕期CMV感染与年龄、文化程度、经济状况、胎次及病理性生产史有关 ,与孕周无关。结论 提示在弱智高发区也应重视CMV的监测 ,文化程度低、经济状况差、胎次及有病理性生产史者 ,应视为孕期CMV感染的高危因素。

辣椒抗CMV种质资源筛选及SRAP分析

以收集的283份辣椒种质为试材,采用人工接种方法进行CMV抗性鉴定,在抗性筛选基础上进一步对鉴定出的抗性种质进行分子遗传多样性分析,以期为辣椒抗CMV相关育种的亲本选择选配、抗性遗传改良等提供指导。结果表明:从283份辣椒种质中筛选出抗CMV辣椒种质1份、中抗CMV辣椒种质28份,为辣椒抗CMV育种提供物质材料;SRAP分析将抗性辣椒种质分为两大类,明确了29份辣椒种质的遗传关系。

WRKY转录因子在烟草受CMV侵染和激素处理中的表达模式初步分析

WRKY转录因子在调控植物抵抗病原菌的侵染中发挥重要作用,但是,目前为止还没有WRKY转录因子在烟草抗CMV中调控机理的研究。本研究检测了感病品种‘K326’和抗病品种‘TT8’在接种CMV后其WRKY1、WRKY2、WRKY4和WRKY11的表达情况。结果显示,CMV侵染后‘TT8’中4个WRKY转录因子表达量均有大幅上升;而‘K326’中WRKY2、WRKY4和WRKY11的表达量与CMV侵染前无显著差异,WRKY1表达量则大幅下降。幼苗经外源激素(水杨酸、茉莉素、乙烯)处理后用RT-PCR检测,结果表明,‘K326’和‘TT8’中WRKY转录因子对外源激素的诱导响应比较复杂多样,但总体表现为在‘TT8’中WRKY1、WRKY2和WRKY4会受到乙烯和茉莉酸的诱导,但在‘K326’中转录因子的表达未受明显诱导。

感染病毒的烟草对烟蚜种群及蜜露排泄的影响

研究了感染CMV,PVY后的烟草对介体烟蚜的种群及蜜露排泄的影响。结果表明,PVY病株有助于介体烟蚜种群数量的增长;CMV病株在接蚜初期,不利于烟蚜若蚜的存活与发育,但到后期种群数量与健株之间无明显差异。24 h内,以PVY病株上烟蚜的蜜露排泄量最大,健株次之;CMV病株最少。

云南食用百合病毒病的发生与检测

通过田间调查、血清学技术、电镜技术、RT-PCR技术对侵染云南食用百合的主要病毒进行调查和研究,结果表明,食用百合病毒病的症状类型多为花叶,斑驳或者无症等类型。病毒种类主要是黄瓜花叶病毒(CMV),百合无症病毒(LSV)和百合斑驳病毒(LMoV)。其中通过ELISA检测,CMV的检出率达到53.3%,LSV的检出率达到46.7%;通过RT-PCR检测,CMV的检出率达到60%,LSV的检出率达到50%,LMoV的检出率达到30%。

春季西葫芦日光温室黄瓜花叶病毒病发生规律与防虫网的防控效果

为探明西葫芦日光温室中黄瓜花叶病毒病发生规律和防虫网隔离瓜蚜对该病毒病的防控效果,于2014、2015年在山东济南地区开展田间定点调查和室内PCR检测试验。结果表明,在春季日光温室西葫芦生长期,西葫芦带毒植株4月中旬开始出现,之后带毒率逐渐上升,5月下旬达30%左右。黄瓜花叶病毒病的发生与瓜蚜密度密切相关,瓜蚜密度达到一定程度后,出现西葫芦带毒植株,瓜蚜进入迅速增长期后,西葫芦带毒株率亦呈上升趋势;春季日光温室中带毒瓜蚜在4月中旬开始出现,而后带毒率呈逐渐上升趋势,5月下旬达36.11%~45.56%。西葫芦生长期用100目防虫网隔离可降低西葫芦植株带毒率。该研究能为日光温室西葫芦病毒病科学防控提供理论依据。

抗巨细胞病毒药物-更昔洛韦

第二代抗巨细胞病毒药物更昔洛韦 (GCV)比阿昔洛韦 (ACV )具有更强更广谱的抗病毒作用 ,是高效、低毒、选择性强的病毒抑制剂 ,对人体 6种疱疹病毒感染均有很强的抑制活性 ,已作为抗艾滋病并发致盲性巨细胞病毒 (CMV )感染的一线药物 ;本文综述了抗巨细胞病毒药物更昔洛韦的国内外发展动态 ,药理作用及临床应用 ,文献合成方法以及市场应用前景。

植物与黄瓜花叶病毒互作的研究

植物对病原物的抗性包括由单基因控制的质量抗病性和由多基因控制的数量抗病性两种。作物对黄瓜花叶病毒病(CMV)的抗病性属于数量抗病性,即有多个微效抗性基因同时起作用控制黄瓜花叶病毒病的感染,其中研究最精细的是其数量主基因RCY1,该基因位于拟南芥5号染色体,编码一套具有卷曲螺旋-核苷酸结合位点-富含亮氨酸重复序列(CCNBLRR)结构的抗性蛋白;黄瓜花叶病毒病的外壳蛋白基因与RCY1基因共同作用决定作物对黄瓜花叶病毒病的抗性反应。但是在其它的互作体系中,可能存在另外的诱发子和抗性基因,到目前为止尚无定论。

系统性红斑狼疮与巨细胞病毒感染的关系探讨

目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者与巨细胞病毒(CMV)感染的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法检测患者血清中的CMV—IgM和IgG。结果:SLE患者组血清和对照组血清的CMV抗体总阳性率分别为80.0%(40/50)和30.0%(18/60)。两组比较,差异有非常显著性意义(字2=27.354,P<0.001)。结论:SLE患者与CMV的感染关系密切。CMV的感染有可能是SLE患者发病的因素之一。

巨细胞病毒检测与鉴定研究进展

巨细胞病毒 (CMV)多引起潜伏感染 ,而且其所致疾病的临床表现多为非特异性的 ,因此 ,建立早期快速、灵敏特异、可靠的检测和鉴定方法是至关重要的。本文从细胞培养、病毒抗原血症的检测、特异性抗体的检测和病毒核酸的检测四个方面就近年来CMV的检测和鉴定方法研究进展进行了简要的概述。

苦参碱注射液对婴儿巨细胞病毒性肝炎患者肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响

目的苦参碱注射液对婴儿巨细胞病毒性肝炎患者肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。方法将42例婴儿巨细胞病毒（CMV）肝炎患儿随机分为苦参碱治疗组（n=22）与更昔洛韦对照组（n=20）。两组均予以常规保肝降酶治疗为基础。苦参碱治疗组用苦参碱注射液20-25mg/d静脉滴注,每日1次,连用14天;间隔7-10天后20-25mg/kg.d静脉滴注,每日1次,连用5天,共2-3个疗程。更昔洛韦对照组用更昔洛韦5mg/kg.d静脉滴注,每日2次,连用14天;间隔7-10天后5mg/kg.d静脉滴注,每日1次,连用5天,共2-3个疗程。观察两组TNF-α水平变化。结果治疗前、后苦参碱注射液对血TNF-α、TBIL、ALT的变化。（P〈0.01）。结论苦参碱注射液治疗婴儿巨细胞病毒性肝炎疗效确切,可能与抑制TNF-α释放有关。

中药“金叶败毒制剂”对巨细胞病毒体外抑制作用的研究

目的 研究中药“金叶败毒制剂”对人巨细胞病毒 (humancytomegalovirus ,CMV)的抗病毒效应 ,探讨该药对体外培养的人胚肺细胞 (Humanembryolungcell,HEL)的周期调节作用与凋亡作用。方法 以体外培养的HEL为靶细胞 ,使用不同浓度的“金叶败毒制剂”作用于AD16 9株感染的HEL ,用四唑盐 (methylthiazolyltetrazolium ,MTT)法检测细胞损伤程度 ;流式细胞仪 (flowcytometer,FCM)检测不同浓度的“金叶败毒制剂”对体外培养的HEL细胞的周期调节作用与凋亡作用。结果 “金叶败毒制剂”在 6 g/L时即有显著的抗病毒效应 ,是理想的抗CMV中药 ;不同浓度中药“金叶败毒制剂”有一定的促进细胞凋亡作用 ,中药“金叶败毒制剂”2 5 g/L促进细胞凋亡作用尤其明显。结论 “金叶败毒制剂”是一种较为理想的抗CMV的中药 ,可不同程度地促进细胞发生凋亡。

更昔洛韦治疗新生儿先天性巨细胞病毒感染的临床研究

目的:观察并分析更昔洛韦(GCV)治疗新生儿先天性巨细胞病毒(CMV)感染的临床效果和副作用,为临床安全用药提供指导。方法:根据患儿家长意愿将我院在2004年2月至2012年2月收治的50例先天性巨细胞病毒感染患儿分为两组;对照组(n=25)患儿给予丙种球蛋白、清蛋白、蓝光照射以及茵栀黄退黄等对症支持治疗,观察组(n=25)患儿在对照组的基础上给予GCV,7.5 mg·kg-1·次-1,1次/12 h,静脉滴注,诱导治疗2周,而后采用维持治疗10 mg·kg-1·次-1,3 d/周,根据患儿实际情况,坚持治疗2-3个月;对比分析两组患儿的临床疗效和副作用。结果:①临床疗效:在临床表现、病原学检查转阴率等方面,观察组患儿的表现要明显优于对照组(P<0.001),具有统计学意义;②转归方面:经过治疗之后,观察组患儿治愈21例,显效4例,对照组患儿有效9例,无效16例,两组患儿在转归方面的差异显著(P<0.001),具有统计学意义;③副作用:两组患儿均没有发现明显的肝、肾功能损伤情况;观察组患儿在治疗期间出现了不良反应,经过停用GCV 3-10 d或者对症处理之后不良反应消失;此外,两组患者均没有发现其他不良反应。结论:更昔洛韦(GCV)在新生儿先天性巨细胞病毒(CMV)感染方面有着优秀的临床疗效,为治疗CMV的首选药物,但是由于GCV在治疗过程中有一定的副作用,需要进行必要的副作用监测,确保用药安全。