酵母双杂交方法对牛CMYA1中Xin Repeat结构域的鉴定

CMYA1是肌肉生长发育相关基因,其表达产物包含若干个由16个氨基酸构成的重复序列,该重复序列被命名为Xin Repeat。为确定CMYA1的蛋白结合核心结构域,本研究利用酵母双杂交方法,以牛CMYA1基因的表达产物中含有Xin Repeat的区域作为预测结构域,通过对该区域的不同区段进行克隆建立酵母诱饵表达载体,并转化酵母菌,再与CMYA1的互作蛋白EIF3G和RPL35A进行酵母双杂交。结果表明,共获得了6个不同区段的CMYA1片段,并确定了4个Xin Repeat序列是蛋白结合结构域的最小功能单位。本研究结果有助于揭示CMYA1结构及Xin Repeat的功能,为进一步研究牛肌肉生长发育的分子机制提供理论依据。

猪原发性心肌症相关蛋白1基因的多态性分析

原发性心肌症相关蛋白1(Cardiomyopathy-associated protein 1,CMYA1)基因是在横纹肌(骨骼肌)上特异表达的基因。猪CMYA1基因被认为是与背膘厚有关的QTL。本研究以猪CMYA1基因上存在的3个错义突变c.1394A>G(p.His465Arg)、c.1751A>G(p.Asp582Gly)和c.3290C>A(p.Thr1097Asp)为研究对象,利用PCR-RFLP方法分析其在大白、丹系长白、法系长白和北京黑猪4个群体中的分布情况。结果表明,在所检测的3个多态位点,各基因型在品种间的分布都存在显著差异(P<0.05);c.1394A>G和c.1751A>G都为中度多态位点(0.25<PIC<0.5),c.1394A>G位点基因型在4个群体中的分布都符合Hardy-Weinberg平衡定律;序列分析表明c.1394A>G和c.1751A>G变异位点紧邻CMYA1蛋白的肌动蛋白结合域,并且c.1751A>G位点在人、猪、狗、牛、猕猴、小鼠等物种中高度保守。研究结果为进一步通过相关性分析揭示CMYA1基因变异与生长和胴体性状的相关性提供依据。