中药臭灵丹中3,5-二羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮对人鼻咽癌CNE细胞凋亡的影响及机制

中药臭灵丹中黄酮类化合物3,5-二羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮(3,5-hydroxy-6,7,3′,4′-tetramethoxyflavone,HTMF)体外对多种肿瘤细胞有抑增殖作用,但机制尚未完全清楚.为探讨HTMF对人鼻咽癌CNE细胞凋亡的影响,用MTT法检测HTMF对CNE细胞株的增殖抑制率,倒置显微镜观察HTMF作用于CNE细胞后细胞形态变化,Hoechst 33258荧光染色观察细胞核形态的变化,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,Western blot法检测凋亡蛋白Caspase3和Caspase9的变化,流式细胞仪检测线粒体跨膜电位(△准m)值的改变,并用JC-1荧光染料染色,激光共聚焦显微镜观察线粒体膜电位变化.结果显示,分离自臭灵丹的HTMF呈浓度、时间双重依赖性显著抑制CNE细胞的增殖,诱导细胞凋亡,引起线粒体膜电位下降及凋亡蛋白Caspase3和Caspase9的活化.提示:3,5-二羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮对人鼻咽癌CNE细胞的生长有显著的抑制作用,并可通过降低线粒体膜电位激活Caspase9,进而活化Caspase3诱导CNE细胞凋亡.

参杞合剂对人鼻咽癌细胞CNE细胞周期及凋亡的影响

目的研究参杞合剂(SQ)在体外对CNE细胞周期及凋亡的影响。方法应用MTT法观察参杞合剂对细胞的抑制作用,流式细胞术观察不同浓度参杞合剂作用不同时间后CNE细胞周期的改变,电镜结合DNA电泳分析参杞合剂诱导凋亡的作用。结果SQ对CNE细胞生长有明显抑制作用,且其作用强度呈现出对浓度和时间的依赖性。CNE细胞在SQ作用下随着时间的延长和浓度的增加,G0/G1期比率下降,S期比率升高,出现S期阻滞。0.0625 g.生药/ml的SQ作用48 h后诱导出凋亡,凋亡率随着浓度的增加、时间的延长而增加,电镜下可见典型凋亡小体。琼脂糖凝胶电泳呈现出凋亡特征性的DNA条带。结论参杞合剂可直接杀伤肿瘤细胞,其机制可能通过阻滞细胞周期S期,诱导肿瘤细胞凋亡实现的。

5-杂氮-2′-脱氧胞苷抑制人鼻咽癌CNE细胞生长的机制

目的探讨5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)抑制人鼻咽癌CNE细胞系生长增殖的机制,寻找鼻咽癌治疗的新靶点。方法用5-Aza-CdR处理人鼻咽癌CNE细胞,应用MTT试验观察不同浓度的5-Aza-CdR对癌细胞生长增殖的影响。用甲基化特异性PCR(MSP)分析死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因甲基化状态;逆转录聚合酶链反应、免疫细胞化学、流式细胞仪检测用药前后DAPK mRNA、蛋白的表达情况及细胞凋亡和细胞周期的变化。结果从CNE细胞生长曲线知各浓度的5-Aza-CdR对细胞生长均有抑制作用。未经5-Aza-CdR处理的CNE细胞中DAPK基因CpG岛过甲基化,且DAPK mRNA不表达。经5-Aza-CdR处理后,甲基化的DAPK基因部分去甲基化,用药组的细胞中均有DAPK mRNA表达,且表达随药物浓度增高而增强。免疫细胞化学结果显示,经药物处理后的CNE细胞中DAPK蛋白表达呈阳性,而对照组不表达。流式细胞分析结果显示,药物处理后细胞凋亡率明显增加,且G0/G1期细胞增加,G2/M期减少。结论5-Aza-CdR对体外培养的鼻咽癌细胞生长增殖的抑制作用,可能是由于其能使因甲基化而失活的DAPK基因再转录,诱导该基因重新表达的结果。

青蒿琥酯及其与放疗联用对CNE细胞的作用

目的研究青蒿琥酯及其与放疗联用对鼻咽癌CNE细胞增殖和凋亡的影响。方法采用细胞集落计数法和原位末端标记（TUNEL）法，测定单用青蒿琥酯及其与放疗联用对CNE细胞增殖的抑制作用和对凋亡的诱导。结果青蒿琥酯能够抑制CNE细胞增殖，并呈现明显的剂量效应，药物浓度2．5～50μg／ml的细胞存活率为15．75％～93．64％。青蒿琥酯可诱导CNE细胞凋亡，高浓度组（10μg／ml）作用比低浓度组（5μg／ml）强（P〈0．05）。当青蒿琥酯与放疗联用时作用更为明显，联用组的作用效果均优于单用青蒿琥酯组或单纯放疗组。结论青蒿琥酯对CNE细胞增殖有明显的抑制和诱导凋亡作用，且和放疗联用作用更强。

紫杉醇联合放疗对鼻咽癌CNE细胞株凋亡蛋白表达的影响

鼻咽癌是我国常见的恶性肿瘤之一,在头颈部恶性肿瘤中占首位。放射治疗是鼻咽癌的主要治疗手段,早期病人单纯放疗效果较好,但因其发生部位隐蔽,症状多样性,就诊病人70%为局部晚期病人,单纯放疗疗效较差,局部复发和远处转移为常见的失败原因。为提高局部晚期鼻咽癌的治疗效果,局部放疗和全身化疗相结合成为国内外研究的热点。

5-氨基酮戊酸对人鼻咽癌CNE细胞的光动力作用

目的观察及检测5-氨基酮戊酸(5-ALA)对于人鼻咽癌CNE细胞的光动力作用。方法通过5-ALA与CNE细胞共培养后荧光检测确定适合的培养时间及药物浓度,从而观察5-ALA光动力治疗(5-ALA-PDT)后细胞的形态变化及坏死、凋亡情况,并且通过MTT检测5-ALA浓度及激光器能量密度与细胞生存率的关系。结果5-ALA与CNE细胞共培养的适合时间为12 h,最大有效浓度1 mmol/L。5-ALA-PDT后能观察到细胞凋亡,能量密度越大,变化出现越早。并且,光动力后早期细胞主要凋亡,晚期细胞逐渐坏死。当激光能量密度不变时,细胞死亡率随药物浓度增高而增高,但并不呈线性相关;而5-ALA小于1 mmol/L且固定不变时,细胞生存率随能量密度增高而降低,且呈线性相关。结论5-ALA对CNE细胞有明显的杀伤作用,并且PDT后的细胞生存率与5-ALA浓度及激光的能量密度相关。

呫吨酮并吡啶衍生物XP-16对人鼻咽癌CNE细胞的体外抑制作用

运用MTT法、细胞形态学观察和细胞克隆实验观察一个新型的呫吨酮并吡啶衍生物(XP-16)对人鼻咽癌CNE细胞的体外抗肿瘤效应;运用Hoechest33258和PI双染、流式细胞仪检测、荧光光度法、RT-PCR等手段研究其可能的作用机制。结果表明,该化合物能剂量和时间依赖性地抑制CNE细胞增殖;XP-16作用于CNE细胞24 h后,CNE细胞出现染色质聚集、核碎裂等典型的凋亡形态学改变,且随化合物剂量的增加,CNE细胞凋亡百分率逐渐增大;CNE细胞阻滞于G2-M和S期;并且引起CNE细胞线粒体膜电位降低、Bad和MT-1A的mRNA表达增加。XP-16具有诱导CNE细胞凋亡作用,其作用机制可能与其降低线粒体膜电位、上调MT-1A表达有关。

丹参酮Ⅱ_A诱导人鼻咽癌CNE细胞凋亡

目的:探讨丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA,TanⅡA)抗人鼻咽癌CNE作用及其可能作用机制。方法:通过细胞形态学观察、生长曲线绘制、MTT检测以及克隆实验观察TanⅡA对CNE细胞增殖的影响;应用Hoechest33258和PI双染法观察TanⅡA对CNE细胞凋亡的影响;采用荧光分光光度计检测TanⅡA对CNE细胞细胞内钙及线粒体膜电位的影响;RT-PCR检测TanⅡA对CNE细胞Bad,MT-1A mRNA表达的影响。结果:TanⅡA能抑制CNE细胞增殖,且随TanⅡA剂量的增加和作用时间的延长而增强,TanⅡA作用CNE细胞24,48,72 h的IC50分别为45.7,24.8,3.3 mg.L-1。TanⅡA作用CNE细胞24 h后,CNE细胞出现染色质聚集等典型的凋亡形态学改变,且随TanⅡA剂量的增加,CNE细胞凋亡百分率逐渐增大。TanⅡA作用后,CNE细胞的细胞内钙升高、线粒体膜电位降低、Bad mRNA表达增加、MT-1A mRNA表达上调。结论:TanⅡA具有抗CNE作用,其诱导细胞凋亡可能与钙依赖性通路和MT-1A表达上调有关。

蟾蜍灵对人鼻咽癌细胞CNE-1的放射增敏作用

目的:观察蟾蜍灵对鼻咽癌细胞的放射增敏作用。方法:通过MTT法获得单纯蟾蜍灵作用于鼻咽癌细胞CNE-1的细胞存活曲线及抑制细胞增殖50%的药物浓度(IC50),然后采用蟾蜍灵及放射线单独或联合作用于CNE-1细胞,用克隆形成法经SPSS 9.0软件绘制细胞存活曲线,获得不同处理条件下的放射增敏比。结果:单纯用药组,CNE-1细胞的存活率随蟾蜍灵浓度的增加而降低,其IC50约为2.5×10-7mol/L。2.5×10-9和2.5×10-7mol/L的蟾蜍灵作用CNE-1细胞24 h后均见到放射增敏作用,增敏比分别为1.21和1.42。结论:蟾蜍灵对鼻咽癌细胞CNE-1有放射增敏作用,且增敏作用随浓度的增加而增强。

生物钟基因Per1对鼻咽癌细胞CNE2侵袭迁移及与JAK2-STAT3通路相关蛋白表达的影响

目的:探讨生物钟基因Per1对鼻咽癌细胞CNE2侵袭转移及上皮-间质转化(EMT)的影响,并阐述其与JAK2-STAT3信号通路相关蛋白的关系。方法:实时荧光定量PCR法(qPCR)以及蛋白质印迹法(WB)检测CNE2细胞中Per1基因及蛋白水平;构建Per1基因过表达及干扰慢病毒载体并转染CNE2细胞;实验分为过表达组(Per1-OE)、过表达对照组(Per1-OENC)、干扰组(Per1-sh)、干扰对照组(Per1-shNC);利用划痕愈合、Transwell实验检测Per1基因对各组细胞侵袭、迁移能力;WB检测Per1基因对EMT相关蛋白:E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达的影响;WB检测Per1基因对JAK2-STAT3信号通路相关蛋白表达的影响。结果:WB和PCR结果显示:与人永生化鼻咽上皮细胞NP69相比,Per1在鼻咽癌细胞CNE2中表达降低。通过构建Per1基因过表达及干扰慢病毒载体,有效地上调和下调了CNE2中Per1在转录及蛋白水平的表达,并分别成功筛选出稳转细胞株。划痕实验结果显示:Per1-OE组较Per1-OENC组24 h、48 h细胞迁移率均明显下降(P=0.04,P=0.01),Per1-sh组较Per1-shNC组24 h、48 h细胞迁移率均明显升高(P=0.01,P=0.005)。Transwell实验结果显示:Per1-sh组较Per1-shNC组穿过Transwell小室细胞数明显增加(P=0.02),Per1-OE组较Per1-OENC组穿过Transwell小室细胞数明显减少(P=0.001)。WB结果显示:JAK2、p-JAK2、STAT3蛋白在各组细胞中表达无统计学差异(P>0.05)。Per1-sh组较Per1-shNC组p-STAT3、N-cadherin、Vimentin的蛋白表达下降,E-cadherin表达升高(P<0.05),Per1-OE组较Per1-OENC组p-STAT3、N-cadherin、Vimentin的蛋白表达均升高,E-cadherin表达下降(P<0.05)。结论:过表达Per1基因后可抑制鼻咽癌细胞CNE2侵袭、迁移,使N-cadherin、Vimentin、p-STAT3蛋白表达下降,E-cadherin表达增加;干扰Per1基因后则相反,进而表明Per1基因在鼻咽癌细胞CNE2中可能扮演着抑癌基因的角色;同时我们推测Per1基因与p-STAT3的表达有一定的相关性,但其具体作用机制有待进一步研究。

高良姜素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖及凋亡的研究

目的:研究高良姜素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖及凋亡的影响。方法:实验设置空白对照组和实验组(分别加入不同浓度的高良姜素处理CNE2细胞),采用CKK-8法检测CNE2细胞增殖的抑制效果,采用流式细胞仪检测CNE2细胞周期和凋亡的影响。结果:高良姜素能抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖,而随其浓度增加CNE2细胞阻滞于G0/G1期,S期、G2/M期细胞减少,同时细胞凋亡率也随其浓度增高而增加,呈浓度依赖性。结论:高良姜素对人鼻咽癌CNE2细胞株有抑制增殖作用,对细胞周期过程产生阻滞作用,并可以诱导细胞凋亡。

人鼻咽癌CNE细胞摄取^(99m)TcN(NOEt)_2与^(99m)Tc-MIBI动力学对比研究

目的:研究99mTc-氮-二{(N-乙基-N-乙氧基二硫代氨基甲酸盐[N(NOEt)2]}和99mTc-甲氧基异丁基异腈(MIBI)在人鼻咽癌CNE细胞中的摄取动力学。方法:用放射性核素示踪技术研究人鼻咽癌CNE细胞在37℃和22℃时对99mTcN(NOEt)2和99mTc-MIBI的摄取动力学规律。结果:37℃和22℃时CNE细胞对99mTcN(NOEt)2的摄取差异无统计学意义,99mTc-MIBI摄取则呈温度依赖性。37℃时CNE细胞对99mTcN(NOEt)2摄取峰值为43.15%,99mTc-MIBI为11.08%(P<0.01);5min时CNE细胞摄取99mTcN(NOEt)2为峰值的63%,99mTc-MIBI为48%(P<0.05);60min时99mTcN(NOEt)2在CNE细胞中的滞留率为63.92%,99mTc-MIBI为53.97%(P<0.05)。结论:99mTcN(NOEt)2可能较99mTc-MIBI更适用于鼻咽癌显像,具有潜在的临床应用价值。

抑制ATM/PI3K功能区表达对鼻咽癌细胞CNE1辐射增敏的研究

背景与目的:共济失调毛细血管扩张症突变基因(ataxia-telangiectasiamutant,ATM)与细胞辐射敏感性密切相关,已有报道,ATM蛋白(ATM基因编码产物)表达抑制可引起多种恶性肿瘤细胞辐射敏感性的改变。本研究观察ATM/PI3K区反义RNA对鼻咽癌细胞系CNE1ATM蛋白的抑制作用及辐射增敏作用。方法:构建含反义ATM/PI3K区序列逆转录病毒重组体pDOR-atm,经阳离子脂质体转染入CNE1细胞,并命名为CNE1/pDOR-atm。应用半定量RT-PCR法分析反义组和对照组细胞中ATMmRNA的水平,应用流式细胞仪检测表达ATM蛋白的阳性细胞百分率及平均荧光强度,应用集落形成实验及线性二次模型(linear-quadraticmodel,L-Q模型)检测细胞辐射敏感性的变化。结果:在反义组细胞CNE1/pDOR-atm中ATMmRNA指数(mRNAindex,RI)平均为0.23±0.02,在对照组细胞CNE1/pDOR中RI平均为0.51±0.03(P<0.05)。在反义组中ATM蛋白阳性细胞百分率平均为70.8%,ATM蛋白平均荧光强度为1.81±0.12;而对照组中分别为99.3%,4.51±0.18(P<0.01),提示反义组细胞中ATMmRNA水平及蛋白表达抑制。反义组细胞α值为0.40Gy-1,对照组为0.36Gy-1,2Gy辐射增敏比达3.0,提示反义组细胞辐射敏感性增加。结论:抑制CNE1细胞的ATM/PI3K区表达可以达到有效的辐射增敏目的。

益气解毒方提取物对CNE2细胞的体内外抑瘤作用

目的观察益气解毒方提取物对鼻咽癌CNE2细胞及移植瘤的抑制作用。方法采用MTT法测定益气解毒方多糖提取物、乙酸乙酯提取物(EAE)、乙醇提取物对CNE2细胞体外增殖的影响。建立CNE2裸鼠移植瘤模型,随机分为模型组、EAE组、顺铂(DDP)组和联合治疗组,分别给予生理盐水、益气解毒方EAE、DDP注射液以及EAE联合DDP注射液,12 d后检测各治疗组的肿瘤抑制率。结果益气解毒方EAE对CNE2细胞具有明显的抑制作用,并呈明显的剂量效应关系(P<0.05)。联合治疗组能明显抑制裸鼠CNE2肿瘤的生长,抑瘤率高达56.7%,明显高于EAE组和DDP组(P<0.01)。结论 EAE是益气解毒方中的一种有效的抗鼻咽癌肿瘤成分,EAE联合DDP对裸鼠CNE2鼻咽癌移植瘤的生长具有协同抑制作用。

肝素增强佛波酯对人鼻咽癌CNE2细胞的作用 :上调c-jun ,p53 ,p21的表达(英文)

目的 :观察肝素联合佛波酯对人鼻咽癌细胞的增殖与凋亡的影响及其可能的分子机制。方法 :用细胞记数法、流式细胞术观察肝素联合佛波酯对人鼻咽癌细胞的增殖及细胞周期的影响 ;而用TUNEL、琼脂糖凝胶电泳、Westernblot等方法观察肝素与佛波酯联合应用对人鼻咽癌细胞凋亡的作用。结果 :肝素与佛波酯联合应用后对鼻咽癌细胞的生长抑制及其凋亡具有显著增强的作用 ,同佛波酯单独应用于诱导细胞凋亡相比 ,低剂量的肝素与佛波酯联合应用后发现 :TUNEL阳性细胞明显增多 ;G1 期细胞阻止 ,S期细胞明显减少 ,凋亡率增加 ;DNA“梯形”变化更加明显 ;c-jun ,p53 ,p2 1基因表达明显升高 ,而c-fos在整个用药过程中没有改变。结论 :肝素增强佛波酯对人鼻咽癌细胞的抗增殖及促凋亡 ,这可能与c-jun ,p53 ,p2

二烯丙基二硫诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡及其可能的分子机制

背景与目的:二烯丙基二硫(DADS)是大蒜中的一种脂溶性单体化合物,对多种肿瘤细胞有促凋亡作用。本实验旨在探讨DADS抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖与诱导凋亡的生物学效应及可能的分子机制。方法:分别采用MTT、光学显微镜、流式细胞仪、DNA琼脂糖凝胶电泳与Western blot检测DADS抑制CNE2细胞增殖与诱导凋亡作用及Bcl-2、Bax和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase3)蛋白的表达。结果:MTT结果显示,50、100、200及400μmol/LDADS作用CNE2细胞48h,抑制率分别为3.66%、14.25%、29.66%及61.28%,呈浓度依赖性(P<0.05)。形态学观察发现,DADS处理24h后,部分CNE2细胞变圆,体积明显缩小,胞质强嗜酸性,核固缩、深染,核染色质积聚至核膜周边,呈现凋亡细胞形态学改变。流式细胞术分析显示,50、100、200和400μmol/LDADS作用24h,凋亡率分别为(10.8±1.3)%、(14.8±1.1)%、(21.7±2.0)%及(29.8±2.6)%,呈浓度依赖性诱导CNE2细胞凋亡(n=3,P<0.05)。200及400μmol/LDADS分别作用CNE2细胞24h后,DNA凝胶电泳出现典型梯形条带。Western blot检测显示,50、100、200和400μmol/LDADS处理CNE2细胞24h后,Bcl-2蛋白与β-Actin的灰度值比分别是1.92±0.21、1.21±0.18、0.89±0.14及0.41±0.09,与对照组(2.24±0.26)比较,差异有显著性(P<0.05);Bax蛋白与β-Actin的灰度值比分别是0.78±0.14、1.12±0.19、1.54±0.22及2.08±0.27,与对照组(0.33±0.08)比较,差异有显著性(P<0.05);随浓度的增加,Bcl-2蛋白下调,Bax蛋白表达上调。200、400μmol/LDADS处理CNE2细胞24h后,与对照组相比,Caspase3酶原蛋白条带变细并且可见到蛋白裂解产物,表明DADS可以促进Caspase3的活化。结论:DADS具有抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖和诱导凋亡的作用,其机制可能与Bcl-2蛋白下调,Bax蛋白表达上调导致Bcl-2/Bax比值下降,促进Caspase3的活化有关。

鼻咽癌相关基因BRD7对鼻咽癌细胞CNE1的影响

为了研究BRD7基因对鼻咽癌细胞CNE1的影响,通过脂质体转染方法,将BRD7基因导入NPC细胞株CNE1细胞中.通过细胞生长曲线发现该基因能够抑制CNE1细胞的生长.为了探讨可能的作用机制,进而采用蛋白质组技术研究该基因对鼻咽癌蛋白质表达谱的影响,从而研究该基因在CNE1中的地位和作用.通过对过表达BRD7基因后鼻咽癌细胞系CNE1的蛋白质表达谱改变的研究,鉴定出19个差异表达蛋白,这些蛋白质包括:BCCIP(BRCA2andCDKN1A(p21(Waf1/Cip1)),FHL2(fourandahalfLIMdomains2),Chloridechannelregulatoryprotein;Hin-1(high-in-normal-1),WISP-1(connectivetissuegrowthfactorrelatedprotein),SREC-4(scav-engerreceptorexpressedbyendothelialcells-2),folatereceptor.这些差异蛋白涉及到基因表达调控、细胞黏附等众多的事件.从另一个侧面研究了BRD7基因与鼻咽癌的关系,扩展了BRD7基因的研究范围,并进一步充实了该基因做为鼻咽癌候选抑瘤基因的证据.

雌激素对转STGC3基因CNE2细胞系生长增殖的影响

为探讨雌激素对STGC3基因抑瘤的促进作用,将重组的pcDNA3.1(+)-STGC3真核表达载体导入鼻咽癌细胞系CNE2,经G418筛选,RT-PCR及蛋白质印迹检测STGC3的表达,获得稳定高表达STGC3基因的pcDNA3.1(+)/STGC3/CNE2细胞系.采用细胞计数法,检测雌二醇(β-estradiol)对体外培养pcDNA3.1(+)/STGC3/CNE2细胞生长增殖的影响.将pcDNA3.1(+)/STGC3/CNE2细胞接种于裸小鼠前肢背部皮下,观察分析雌性与雄性裸鼠成瘤的差别.运用RT-PCR、免疫组织化学及蛋白质印迹方法,分别从mRNA及蛋白质水平,分析STGC3基因在裸鼠移植瘤组织中的表达状况.移植瘤组织病理切片检查,观察瘤细胞形态学变化.用流式细胞仪测定移植瘤组织的细胞周期分布.研究结果表明:细胞体外培养,pcDNA3.1(+)/STGC3/CNE2细胞经β-estradiol处理后,其生长速度明显减缓(P<0.05);裸鼠体内研究,接种pcDNA3.1(+)/STGC3/CNE2细胞实验组的移植瘤体积和重量均小于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);实验组中,雌性裸鼠组移植瘤体积和重量均小于雄性组,差异有显著性意义(P<0.05),雌性裸鼠组移植瘤生长最慢,而对照组中雄性与雌性裸鼠组间瘤块的差异无显著性意义(P>0.05);接种pcDNA3.1(+)/STGC3/CNE2细胞的雌性裸鼠组移植瘤,阻滞于G0/G1期细胞数大于其他各组(P<0.05).上述体内外研究结果显示,雌激素可能具有增强STGC3基因对CNE2细胞系的生长抑制作用.

肝素对叉孢素介导的人鼻咽癌CNE2细胞的增殖与凋亡的影响(英文)

目的 :观察肝素对叉孢素介导的人鼻咽癌细胞的增殖与凋亡的影响 ,以及探讨其可能的分子机制。方法 :应用了MTT法、荧光染色、TUNEL、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳、RT -PCR及Westernblot等方法。结果 :肝素与叉孢素联合应用后对鼻咽癌细胞的增殖及凋亡具有显著的影响。低剂量的肝素与叉孢素联合应用 :细胞生长抑制率显著高于叉孢素单独应用 ;细胞核浓缩 ,核碎裂等形态学变化更加明显 ;TUNEL阳性细胞明显增多 ;凋亡率增加 ;DNA“梯形”变化也清晰可见 ;c-myc ,bax基因的表达明显高于叉孢素单独应用 ,而bcl- 2在整个用药过程中没有改变。结论 :肝素与叉孢素对人鼻咽癌细胞在抗增殖及促凋亡方面有协同作用 ,这可能与c -myc ,bax的表达上调有关 .

NP9对鼻咽癌细胞系CNE1基因表达谱的影响

目的:确定NP9表达对鼻咽癌CNE1细胞基因表达谱的影响。方法:稳定表达NP9基因和稳定转染空载体的CNE1细胞分别作为基因芯片分析的实验组和对照组,用高通量的基因芯片筛选实验组细胞的差异表达基因,荧光定量逆转录PCR验证部分基因表达差异。结果:所分析的14500个基因中,266个检测出有表达差异,其中82个基因呈现表达上调(RA>1),184个基因显示表达下调(RA<1)。显著上调和下调的基因分别为34个(RA>1.5)和75个(RA<1.5)。结论:NP9基因的表达导致了CNE1细胞中与细胞周期调控、细胞增殖和分化、细胞信号转导、细胞黏附相关基因表达的改变,为NP9的功能及分子机制研究提供了新的线索。