人鼻咽癌吉西他滨耐药细胞系的建立及其生物学特性

目的建立人鼻咽癌吉西他滨耐药细胞系并研究其生物学特性。方法采用药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立人鼻咽癌吉西他滨多药耐药细胞亚系CNE2/Gem,MTT法检测CNE2和CNE2/Gem对几种常用抗肿瘤药物的半数抑制浓度(IC50)和耐药系数(RI),流式细胞术测定细胞周期及细胞内荧光药物罗丹明的蓄积,绘制细胞生长曲线,计算倍增时间并在光镜下观察细胞形态。结果从生长曲线计算出CNE2和CNE2/Gem的倍增时间分别为17.13和23.13h。CNE2和CNE2/Gem对吉西他滨的IC50分别为2.84±1.63和42.95±7.53μg/ml,RI为23.61(P<0.001),对顺铂(DDP)、5-氟尿嘧啶(5-FU)及长春新碱(VCR)的RI分别为15.00(P<0.001)、6.98(P<0.01)及12.80(P<0.05),表明其具有多药耐药特征。流式细胞测定显示CNE2/Gem内罗丹明的蓄积明显低于CNE2(3.56vs220.35)。光镜下见CNE2/Gem胞体变圆,大小不一,胞质内有较多颗粒。结论成功建立了稳定的人鼻咽癌吉西他滨耐药细胞系CNE2/Gem,且耐药性能显著,可作为进一步研究鼻咽癌吉西他滨耐药机制较为理想的模型。