沉默结肠癌细胞中CO-029基因对干扰素诱导的跨膜蛋白1的影响及与结肠癌转移之间的关系

目的通过RNA干扰技术沉默结肠癌细胞株HT-29细胞中CO-029基因的表达,检测其对干扰素诱导的跨膜蛋白1(IFITM1)表达的影响,探讨它们和结肠癌转移之间的关系及作用机制。方法 HT-29细胞分为两组:NS组(未处理)和KD组(转染CO-029 siRNA)。通过荧光定量PCR和Western blot观察两组细胞IFITM1表达的变化。结果 CO-029基因沉默后,IFITM1 mRNA和IFITM1蛋白的相对表达量分别为1.00±0.08、1.05±0.11,明显高于NS组的0.51±0.02、0.41±0.02。结论 CO-029基因沉默后,IFITM1的表达明显升高,提示IFITM1和CO-029存在一定的关系,两者在结肠癌的发展中可能具有拮抗作用。

四跨膜蛋白CO-029在肿瘤的侵袭与转移中的作用

CO-029作为四跨膜蛋白超家族的重要成员之一,已有研究显示其在促进肿瘤侵袭与转移中的重要作用,但其具体机制仍知之甚少。研究明确其作用机制,有揭示肿瘤发生发展过程机制,作为预测肿瘤的进展及预后,进而开发新的肿瘤靶向治疗药物的潜在临床价值。

四跨膜蛋白CO-029过表达与胆管癌上皮-间质转变及转移的关系

目的探讨四跨膜蛋白CO-029表达与胆管癌上皮-间质转变(EMT)及肿瘤转移的关系和作用机理。方法利用已构建的vshRNA-CO-029(LV/GFP/CO-029)慢病毒质粒转染并筛选沉默CO-029基因表达的稳转胆管癌细胞株HCCC-9810-vshRNA-CO-029作为沉默组,以模拟质粒转染的HCCC-9810细胞作为模拟组,以未转染细胞作为对照组。分别以细胞划痕、Transwell和裸鼠体内种植实验检测三组细胞的迁移和侵袭转移能力变化。应用免疫共沉淀和肿瘤坏死因子(TNF)-α刺激实验检测CO-029对EMT相关基因表达的影响。结果沉默组细胞划痕愈合率低于模拟组细胞[(27.11±4.58)%比(92.84±6.24)%],沉默组细胞穿过Matrigel胶的数量为(57.15±6.10)个,低于模拟组(108.20±9.21)个及对照组(112.00±10.45)个,差异均具有统计学意义(均P<0.01)。裸鼠肝脏移植沉默组细胞的肝脏瘤体积为(2.17±0.54)cm3,而移植模拟组细胞的肝脏瘤体积为(0.74±0.15)cm3,差异有统计学意义(P<0.05)。模拟组肺转移的发生率和肺转移瘤灶数目分别为100%(6/6)、(214.17±35.64)个,沉默组分别为16.7%(1/6)、(41.56±14.15)个,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。免疫共沉淀显示CO-029可与TNF-αR1形成复合物,TNF-α可诱导模拟组细胞的E-钙黏蛋白表达下调,波形蛋白和N-钙黏蛋白表达上调,而沉默组细胞中则无明显变化。结论CO-029表达与胆管癌侵袭转移能力正相关,并可能与TNF-α协同诱导胆管癌细胞发生EMT,是胆管癌复发转移及预后干预的潜在靶点和分子靶向治疗指标。

四跨膜蛋白CO-029介导肿瘤坏死因子诱导胆管癌上皮间质转化

目的 探讨四跨膜蛋白CO-029表达在肿瘤坏死因子α（TNFα）诱导肝内胆管癌细胞发生上皮间质转化（EMT）中的作用.方法 实时PCR与蛋白印迹法检测CO-029在胆管癌细胞和组织中的表达;利用慢病毒干扰CO-029的表达,探讨其对TNFd诱导EMT过程的影响;通过免疫共沉淀后蛋白印迹法及质谱分析证实TNFαR1在肝内胆管癌可直接或间接与四跨膜蛋白CO-029形成复合物.结果 CO-029在肝内胆管癌细胞和组织中有不同程度的表达.慢病毒干扰胆管癌细胞后CO-029表达水平显著下调;CO-029表达下调后,TNFα不能诱导胆管癌细胞发生EMT.免疫共沉淀显示TNFαR1可直接或间接与四跨膜蛋白CO-029形成复合物.结论 CO-029参与调节TNFα/TNFαR1诱导肝内胆管癌细胞发生EMT,在胆管癌的侵袭转移中发挥重要作用.

四跨膜蛋白CO-029在肝内胆管细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨四跨膜蛋白C0-029在人肝内胆管细胞癌中的表达及其临床意义。方法应用蛋白印迹与实时-PCR检测20例患者肝内胆管癌组织、相应癌旁组织及肝内胆管细胞癌细胞系HCCC-9810中C0-029的表达水平。应用组织芯片检测40例肝内胆管细胞癌病理标本中C0-029的表达，并分析其与肿瘤的临床病理特征及预后的关系。结果蛋白印迹与实时一PCR检测显示C0-029在20例肝内胆管癌患者组织中高表达，且表达水平明显高于相应癌旁组织，在HCCC-9810细胞系中亦显著高表达（P〈0．05）。组织芯片检测显示C0-029阳性表达率为65％（26／40）。按复发时间（TTR）分组，术后早期复发组（TTR〈1年）C0-029的表达明显高于未复发组（TTR≥1年），且C0-029表达与肿瘤包膜、肝门淋巴结转移、TNM分期及预后密切相关（P〈0．05）。结论C0-029在胆管细胞癌组织中的差异表达与肿瘤复发转移及预后密切相关。

四跨膜蛋白在肝癌中的作用

四跨膜蛋白是一组具有四个高度疏水的跨膜结构域的低分子量细胞膜表面蛋白,可广泛参与细胞生长、粘附、迁移等多种生命活动。四跨膜蛋白超家族(TM4SF)可与包括四跨膜蛋白、整合素、生长因子及其受体、HLA家族、主要组织相容复合物(MHC)等在内的多种细胞表面分子相连接,形成以TM4SF为核心的四跨膜蛋白网络。四跨膜蛋白网络可通过直接或间接作用于细胞信号通道从而影响肿瘤细胞的粘附、分化、迁移及侵袭。目前研究表明四跨膜蛋白CD151、CD82、Tspan8及Tspan1与肝癌密切相关,可参与调控肝癌细胞的粘附、增殖、分化、迁移及侵袭等过程来影响肝癌的发生发展。KAI1/CD82为肝癌的抑制基因,上调其表达可以抑制肝癌细胞的迁移和侵袭;CD151在肝癌组织中大量表达,提示CD151或联合CD151/c-Met是可能预测肝癌的进展新指标,并且CD151可能用于肝癌的靶向治疗;而Tspan8(CO-029)及Tspan1(NET-1)则可用于预测肝癌的进展及预后。