干扰COL11A1基因表达对人卵巢癌细胞侵袭及耐药性影响

目的卵巢癌是常见妇科恶性肿瘤之一,耐药是上皮性卵巢癌治疗的一大挑战,克服耐药在卵巢癌临床治疗中至关重要.本研究旨在探讨COL11A1基因表达对卵巢癌顺铂耐药细胞(A2780-cis/IGROV1-cis)影响及其可能机制.方法采用免疫荧光技术和蛋白质印迹法检测COL11A1基因在卵巢癌顺铂耐药细胞(A2780-cis/IGROV1-cis)和敏感性细胞(A2780/IGROV1)中表达情况;采用蛋白质印迹法检测COL11 A1在耐药组细胞(A2780-cis/IGROV1-cis)和干扰组细胞(A2780-cis/IGROV1-cis细胞转染COL11A1 siRNA质粒)和对照组(A2780-cis/IGROV1-cis细胞转染空载质粒)细胞中表达情况;采用Transwell侵袭实验、细胞划痕实验和平板克隆形成实验检测COL11A1对A2780 cis/IGROV0 cis细胞迁移、侵袭和克隆形成能力影响;流式细胞术检测COL11A1对A2780 cis/IGROV0 cis细胞凋亡影响;蛋白质印迹法检测卵巢癌干细胞标志物CD44、ALDH1和SOX2蛋白表达水平.结果耐药组细胞COL11A1荧光强度以及蛋白表达与敏感组细胞相比增强.A2780-cis组:COL01A1干扰组细胞COL11A1表达量为0.240±0.049,低于对照组(0.847±0.035)和耐药组(0.883±0.020),F=95.78,P<0.001;干扰组细胞迁移水平为(18.170±1.740)%,低于对照组(44.200±2.178)%,t=9.339,P<0.001;干扰组细胞侵袭能力为(24.670±0.899)%,低于对照组(51.330±1.354)%,t=16.410,P<0.001;干扰组细胞克隆形成能力为240±10,低于对照组(503±8),t=19.98,P<0.001.IGROV1 cis细胞:COL11A1干扰组细胞COL11A1表达量为0.340±0.032,低于对照组(0.870±0.032)和耐药组(0.887±0.035),F=72.91,P<0.001;干扰组细胞迁移水平为(16.200±1.795)%,低于对照组(58.300±1.528)%,t=17.86,P<0.001;干扰组细胞侵袭能力为(28.500±1.041)%,低于对照组(78.500±1.041)%,t=33.97,P<0.001;干扰组细胞克隆形成能力为330±21,低于对照组(608±19),t=9.699,P<0.001.以上测定指标组间差异均有统计学意义.顺铂处理48 h后,A2780 cis细胞:干扰组细胞克隆形成能力为55±8,低于对照组(270±8),t-19.91,P<0.001;干扰组细胞凋亡百分比为(70.490±1.046)%,高于对照组(45.330±2.517)%,t=9.229,P<0.001.IGROV1-cis细胞:干扰组细胞克隆形成能力为42±6,低于对照组(187±9),t=13.12,P<0.001;干扰组细胞凋亡百分比为(70.700±0.748)%,高于对照组(50.020±1.370)%,t=13.25,P<0.001;COL11A1干扰组细胞中CD44、ALDH1和SOX2蛋白相对表达量低于耐药组.结论干扰COL11A1基因表达可逆转卵巢癌顺铂耐药细胞的耐药性,COL11A1与干细胞标志物联合可能具有预后预测意义.