lncRNA COLCA1/miR-423-5p/FAM172A分子轴对皮肤鳞状细胞癌A431细胞的增殖和迁移的影响

目的探讨长链非编码RNA(long-chain non-coding RNA, lncRNA)COLCA1在皮肤鳞状细胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma, CSCC)组织中的表达及其对细胞增殖和迁移的影响、分子机制。方法采用qRT-PCR法检测COLCA1在正常皮肤组织和CSCC组织、细胞系及人角质形成细胞系中的表达;选择表达最低的细胞系,分别转染空白质粒(对照组)或COLCA1过表达质粒(实验组);采用MTT法和细胞划痕实验分别检测过表达COLCA1对CSCC细胞系增殖和迁移的影响;通过生物信息学法预测COLCA1潜在的分子机制。采用qRT-PCR和Western blot法检测过表达COLCA1对靶基因表达的影响。结果 CSCC组织中COLCA1的表达显著低于正常皮肤组织(1.01±0.20 vs 5.71±0.78,P<0.01)。CSCC细胞系中COLCA1的表达显著低于人角质形成细胞系(P<0.01),A431细胞系中的表达最低(P<0.01)。与对照组相比,过表达质粒可有效促进COLCA1的表达(1.00±0.04 vs 9.31±0.99,P<0.01)。过表达COLCA1可抑制A431细胞的增殖能力和迁移能力(P均<0.01)。COLCA1可能与miR-423-5p互补结合,miR-423-5p可能与FAM172A mRNA互补结合。与对照组相比,过表达COLCA1可抑制A431细胞中miR-423-5p的表达(1.00±0.05 vs0.20±0.05,P<0.01),并促进FAM172A在mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。结论 COLCA1在CSCC组织和细胞系中呈低表达,过表达COLCA1可能通过miR-423-5p/FAM172A分子轴抑制CSCC细胞系A431的增殖和迁移能力。

长链非编码RNA COLCA1对肺癌细胞增殖、凋亡和自噬的影响

目的探讨长链非编码RNA结直肠癌相关基因1(COLCA1)对肺癌细胞增殖、凋亡和自噬水平的影响。方法实时荧光定量PCR(qPCR)检测正常人肺支气管上皮细胞BEAS-2B和人肺癌细胞(SPc-A1、H1650、A549、H1975)的COLCA1水平。选择H1975细胞作为细胞实验研究对象并分为3组:空白对照组、阴性对照组(转染空质粒pcDNA3.1)和过表达组(转染COLCA1过表达质粒pcDNA3.1-COLCA1)。CCK-8法测定细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,qPCR和Western blotting检测BCL2凋亡调节因子(Bcl-2)、细胞周期蛋白1(CCND1)、半胱氨酸蛋白酶3(CASP3)和自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的水平;免疫荧光检测细胞中LC3B的表达变化。结果肺癌细胞较BEAS-2B细胞的COLCA1水平降低(P<0.05)。与其余两组比较,过表达组的凋亡率及COLCA1、LC3B和CASP3水平升高,而细胞活力及Bcl-2和CCND1水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。空白对照组和阴性对照组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论在肺癌组织和细胞中异常低表达的COLCA1能够通过促进细胞增殖及减少细胞凋亡和自噬的发生来促进肺癌恶性表型的发展,其有望成为肺癌诊治的靶点。