芪白平肺胶囊对COPD抑郁障碍模型大鼠作用机理研究

目的:探讨芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD)抑郁障碍模型大鼠的疗效及作用机理。方法:将60只大鼠随机分为对照组(15只)、模型组(15只)、芪白平肺胶囊组(15只)和黛力新(氟哌噻吨美利曲辛)组(15只),造模后分别干预灌胃1个月,比较各组大鼠行为学表现、肺功能及大鼠海马5-HT水平。结果:芪白平肺胶囊组模型大鼠糖水消耗实验、敞箱实验运动评分、5-HT水平较对照组无统计学差异(P>0.05);芪白平肺胶囊组模型大鼠肺功能较对照组有所下降(P<0.05),较模型组改善明显(P<0.01)。结论:芪白平肺胶囊能改善COPD抑郁障碍模型大鼠行为学及海马5-HT水平,对COPD抑郁障碍有一定疗效。

金荞麦水提物对COPD大鼠肺纤维化的影响

目的观察金荞麦水提物对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型肺纤维化的影响。方法改良烟熏法复制COPD模型,分正常组、模型组、金荞麦水提物低剂量组、金荞麦水提物高剂量组4组,观察支气管和肺组织病理,免疫组织化学检测基质金属蛋白酶(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1),放射免疫法血清上清液检测转化生长因子(TGF-β)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢ)。结果与模型组比较,金荞麦水提物组能显著减轻大鼠支气管、肺组织的病理变化,以高剂量最为明显,抑制MMP-9和TIMP-1的过度表达,升高MMP-9/TIMP-1,降低血清TGF-β和PⅢ的水平。结论金荞麦水提物能改善COPD大鼠模型的肺纤维化。

加味越婢加半夏汤对COPD模型大鼠血清IL-8和TNF-α的影响

【目的】研究加味越婢加半夏汤对慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠模型肺组织形态学以及血清白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,为加味越婢加半夏汤的临床应用提供实验依据。【方法】将40只Wistar大鼠随机分成模型组、强的松组、加味越婢加半夏汤低剂量组、加味越婢加半夏汤高剂量组,每组10只,以烟熏及气管内滴注脂多糖的方式建立大鼠COPD模型,HE染色对各组大鼠进行肺部组织学评分,ELISA法检测大鼠血清中IL-8、TNF-α的含量。【结果】模型组肺部炎性细胞浸润,肺泡扩大融合,数量减少;血清中IL-8和TNF-α高表达,各治疗组以上改变均明显减轻,以强的松组和加味越婢加半夏汤高剂量组最为显著(P<0.01),且二者治疗效果无明显差异。【结论】加味越婢加半夏汤能有效缓解COPD大鼠模型肺部炎症,降低了COPD大鼠体内细胞因子IL-8和TNF-α水平,上述作用具有一定的量效关系,即随给药剂量的增加有加强趋势。

中医药干预COPD大鼠模型实验研究进展

慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD)在全世界范围内已经成为一种威胁公众健康的主要慢性病。据报道,其死亡率位居世界第三位,而由于受到COPD危险因素的长期影响以及人口老龄化,本病的发病率也一直居高不下。近年来关于本病的研究繁多,尤其是中医中药对于慢阻肺的治疗取得了良好的疗效,为了解释中医药对于本病的治疗机制,广大中医工作者做了大量实验研究,笔者通过查阅近两年文献,就中医药干预COPD大鼠模型的实验研究作一综述。

COPD模型大鼠TGF-β1/Smads通路炎性蛋白的改变

目的观察烟雾暴露(CS)联合脂多糖(LPS)气管内滴注方法致慢性阻塞性肺病(COPD)模型大鼠TGF-β1/Smad通路中相关炎性蛋白的表达情况。方法将20只鼠龄8周的SPF级雄性Wistar大鼠随机分为对照组和模型组,每组各10只。模型组大鼠采用CS+LPS方法建立COPD模型。采用HE染色法观察肺组织形态改变,酶联免疫吸附(ELISA)法检测外周血血清白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-10(IL-10)及转化生长因子-β1(TGF-β1)含量,Western blot法测定肺组织TGF-β1、Smad2/3及Smad7磷酸化水平,RT-PCR法测定肺组织中TGF-β1、Smad2/3及Smad7mRNA表达。结果与对照组比较,模型组大鼠支气管及肺泡组织结构紊乱,部分结构消失;肺组织中Smad2/3mRNA表达明显降低(P <0.01);Smad7、IL-10及TGF-β1mRNA表达量明显升高(P<0.01),p-Smad2/3磷酸化明显降低(P <0.01);p-Smad7及TGF-β1磷酸化明显升高(P <0.01);模型组大鼠外周血IL-17水平明显下降,IL-10及TGF-β1水平明显升高(P <0.01),结论 COPD模型大鼠肺组织中TGF-β1/Smads通路处于激活状态,为气道炎症性疾病,特别是COPD的防治提供新的思路和方向。

益气固表丸对COPD模型大鼠水通道蛋白mRNA表达的影响

目的研究益气固表丸对慢性阻塞性肺病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD)模型大鼠肺组织中水通道蛋白(Aquaporin,AQP)1、4、5mRNA表达的影响。方法采用烟熏+脂多糖(LPS)气管内滴注方法建立COPD模型大鼠,造模成功后,将60只鼠龄为8w的SPF级雄性Wistar大鼠随机分为3组,分别为:空白组、对照组和实验(益气固表丸)组,每组20只,空白组和对照组大鼠给予生理盐水灌胃,实验组大鼠给予益气固表丸相应剂量的水溶液灌胃,2次/d,连续12w。采用Buxco系统检测各组大鼠肺功能吸气峰流速(Peak Inspiratory Flow,PIF)、呼气峰流量(Peak Ex-piratory Flow,PEF)及每分钟通气量(Minute Volume,MV),采用苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin HE)染色法观察大鼠肺组织形态学改变,RT-PCR方法检测大鼠肺组织中水通道蛋白(Aquaporin,AQP)1、4、5mRNA表达的变化。结果与空白组比较,对照组大鼠肺功能PIF、PEF和MV下降,差异有统计学意义(P<0.01);与对照组比较,实验组大鼠HE染色的炎症细胞浸润情况减轻,支气管管腔直径变宽,差异有统计学意义(P<0.01);与空白组比较,对照组大鼠肺组织AQP-1、AQP-4、AQP-5mRNA表达下降,差异有统计学意义(P<0.01);与对照组比较,实验组大鼠肺功能PIF、PEF及MV均升高,差异有统计学意义(P<0.01);与空白组比较,实验组大鼠肺组织AQP-1、AQP-4、AQP-5mRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论益气固表丸能够改善COPD模型大鼠的肺通气功能,升高大鼠肺组织中AQ P-1、AQP-4和AQP-5蛋白表达。

基于JAK2/STAT3信号通路探讨温肺扶阳祛痰方对COPD大鼠气道炎症的作用机制

目的探讨温肺扶阳祛痰方通过JAK2/STAT3信号对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠的治疗作用及其机制研究。方法应用烟雾吸入联合气管内滴注LPS灌肺建立COPD大鼠模型,造模成功后将大鼠随机分COPD模型组,温肺扶阳祛痰方组(中药组)和盐酸氨溴索缓释胶囊组(西药组)。造模第5周开始连续2周予温肺扶阳祛痰方最佳给药剂量为12.6 g/(kg·d),盐酸氨溴索缓释胶囊10.4 mg/(kg·d)干预模型。造模、干预过程中观察大鼠死亡率、体质量及阳气虚症状变化;采用HE染色法比较各组大鼠肺组织的病理改变,qPCR、ELISA、Western Blot检测肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、JAK2、STAT3的mRNA、蛋白表达。结果随疾病进展,与正常组、西药组、中药组相比较,COPD模型组死亡率增加,体质量下降,症状加重,病理切片可见支气管管腔、上皮及肺泡结构变形,上皮细胞明显脱落,肺泡壁变薄,黏膜下可见大量炎性细胞浸润。JAK2/STAT3信号通路中TNF-α、IL-6、JAK2、STAT3的mRNA和蛋白表达水平在COPD疾病模型中明显升高,与正常组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。温肺扶阳祛痰方、盐酸氨溴索缓释胶囊分别干预COPD大鼠,与模型组相比,中药组、西药组大鼠肺组织中的TNF-α、IL-6表达下降,进一步抑制JAK2活化,降低STAT3的mRNA表达(P<0.05)。结论温肺扶阳祛痰方通过抑制JAK2/STAT3通路促进排痰减少气道黏液滞留改善COPD炎症反应维持疾病稳定。

复制COPD大鼠模型的心得体会

目的:探讨复制COPD大鼠模型的方法并总结其经验。方法:从184只SD大鼠中随机选取18只纳入假手术组,其余166只用于造模。采用气道注射脂多糖加烟熏的方法复制COPD大鼠模型,假手术组于同一日气道注射等量生理盐水。观察大鼠一般情况及呼吸系统体征;光镜下观察大鼠肺组织;用ELISA法检测BALF中IL-1β、IL-6、IL-8、NF-κB、TNF-α炎性因子水平。结果:假手术组大鼠肺组织镜下见异常率为18.8%,模型组为92.1%;模型组大鼠BALF中IL-1β、IL-6、IL-8、NF-κB、TNF-α的含量与假手术组相比均有显著差异,提示造模成功,造模过程中死亡率为46.4%。结论:气道注射脂多糖加烟熏的方法可成功复制COPD大鼠模型,但尚需改善具体细节以降低死亡率。

基于白细胞介素8/黏蛋白5ac信号探讨益气活血化痰方对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道重塑及平滑肌厚度的影响

目的观察益气活血化痰方通过调控白细胞介素8(IL-8)/黏蛋白5ac(MUC5ac)信号通路对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道重塑及平滑肌厚度的影响。方法选取53只SPF级SD雄性大鼠,随机抽取10只作为健康组,剩余43只大鼠建立COPD模型,40只采用数字随机表法分为模型组、中药组、抑制剂组、联合组,每组10只。中药组大鼠给予益气活血化痰方32 g/kg灌胃,抑制剂组大鼠予腹腔注射吡咯烷二硫代甲酸铵(PDTC)100 mg/kg,联合组予益气活血化痰方灌胃后腹腔注射PDTC 100 mg/kg。健康组、模型组正常饲养,不予干预。采用动物肺功能检测仪测定各组大鼠肺功能[用力肺活量(FVC)、呼气峰值流速(PEF)、第1 s用力呼气容积(FEV 1)],酶联免疫吸附法检测肺泡灌洗液中IL-8、IL-17、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,蛋白免疫印迹法检测肺组织IKB激酶2(IKK2)、磷酸化IKB激酶α(p-IKBα)、核转录因子κB(NF-κB)、MUC5ac蛋白表达,苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理形态。结果与健康组比较,模型组、中药组、抑制剂组、联合组FVC、PEF、FEV 1水平均降低(P<0.05);与模型组比较,中药组、抑制剂组、联合组FVC、PEF、FEV 1水平均升高(P<0.05);联合组FVC、PEF、FEV 1水平均高于中药组、抑制剂组(P<0.05)。与健康组比较,模型组、中药组、抑制剂组、联合组肺泡灌洗液IL-8、IL-17、TNF-α水平均升高(P<0.05);与模型组比较,中药组、抑制剂组、联合组肺泡灌洗液IL-8、IL-17、TNF-α水平均降低(P<0.05);联合组肺泡灌洗液IL-8、IL-17、TNF-α水平均低于中药组、抑制剂组(P<0.05)。与健康组比较,模型组、中药组、抑制剂组、联合组支气管平滑肌厚度均增加(P<0.05);与模型组比较,中药组、抑制剂组、联合组支气管平滑肌厚度均降低(P<0.05);联合组支气管平滑肌厚度低于中药组、抑制剂组(P<0.05)。与健康组比较,模型组、中药组、抑制剂组、联合组肺组织IKK2、p-IKBα、NF-κB、MUC5ac表达均升高(P<0.05);与模型组比较,中药组、抑制剂组、联合组肺组织IKK2、p-IKBα、NF-κB、MUC5ac表达均降低(P<0.05);联合组肺组织IKK2、p-IKBα、NF-κB、MUC5ac表达均低于中药组、抑制剂组(P<0.05)。结论益气活血化痰方通过抑制IL-8/MUC5ac通路活化,抑制炎性反应,并降低气管平滑肌厚度,抑制气道重塑,改善肺功能。

反复铜绿假单胞菌感染诱导大鼠慢性阻塞性肺疾病模型探讨

目的探讨反复铜绿假单胞菌(PA)感染能否诱导大鼠产生慢性阻塞性肺疾病(COPD)的病理生理及病理学改变。方法将120只Wistar大鼠随机分为铜绿假单胞菌感染组(PA组)和对照组(NS组)。PA组通过气管穿刺,多次注入一定剂量铜绿假单胞菌菌液,建立大鼠慢性肺部感染模型,测定大鼠动脉血气,观察肺组织病理改变,测量气管壁厚度和血管壁厚度。结果自感染第4周开始,PA组大鼠体重较NS组显著减轻(P<0.05);自第12周开始,PA组大鼠血气PaO2显著低于NS组(0.01<P<0.05),而PaCO2明显升高(0.01<P<0.05);从第2周开始,PA组大鼠气管壁厚度显著大于NS组(P<0.05);从第4周开始,PA组大鼠血管壁厚度显著大于NS组(P<0.05);至第16周,PA组大鼠各级支气管慢性炎症明显,管壁增厚,管腔明显狭窄,有气道重构和肺气肿形成。结论反复气道感染铜绿假单胞菌可致大鼠产生COPD的病理生理及病理学改变,具有COPD的主要特征,提示该方法可能为COPD大鼠模型的建立提供一条新的途径。

补肾活血调营化痰方对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺功能及转化生长因子-β1、炎性因子的影响

目的通过建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,探讨阳和平喘颗粒对COPD大鼠模型肺功能及转化生长因子-β1(TGF-β1)、炎性因子的影响,分析可能影响病情的作用环节和途径,为缓解COPD病程进展提供研究基础。方法Wistar雄性大鼠120只,20只作为正常组[灌服生理盐水10ml/(kg·d)],其余采用气管内滴入脂多糖加烟熏双因素联合建立COPD大鼠模型,随机分为模型组[生理盐水10ml/kg·d)]、实验药物低剂量组、中剂量组、高剂量组[分别灌胃阳和平喘颗粒混悬液1.75 g/(kg·d)、3.5 g/(kg·d)、7g/(kg·d)]、阳性药物对照组(桂龙咳喘宁混悬液3.5ml/100 g),每组20只。分别于第0、8、20周检测各组大鼠肺功能,包括出潮气量(VT)、呼气峰流速(PEF)、50%潮气量时的呼气流量(EF50);检测血清和肺组织TGF-β1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)含量。结果模型组、实验药物低剂量组、中剂量组、高剂量组和阳性药物对照组8周和20周VT、EF50和PEF均低于正常组,大鼠血清和肺组织TNF-α、TGF-β1、IL-1β、IL-6和IL-8均高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);实验药物高剂量组和阳性药物对照组20周VT、EF50和PE结果均高于模型组、实验药物低剂量组、中剂量组,血清和肺组织TNF-α、TGF-β1、IL-1β、IL-6和IL-8结果均低于模型组、实验药物低剂量组、中剂量组,差异有统计学意义(P<0.05),阳性药物对照组与实验药物高剂量组各项指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论各组COPD大鼠模型肺功能均显著降低,TNF-α、TGF-β1、IL-1β、IL-6和IL-8结果显著增高,随着阳和平喘颗粒剂量的增加,COPD大鼠模型肺功能均显著提升,TNF-α及各项炎性因子水平呈现降低趋势,桂龙咳喘宁组与阳和平喘颗粒高剂量组结果相似。

慢性阻塞性肺疾病痰瘀阻肺证大鼠模型的建立

[目的]采用病证结合的造模方法建立慢性阻塞性肺疾病(以下简称慢阻肺)痰瘀阻肺证大鼠模型。[方法]利用强迫游泳、烟熏、低氧环境耗伤肺气,使其肺气虚,引起痰饮瘀血内停,建立慢阻肺痰瘀阻肺证大鼠模型。4周后测大鼠肺功能、肺动脉压、血流变及心肺病理学观察。[结果]模型大鼠的症状、肺功能、肺动脉压、血流变及心肺病理学观察符合慢阻肺痰瘀阻肺证的表现。[结论]实验采用复合因素造模方法复制的慢阻肺痰瘀阻肺证模型符合中医学和现代医学原理,具有时间短、易复制、可操作性强的特点,亦符合临床的实际情况。

慢性阻塞性肺疾病痰瘀阻肺证大鼠模型的评价

目的:对已建立的慢性阻塞性肺疾病痰瘀阻肺证大鼠模型的可信性作出评价。方法:建立大鼠慢性阻塞性肺疾病痰瘀阻肺证模型,观察硝苯地平、芪白平肺胶囊对模型动物一般情况、肺功能、肺动脉压、右心肥厚指标和病理结果等的影响。结果:模型大鼠的一般情况、肺功能、肺动脉压、右心肥厚指标和病理结果等改变均符合慢阻肺痰瘀阻肺证的病理特点。芪白平肺胶囊可显著改善模型大鼠气虚痰阻血瘀状况,明显改善其肺功能,降低肺动脉高压及右心肥厚指标等。结论:用本实验方法建立慢性阻塞性肺疾病痰瘀阻肺证大鼠模型是可行的。

平喘汤对慢性阻塞性肺疾病治疗作用的机制研究

目的:研究平喘汤对慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD)的作用机制。方法:采用香烟烟熏联合气管内注射脂多糖方法建立COPD大鼠模型,造模成功后,将100只大鼠随机分为平喘汤低、中、高剂量组、模型组、阳性对照组,每组20只,空白对照组20只。空白对照组和模型组以蒸馏水灌胃,阳性对照组以地塞米松混悬液灌胃;其余治疗组以平喘汤灌胃。每组均灌胃30天,每日1次。30天后,观察大鼠一般情况;取血清,酶联免疫法检测血清中肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor,TNF-α)、血管内皮细胞生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)、白细胞介素(Interleukin,IL)-8、IL-1β含量,Western-Blot检测大鼠肺组织血小板源性生长因子-B(Platelet-Derived Growth Factor-B,PDGF-B)的表达;同时进行苏木精-伊红染色(Hematoxylin-eosin staining,简称HE染色),病理组织观察;检测支气管肺泡灌洗液(Broncho Alveolar Lavage Fluid,BALF)中白细胞计数和分类。结果:与模型组比较,平喘汤各剂量组和阳性对照组大鼠血清中TNF-α、IL-8、IL-1β降低(P <0.01或P <0.05),且以高剂量组降低最为明显,VEGF含量升高(P <0.01或P <0.05);与阳性对照组比较,高剂量组大鼠血清中TNF-α含量明显减少(P <0.05),低剂量组、中剂量组与阳性对照组比较,差异无统计学意义。与模型组比较,阳性组、高剂量组肺泡灌洗液中白细胞总数明显降低(P <0.01或P <0.05),中剂量组和低剂量组无统计学意义,阳性组及高、中、低剂量组巨噬细胞比例均升高(P <0.05),嗜中性粒细胞百分比降低(P <0.05),肺组织中PDGF-B含量降低(P <0.01或P <0.05)。结论:平喘汤能够降低COPD模型大鼠血清中TNF-α、IL-8、IL-1β水平,增高VEGF水平,降低肺组织中PDGF-B含量,高剂量组还可以降低BALF中白细胞及中性粒细胞总数。证实平喘汤治疗COPD的作用机制可能是减少炎症介质生成和释放,抑制气道重塑,缓解气流受限程度。

大鼠慢性阻塞性肺疾病气虚自汗模型制备

目的建立大鼠气虚自汗模型,为评价药物治疗气虚自汗作用提供一个研究平台。方法以烟熏法并佐以麻黄汤造成大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)气虚自汗模型。结果大鼠COPD气虚自汗模型与临床气虚症状基本一致。结论大鼠COPD气虚自汗模型成立。

基质金属蛋白酶对大鼠慢性阻塞性肺病模型气道细胞外基质重塑的作用及影响因素

目的:研究基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制剂(TIMP-1)在慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠模型气道细胞外基质重塑中的作用及 N-乙酰半胱氨酸(NAC)、蛋白激酶 C 抑制剂 H7及转移生长因子(TGF-β)单抗干预的影响。方法:Wistar 大鼠随机分为(1)对照组;(2)COPD 模型组,采用熏香烟加气管注小量内毒素法复制 COPD 模型;(3)NAC 干预组(NAC 组);(4)H7干预组(H7组);(5)TGF-β单抗干预组。观察各组病理形态学改变;生化法测定支气管肺组织羟脯氨酸含量;免疫组化法和 RT-PCR 法测支气管肺组织 MMP-9、2及 TIMP-1,以及 TGF-βⅠ、Ⅱ受体的表达;SDA-PAGE 明胶酶谱学测定支气管肺组织 MMPs 酶活性。结果:模型组气道壁以Ⅰ型胶原为主的细胞外基质及羟脯氨酸含量较对照组显著增多,NAC 组及 TGF-β单抗组较模型组显著减少,H7组羟脯氨酸含量较模型组显著增多。模型组 MMP-9、2及 TIMP-1,以及 TGF-βⅠ、Ⅱ受体在气道上皮、肺泡巨噬细胞、肺血管内皮细胞等细胞中蛋白和(或)mRNA 表达显著增强,72 kdMMP-2及92 kdMMP-9酶原活性显著增高,三个干预组 MMP-2、9及 TIMP-1的蛋白及 mRNA 表达较模型组显著减弱,72 kdMMP-2及92 kdMMP-9酶原活性显著减低,三个干预组TGF-βⅠ、Ⅱ受体亦较模型组有不同程度减弱。结论:以Ⅰ型胶原为主的细胞外基质显著增生是 COPD 气道重塑的重要病理改变。COPD 气道细胞外基质降解及合成代谢异常活跃与气道细胞外基质重塑密切相关;NAC 可对 MMP-9/TIMP-1的失衡起调节作用,其表达及功能在一定程度上依赖 PKC 信号传导途径。抑制 TGF-β传导通路可能使胶原等细胞外基质降解及合成减少。

细胞外基质重塑在大鼠慢性阻塞性肺病模型气流阻塞中的作用

目的:制备大鼠慢性阻塞性肺病(COPD)模型,探讨气道细胞外基质(ECM)重塑的病理特点及其在气流阻塞中的作用,以及不同干预因素的影响。方法:熏香烟加气管注小量内毒素法建立大鼠 COPD 模型,观察气道重塑的病理特点,测定肺功能及血气,气道各层横截面积,支气管肺组织匀浆羟脯氨酸(Hy)含量;粘膜下成纤维细胞(Fb)、淋巴细胞及肺泡巨噬细胞计数;放免法测定血清中透明质酸、层粘连素含量。观察蛋白激酶 C 抑制剂 H7,氧自由基清除剂 N-乙酰半胱氨酸(NAC)和转化生长因子(TGF)-β单抗干预对大鼠模型气道重塑的影响。结果:所建模型的病理及病理生理学改变基本符合人类 COPD 特点,Ⅰ型胶原为主的 ECM 气道壁过度沉积;小支气管上皮层、平滑肌层截面积较对照组显著增大,三个干预组上述指标较模型组显著降低;模型组粘膜下Fb、淋巴细胞及肺泡巨噬细胞数较对照组显著增高,Fb 功能活跃。NAC 组及 TGF-β单抗组 Fb、三个干预组淋巴细胞及肺泡巨噬细胞数较模型组显著降低;模型组 Hy 含量较对照组显著增高,且分别与 FEV_(0.3)/FVC%呈显著负相关、与吸气及呼气阻力呈显著正相关,粘膜下 Fb 与 Hy 含量呈显著正相关,H7组 Hy 含量显著高于模型组,NAC 组和 TGF-β单抗组较模型组显著降低;血清层粘连素及透明质酸含量较对照组显著增高。结论:气道壁以Ⅰ型胶原为主的 ECM 过度沉积及 Fb 增生活跃是 COPD 气道重塑的主要病理改变之一;清除氧自由基和拮抗TGF-β均可减轻气道 ECM 重塑,抑制 PKC 不能减少气道壁胶原的沉积。

益气固表丸对慢性阻塞性肺病模型大鼠JAK/STAT通路影响研究

目的:观察中药复方制剂益气固表丸对COPD模型大鼠JAK/STAT通路及炎性反应表达影响,探讨益气固表丸治疗COPD的分子机制。方法:将60只鼠龄为8周的SPF级雄性Wistar大鼠随机分为3组,分别为:空白组、模型组和益气固表丸组,每组20只,其中模型组及益气固表丸组大鼠采用烟熏+脂多糖(LPS)气管内滴注方法建立COPD模型,空白组和模型组大鼠给予生理盐水灌胃,益气固表丸组大鼠给予益气固表丸相应剂量的水溶液灌胃,2次/天,连续12周。采用HE染色法检测大鼠肺组织形态学改变,ELISA法测定外周血中IL-17a、IL-23及INF-γ及RORγt表达的变化,RT-PCR方法测定肺组织JAK1、JAK3、STAT1、STAT3 mRNA表达的变化。结果:与对照组比较,益气固表丸组大鼠HE染色的炎症细胞浸润情况减轻,支气管管腔直径变宽,差异有统计学意义(P <0.01);ELISA及RT-PCR结果均显示:与空白组相比较,模型组大鼠IL-17a、IL-23、RORγt水平升高,JAK1、JAK3、STAT1、STAT3 mRNA水平升高,与模型组比较,益气固表丸组以上指标mRNA水平下降,差异有统计学意义(P <0.01)。相关性分析提示JAK1、JAK3、STAT1、STAT3与IL-17a、IL-23及RORγt相关,具有统计学意义(P <0.05)。结论:益气固表丸能够改善COPD模型大鼠肺内炎症反应,有效机制与抑制JAK/STAT通路活性有关。

两种不同染色方法对慢性阻塞性肺病大鼠模型的染色观察

目的:利用H-E染色法和Masson染色法对慢性阻塞性肺病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD)大鼠模型进行染色观察。方法:SPF级雄性SD大鼠20只,随机分为实验组和对照组,各10只。实验组大鼠置入自制熏烟染毒箱,熏过滤嘴香烟烟雾(烤烟型)。对照组大鼠不做处理。3个月后处死大鼠,取肺部组织。通过石蜡切片技术、H-E染色、Masson染色对COPD大鼠模型切片进行染色观察。结果:H-E染色显示炎细胞浸润支气管平滑肌层、肺泡壁增厚等现象。Masson染色显示肺泡壁早期纤维化形成等现象。结论:H-E染色法和Masson染色法相结合可较全面的对COPD大鼠模型的病理现象进行观察分析。

COPD模型大鼠急性加重期诱导肝脏损害的实验研究

目的:观察脂多糖(LPS)致COPD模型大鼠急性发作时对肝脏的影响。方法:清洁级健康雄性Wistar大鼠24只,随机平均分为正常组,COPD模型组及COPD急性加重组。采用改良熏香烟加气管内注脂多糖的方法建立COPD模型,造模结束后第2天滴加脂多糖建立COPD急性加重模型。6 h后进行肝功能检测,RT-PCR法检测肝肺组织γ-GCS mRNA的表达,观察肺肝病理及超微结构改变。结果:与正常组比较,COPD模型组大鼠碱性磷酸酶(AKP)无统计学意义,谷丙转氨酶(ALT)升高(P<0.05),ALB下降(P<0.05),总结合胆红素(TBIL)明显升高(P<0.01);与正常组比较,COPD急性加重组大鼠白蛋白(ALB)明显下降(P<0.01),ALT、TBIL、AKP均明显升高(P<0.01)。与COPD模型组比较,COPD急性加重组AKP、ALT均升高(P<0.05),ALB下降(P<0.05),TBIL明显升高(P<0.01)。与正常组比较,COPD模型组肺组织中γ-GCS mRNA表达水平显著增高(P<0.01),而肝组织中基因表达水平没有明显变化;COPD急性加重组肝肺组织中γ-GCS mRNA表达水平均显著增高(P<0.01),且与COPD模型组比较有显著差异(P<0.01)。肺肝两脏病理及超微结构均发生了变化。结论:COPD模型大鼠急性加重时可进一步诱导肝脏损害。