CPLX软骨毒性的追踪观察

目的我们已观察到孕妇口服环丙沙星(CPLX)后的胎儿软骨结构超微结构发生了特异性变化,即胎儿软骨细胞的空泡变性,基质丢失,并以药物浓度的存在为基础。为观察这种病变于停药后能否恢复,组织中药物是否消失,我们做了追踪观察。材料和方法搜集孕妇因外伤等流产的胎儿4例,且流产前1月左右因感染曾服用CPLX,500～600mg/次,日二次,用药5～7天。孕龄19～24周;标本采集、电镜标本处理及药物浓度的测定方法同前。结果停药1月后与停药1～2天观察到的胎儿软骨的超微结构改变相比较,4例中变性的软骨细胞均有不同程度的恢复,表现为几种不同状态的软骨细胞存在,有的软骨细胞严重空泡变性及基质丢失,有的软骨细胞轻度肿胀、细胞质中细胞器及染色质聚集现象部分恢复,有的软骨细胞结构恢复完整,各例恢复完全的细胞数也不同。4例口服CPLX1月后(即流产时)孕妇的母体静脉血、胎儿脐血及胎儿软骨中的CPLX的浓度,均为零。说明虽然CPLX很容易通过胎盘进入胎儿体内,胎儿软骨中CPLX浓度很高,但随着机体的不断代谢,至少到停药一月时已代谢完毕。结论我们观察到孕妇口服CPLX后的胎儿软骨软骨细胞的空泡变性,基质丢失胞核染色质的异常,但无软骨细胞的坏死和裂隙形成。有学者用1mg/L浓度的环丙沙星及氧氟沙星孵育成人软骨细胞2周,48小时即出现软骨细胞的坏死、空泡变性,基质丢失等,这种变化呈浓度依赖性,而对照组却无类似的改变。临床也有关节病的报道,如有儿童用环丙沙星10mg/kg治疗沙门菌肠炎,出现膝关节肿胀,48小时内恢复。均证明喹诺酮(QNS)类药物的关节软骨毒性不仅可以发生在多种动物中,而且可以发生在人中,但机率少,程度轻,可能与此类药物的种属差异及人体用药量较低有关。进一步追踪观察结果提示,孕妇口服CPLX停药后,随着时间的延长、机体的不断代谢,胎儿血浆及软骨中的药物浓度渐减少至消失,胎儿软骨的超微结构变化有不同程度的恢复,各例恢复程度的不同可能存在个体差异。相似于在动物实验中观察到软骨细胞的超微结构变化基本是可逆的,只是修复比较慢。由于目前观察的病例少,时间短,人体停药后软骨细胞及基质的结构和功能能否完全恢复,需多长时间,短时的超微结构变化的长远影响如何,有待于进一步研究。

补益脾胃元气方药对SAMP8小鼠海马突触活性带蛋白cplx1/2及stx1表达的影响

目的:观察补益脾胃元气方药对SAMP8小鼠空间学习记忆能力、突触功能相关蛋白complexin1/2(cplx1/2)、syntaxin1(stx1)表达的影响,探讨此类方药防治老年性痴呆的作用机制。方法:将3月龄SAMP8小鼠随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组、补益脾胃元气方药组(人参汤组、洗心汤组、大补元煎组),另以3月龄SAMR1小鼠作为空白对照组,连续灌胃给药10周后进行相关指标检测。采用Morris水迷宫实验观察各组小鼠空间学习记忆能力。免疫组化和Western blot检测小鼠海马区cplx1/2、stx1表达。结果:与模型组比较,治疗组逃避潜伏期显著缩短(P<0.01),穿台次数显著增加(P<0.05),目的象限活动时间显著延长(P<0.01)。免疫组化和Western blot结果表明,补益脾胃元气方药各组小鼠海马cplx1/2、stx1表达较模型组显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:补益脾胃元气方药可明显改善SAMP8小鼠空间学习记忆能力,其机制可能与影响小鼠海马突触功能相关蛋白的表达有关。

CPLX2基因启动子区甲基化与精神分裂症相关性研究

目的 Complexins蛋白在神经递质释放这一过程中起着关键的调控作用。既往研究显示精神分裂症患者脑部Complexin2 mRNA及蛋白水平显著下降。本研究旨在进一步探索Complexin2(CPLX2)基因启动子区甲基化与精神分裂症的相关性。方法采用Taqman探针qPCR(Methylight)技术测定116名男性精神分裂症患者及114名男性健康对照者CPLX2基因启动子区甲基化状况。对精神分裂症患者采用利培酮2~6mg治疗,待患者精神病性症状消失后再次测定CPLX2基因启动子区甲基化状况。结果精神分裂症患者CPLX2基因启动子区甲基化率显著高于正常对照组(P<0.001);经治疗,精神病性症状消失后,CPLX2基因启动子区甲基化率显著下降(P<0.001)。结论 CPLX2基因启动子区甲基化程度增高与精神分裂症密切相关。

钇(Ⅲ)-环丙沙星配合物的荧光性质及其应用

研究了稀土钇离子（Y3＋）与环丙沙星（CPLX）体系的荧光特性,Y3＋可使体系的荧光强度明显增强,由此建立测定环丙沙星药物的新方法。对CPLX-Y3＋体系荧光增强的机理进行了初步探讨,并系统研究了CPLX-Y3＋体系荧光强度的影响因素。在pH=5.5的Tris-HC1缓冲溶液中,Y3＋浓度为5.0×10-5mol/L时,环丙沙星的浓度与体系的荧光强度呈良好的线性关系,线性范围为1.0×10-92.0×10-6mol/L,检出限为3.1×10-11mol/L（S/N=3）。该方法可用于人体尿药浓度和环丙沙星片剂的直接测定。

氟喹诺酮类药物间接竞争ELISA检测方法的建立

以人工合成的CPLX-OVA为检测抗原、CPLX标准品为竞争半抗原,建立间接竞争ELISA检测方法。结果表明:理想的包被抗原质量浓度为0.25μg/mL,CPLX抗血清稀释倍数为1∶16000,酶标二抗稀释倍数为1∶4000,最小检测量为31.3 ng/mL,得到回归方程(y=-19.386x+95.648,R2=0.9875)和标准曲线,且对甲磺酸达氟沙星和甲磺酸培氟沙星有特异性识别,对氧氟沙星、盐酸洛美沙星、诺氟沙星、恩诺沙星识别较弱。该方法可用于多种氟喹诺酮类药物残留筛选检测。

乳酸环丙沙星注射剂临床疗效观察

本文采用随机对照开放临床试验,对乳酸环丙沙星(Ciprofloxacin,CPLX)注射剂进行了临床评价,共治疗各种细菌性感染100例,其中50例与头孢噻肟钠(Cefotaxime,CTX)相对照。结果显示CPLX组与对照CTX组疗效各为91.0％和92.0％(P>0.05),无显著性差异。两组细菌清除率各为90,8％和88.6％(P>0.05),无显著性差异。不良反应分别为15％和8％。不良反应程度轻微,主要表现为注射局部反应和消化道反应,其中注射局部反应CPLX略高于CTX。体外抗菌活性表明CPLX对大多数革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌具有良好的抗菌活性。

环丙沙星与氧氟沙星注射液治疗细菌性感染的疗效观察

以乳酸环丙沙星（ＣＰＬＸ）注射液和氧氟沙星（ＯＦＬＸ）注射液随机分组治疗各种细菌性感染４０例及４２例，并以注射用头孢噻肟钠（ＣＴＸ）治疗４９例作对照。三组平均年龄、体重、疗程及病情程度相比无显著性差异，具可比性。病种分布以消化道感染最多，共８１例，占总数的６１．８％。三组１３１例病人细菌阳性率为９４．７％。一疗程ＣＰＬＸ组、ＯＦＬＸ组、ＣＴＸ组治愈率分别为８７．２％、８３．３％、７１．４％，有效率分别为８７．２％、９７．６％、８３；７％；细菌清除率分别为８９．２％、９７．４％、８９．８％。三组治愈率及细菌清除率比较无显著性差异，有效率比较Ｐ＜０．０５。体外抗菌活性检测示ＣＰＬＸ对伤寒沙门氏菌、痢疾志贺氏菌的ＭＩＣ卯均为０．１２μｇ／ｍｌ，ＯＦＬＸ则均为０．２５μｇ／ｍｌ。不良反应发生率三组分别为１５．０％、９．５％、１２．２％（ＰＬＸ组和ＯＦＬＸ组主要是静脉炎。本文结果表明乳酸环丙沙星注射液和氧氟沙星注射液是治疗多种细菌所致中、重度感染的安全有效的抗菌药物。

外输泵介导的金黄色葡萄球菌对环丙沙星耐药性的确证

对金葡球菌标准菌株(ATCC25923)和3株临床分离金葡球菌进行环丙沙星(CPLX)耐药性诱导,并通过琼脂稀释法测定环丙沙星对各菌株最低抑菌浓度(MIC)。利用改良间氯苯腙羰基氰化物(CCCP)结合荧光分光光度法检测了耐药性诱导菌株及其母株对环丙沙星的摄取情况。CCCP的作用不同程度地增加了各菌株对环丙沙星的摄入量,确证了金葡球菌中外输泵介导对环丙沙星耐药性的存在。达到稳态浓度后,耐药性较强的菌株对环丙沙星摄入量低于耐药性较弱或标准菌株对环丙沙星的摄入量。

磷霉素与环丙沙星联用的体外抗生素后效应研究

目的对比研究磷霉素单用与联用环丙沙星的抗生素后效应 (PAE)。方法采用微量稀释法测定最低抑菌浓度 (MIC) ,微量接种菌落计数法测定PAE。结果磷霉素对金葡球菌有明显的PAE ,对大肠埃希菌呈浓度依赖性 ,与环丙沙星合用 ,浓度在 4MIC以上时呈现明显的相加作用 (P <0 0 1)。结论两药联用时抗菌作用增强。

Complexin-1/2过表达重组载体对阿尔茨海默病小鼠记忆损伤的实验研究

目的构建Complexin-1/2(CPLX-1/2)基因的重组腺相关病毒过表达载体p AAV-CPLX-1/2并研究其在阿尔茨海默病记忆损伤中的作用。方法将用Oligo 7软件对Genbank上小鼠CPLX-1/2m RNA的CDS两端序列进行分析,合成CPLX-1/2基因,构建过表达载体并转化至大肠杆菌Top10;选取正确的克隆进行PCR和测序鉴定。重组腺相关病毒载体测序正确后,转染AAV293细胞,包装腺相关病毒。将重组腺相关病毒经脑立体定位注射到三转基因阿尔茨海默病(3XTg-AD)小鼠海马CA3区,经免疫组化和Western-Blot检测CPLX-1/2蛋白表达情况,水迷宫检测CPLX-1/2过表达对3XTg-AD小鼠记忆的影响。结果 PCR及测序结果表明成功构建了含小鼠CPLX-1/2基因的重组腺相关病毒表达载体。CPLX-1/2在海马CA3表达显著增加。CPLX-1/2过表达显著改善3XTg-AD小鼠的记忆损伤。结论本研究成功构建了CPLX-1/2重组腺相关病毒过表达载体并在整体动物水平成功高效表达;CPLX-1/2过表达可显著改善3XTg-AD小鼠空间记忆的损伤。为在整体动物水平深入研究CPLX-1/2的功能提供了新的手段;研究结果提示CPLX-1/2可能作为AD记忆损伤治疗的关键靶点。

母子分离应激对complexin Ⅱ基因缺陷鼠快速移动行为的影响

本文旨在探讨母子分离应激对complexin Ⅱ基因缺陷(Cplx2-/-)小鼠快速移动行为的影响。实验分4组:应激Cplx2-/-组、应激Cplx2+/+组、无应激Cplx2-/-组和无应激Cplx2+/+组。无应激组小鼠正常饲养,应激组小鼠从出生后第2日至第21日每天施加母子分离应激。小鼠生长到第4周时,利用聚合酶链反应技术检测其基因型。4组小鼠腹腔注射激动剂去氧麻黄碱或生理盐水后,采用EthoVision系统对小鼠快速移动行为进行记录。结果显示,应激Cplx2-/-组、应激Cplx2+/+组、无应激Cplx2-/-组和无应激Cplx2+/+组注射去氧麻黄碱后,与生理盐水对照组相比,均出现快速移动行为不同程度的增多(P<0.01);与无应激Cplx2-/-组相比较,应激Cplx2-/-组注射去氧麻黄碱后快速移动行为增多更为明显(P<0.001);与应激Cplx2+/+组相比,应激Cplx2-/-组注射去氧麻黄碱后的快速移动行为增多更为明显(P<0.001)。本实验证实小鼠的行为可能受母子分离应激和Cplx2基因等因素的多重影响。

六株与沙门菌属具有相同抗原的弗劳地枸橼酸杆菌的实验研究

目的:了解分析具有双重菌属抗原的弗劳地枸橼酸杆菌,排除沙门菌的检出。方法:增菌分离培养后,以血清学为初试验,全自动细菌生化分析仪为确定试验结果。结果:15份检材中检出6株弗劳地枸橼酸杆菌,沙门菌属A-I和A-F"O"多价诊断血清试验阳性。"O"和"H"因子血清阴性,生化结果可靠性为99.99%弗劳地枸橼酸杆菌。结论:本试验所检出的弗劳地枸橼酸杆菌,虽然沙门菌A-I和A-F"O"多价诊断血清试验阳性,但与生化结果不相符,确诊为6份病人肛拭和1份剩余食物检出弗劳地枸橼酸杆菌。