CPNE3在胃癌中高表达并与患者的预后不良相关

目的明确CPNE3在胃癌组织中表达情况与患者远期预后的关系,探究其调控胃癌细胞凋亡的作用和分子机制。方法纳入2013年2月~2017年10月104例于我院行胃癌根治术的患者,通过癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)的公共数据和免疫组织化学染色分析CPNE3在胃癌中的表达和对患者肿瘤进展与远期预后的影响。GO富集分析预测CPNE3在胃癌中的生物学功能。采用干扰和过表达CPNE3以及对照慢病毒载体转染MGC803细胞,获取对照组(NC)、敲低组(si-CPNE3)、过表达组(LV-CPNE3)细胞,采用PI3K/AKT抑制剂(LY294002)干预LV-CPNE3组细胞获取LY294002组。流式细胞术分析细胞凋亡,Westernblot检测Bax、CleavedCaspase-3、Bcl-2、p-PI3K和p-AKT表达。结果TCGA预测分析和免疫组化结果显示CPNE3在胃癌中高表达(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示CPNE3高表达组患者5年生存率显著降低(P<0.01)。单因素及Cox回归分析显示CPNE3高表达、CEA≥5μg/L、CA19-9≥37kU/L、T3-T4期和N2-N3期是影响胃癌根治术后5年生存率的独立危险因素。ROC曲线分析显示CPNE3预判术后5年死亡的敏感度为79.59%,特异性为74.55%(P<0.05)。GO富集分析预测显示CPNE3可能与负向调控胃癌细胞凋亡有关。体外实验显示,si-CPNE3组的细胞凋亡率以及Bax、Cleaved Caspase-3表达的增多,而Bcl-2表达减少;LV-CPNE3组则结果相反(P<0.05)。机制分析显示,si-CPNE3组p-PI3K、p-AKT表达降低,LV-CPNE3组则增多(P<0.05);另外,LY294002减弱了CPNE3过表达对胃癌细胞凋亡的抑制作用(P<0.05)。结论CPNE3在胃癌组织中高表达且对患者的远期预后具有预测价值,可能与其通过激活PI3K/AKT信号通路抑制胃癌细胞的凋亡有关。

CPNE3蛋白在肺腺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨CPNE3蛋白在肺腺癌组织中的表达及其临床意义。方法收集肺腺癌组织标本82例(肺腺癌组)、癌旁肺组织标本20例(对照组),采用免疫组化SP法检测CPNE3蛋白的表达情况,并分析CPNE3蛋白在不同性别、年龄、肿瘤分化程度、大小、分期及淋巴结转移患者中的表达差异。结果肺腺癌组CPNE3蛋白高表达53例(64.6%)、低表达29例(35.4%),对照组高表达0例(0%)、低表达20例(100%),肺腺癌组CPNE3蛋白高表达率明显大于对照组(χ2=12.67,P<0.01)。CPNE3蛋白的表达在不同TNM分期、是否淋巴结转移患者及不同组织标本中的差异均有统计学意义(P<0.05或0.01);在不同性别、年龄、分化程度及肿瘤大小患者中的差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 CPNE3蛋白在肺腺癌组织中表达增高,并与肺癌的分期、淋巴结转移相关;CPNE3蛋白可作为评估肺癌患者病变范围和预后的标志物。

CPNE3调控非小细胞肺癌细胞增殖、迁移、侵袭及其相关机制研究

目的 探讨CPNE3对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)细胞株A549增殖、迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法 通过癌症和肿瘤基因图谱(the cancer genome atlas, TCGA)的公共数据分析CPNE3在NSCLC中的表达及其与患者预后的关系。利用Western blot方法检测CPNE3在正常支气管上皮细胞株BEAS-2B和肺癌细胞株中的表达。在A549细胞中转染CPNE3的干扰序列,利用CCK-8、克隆形成、Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力,Western blot法检测下游增殖、转移相关蛋白水平的变化。构建CPNE3过表达稳转细胞株,取10只雌性BALB/c nude小鼠分为对照组和过表达CPNE3组(n=5),构建裸鼠皮下移植瘤模型,观察过表达CPNE3对A549细胞成瘤能力的影响。结果 NSCLC组织中CPNE3表达升高(P<0.05),其高表达与患者的不良预后相关(P<0.01),CPNE3在肺癌细胞株中表达升高(P<0.01),干扰CPNE3后细胞的增殖能力、克隆形成能力下降(P<0.001,P<0.01),迁移和侵袭能力下降(P<0.01,P<0.01),并伴随着p-AKT、p-ERK和p-EGFR蛋白的下调(P<0.001,P<0.001,P<0.01)。过表达CPNE3在体内促进移植瘤的生长(P<0.001),并伴随着p-AKT、p-ERK和p-EGFR蛋白的上调(P<0.05,P<0.05,P<0.01)。结论 干扰CPNE3可以抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力,过表达CPNE3可以增强A549细胞在体内的增殖能力,其作用机制与EGFR信号通路及其下游的AKT/ERK信号通路相关。

动态监测外周血CPNE3对急性心肌梗死的诊断价值

目的动态监测急性心肌梗死(AMI)患者外周血CPNE3基因表达,探讨其对AMI的早期诊断价值。方法将2016年7月~2017年7月于本院就诊的154例胸痛患者,按照AMI诊断标准分为AMI组48例和非AMI组106例,另选择60例健康人群作为对照组。AMI组分别于入院即刻、入院后4h、6h、12h、24h采集肘静脉血,非AMI组和对照组于入组时抽取静脉血,采用胶乳增强免疫比浊法检测血清cTnI浓度,电化学发光法检测血清CK-MB含量,实时荧光定量PCR检测外周血CPNE3mRNA相对表达量;利用受试者工作曲线(ROC)计算CPNE3mRNA表达对AMI的早期诊断效能。结果与非AMI组和对照组比较,AMI组的吸烟比例、高血压和糖尿病发病率增加,TC、TG、LDL-C、CK-MB、cTnI升高,HDL-C降低,差异有统计学意义(P<0.05)。入院即刻AMI组外周血CPNE3mRNA表达明显低于非AMI组和对照组(P<0.05),非AMI组和对照组CPNE3mRNA表达的差异无统计学意义(P>0.05)。cTnI入院后6h达峰值,CK-MB在患者入院后12h达峰值,CPNE3mRNA在入院后4h降至最低值;与入院即刻比较,入院后各时段AMI组cTnI、CK-MB明显升高,CPNE3mRNA明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。CPNE3mRNA表达与cTnI呈负相关(r=–0.198,P=0.016),CPNE3mRNA表达与CK-MB也呈负相关(r=–0.227,P=0.029)。ROC曲线分析显示,CPNE3诊断AMI的ROC曲线下面积(AUC)为0.910,敏感度为97.9%,特异度为75.0%;cTnI的AUC为0.801,敏感度为68.7%,特异度为89.6%;CK-MB的AUC为0.912,敏感度为75.0%,特异度为95.8%。结论CPNE3可作为早期诊断AMI的指标,其诊断效能优于cTnI,与CK-MB相当。实时荧光定量PCR检测外周血CPNE3时间短,可满足临床急诊需求。