断乳后饲料构成对大鼠肝脏CPT-ⅠmRNA表达影响

目的研究断乳后饲料构成对大鼠肝脏肉碱棕榈酰转移酶-I(CPT-I)mRNA表达的影响。方法新生Wistar雄性大鼠24 d断乳,按体重随机分为A、B、C、D 4组,分别喂饲高碳水化合物、高蛋白质、高不饱和脂肪酸和高饱和脂肪酸构成饲料3周后,基础饲料喂养2周,A组按体重随机再分为A1、A2 2组。A1组喂饲基础饲料作为对照组,A2和B、C、D 4组给予高脂饲料喂养6周,A2组作为高碳水化合物组。动态检测大鼠的体重、体脂含量、血糖及肝脏肉碱棕榈酰转移酶-I mRNA水平。结果实验末期,C组大鼠体重、体脂含量和血糖均明显低于A2组(P<0.05);B组大鼠体重和体脂含量明显低于A2组(P<0.05),但血糖水平高于A2组;D组大鼠体重明显低于A2组(P<0.05),但血糖和体脂含量与A2组差异无统计学意义(P>0.05)。动态观察表明,C组大鼠CPT-I mRNA水平持续升高,且在实验末期明显高于其他组。结论断乳后进食高不饱和脂肪酸构成饲料可能通过持续增加CPT-I基因表达,抑制大鼠肥胖形成。

束缚应激对大鼠血脂及肝脏PPARα、L-CPT-ⅠmRNA和蛋白表达的影响

目的观察束缚应激后大鼠血脂和肝脏过氧化酶体增殖物激活型受体(PPARα)、肝型肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ(L-CPT-Ⅰ)mRNA和蛋白的变化,初步探讨应激与血脂的关系。方法健康雄性Wistar大鼠,分为正常对照组(C)、束缚1周组(R1)、束缚2周组(R2)和束缚4周组(R4),每组8只。全自动生化仪测定血脂水平,铜显色法测定血清中游离脂肪酸(FFA)水平。分别用RT-PCR和Western Blot方法检测肝脏PPARα及其靶基因L-CPT-ⅠmRNA和蛋白表达水平。结果束缚应激组皮质醇和去甲基肾上腺素水平均明显高于对照组(P<0.01)。R1、R2、R4组大鼠血清FFA分别为(836.33±90.32)、(795.01±62.12)、(829.56±72.64)μmol/L,均明显高于C组〔(620.83±52.21)μmol/L,P<0.01〕。同样,R1、R2、R4组大鼠血清TG和HDL-C均明显高于C组(P<0.05,P<0.01)。与C组相比,R1、R2、R4组大鼠肝脏中PPARα和L-CPT-ⅠmRNA和蛋白表达均增加(P<0.01)。各应激组间这些指标变化差异均无显著性(P>0.05)。结论束缚应激后大鼠血清FFA、TG和HDL-C水平升高,这可能与其肝脏PPARα及L-CPT-Ⅰ表达增加有关。

胰岛素、胰高血糖素对体外培养犊牛肝细胞CPT-Ⅰ和CPT-ⅡmRNA表达的影响

体外原代培养犊牛肝细胞,添加不同浓度的胰岛素(insulin,INS)(0、1、10、100、1 000nmol/L)和胰高血糖素(glucagon,GLN)(0、1、10、100、1 000nmol/L),每个处理做3个重复,分别培养1h后,提取总RNA。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法,检测肉碱棕榈酰转移酶Ⅰ(carnitine palmitoyl transferase,CPT-Ⅰ)和肉碱棕榈酸转移酶Ⅱ(carnitine palmitoyl transferase,CPT-Ⅱ)mRNA表达的变化。结果显示,随着培养液中INS含量的升高,肝细胞中CPT-ⅠmRNA和CPT-ⅡmRNA的表达量逐渐降低,呈现一定的剂量依赖性。随着培养液中GLN含量的升高,肝细胞中CPT-ⅠmRNA和CPT-ⅡmRNA的表达量均升高,呈现一定的剂量依赖性,且当GLN的添加浓度高于100nmol/L时,CPT-ⅠmRNA和CPT-ⅡmRNA的表达量显著升高(P<0.01)。结果表明,INS可在一定程度上抑制脂氧化关键酶的表达,GLN可显著促进脂氧化关键酶的表达。

孕期补充二十二碳六烯酸对母鼠脂肪代谢及CPT-Ⅰ mRNA表达的影响

目的探讨孕期补充二十二碳六烯酸(DHA)对母鼠脂肪代谢和肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ(CPT-Ⅰ)mRNA表达的影响。方法将SD雌鼠按体重随机分成A、B、C3组,孕期分别食用补充高剂量DHA膳食(A)、补充低剂量DHA膳食(B)、普通膳食(C),待母鼠分娩,实验结束。观察母鼠妊娠期间体重变化及各组子鼠出生数量、出生体重情况,检测母鼠产后肾周脂肪含量、血清甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)、血清高密度脂蛋白(HDL-C)水平、瘦素(Leptin)及肝脏组织中CPT-ⅠmRNA的表达丰度。结果各组孕鼠妊娠时间、产子数量、子鼠出生体重均无明显差异,但A、B组的母鼠产后血清甘油三酯水平低于C组;A组母鼠孕期增重量、肾周脂肪含量、总胆固醇、瘦素水平均明显低于C组;A、B组母鼠产后肝脏组织的CPT-ⅠmRNA水平高于C组。结论孕期补充DHA有调节母体血脂、减少体内脂肪含量的作用,而CPT-Ⅰ基因表达的上调可能是其一潜在机制。

早期饲料构成对大鼠甲状腺素及肉碱棕榈酰转移酶-ⅠmRNA表达的影响

目的:研究早期饲料构成对高脂膳食大鼠体重、体脂含量、血糖、甲状腺素FT4及肝脏肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ(CPT-Ⅰ)mRNA水平的影响。方法:新生Wistar雄性大鼠24d断乳,按体重随机分为A、B、C、D四组,分别给予高碳水化合物构成的基础饲料、高蛋白质、高不饱和脂肪酸、与高饱和脂肪酸构成的饲料喂养3w后,基础饲料喂养2w。按体重将A组随机分为A1、A2两组。A1组喂饲基础饲料作为对照组,A2与B、C、D组给予高脂饲料喂养6w,结束实验;A2组为高碳水化合物对照组。每组32头大鼠,动态观察体重、体脂含量、血糖、甲状腺素(FT4)及肝脏CPT-ⅠmRNA水平。结果:实验末期,C组大鼠体重、体脂含量和血糖显著低于A2组(P<0.05)、甲状腺素FT4水平明显高于A2组(P<0.05);B组体重、体脂含量明显低于A2组(P<0.05),甲状腺素FT4水平明显高于A2组(P<0.05),但血糖水平高于A2组(P>0.05);D组大鼠体重明显低于A2组(P<0.05),血糖、体脂含量和甲状腺素FT4水平与A2无差异(P>0.05)。动态观察表明,实验中C组大鼠肝脏CPT-ⅠmRNA水平持续升高。结论:早期饲料构成可能通过影响甲状腺素水平、持续改变CPT-Ⅰ基因表达,影响高脂膳食大鼠的体重和体脂含量。

CPT-11联合5-Fu/FA治疗晚期大肠癌

目的研究CPT-11(伊立替康)联合5-Fu(5-氟脲嘧啶)/FA治疗晚期大肠癌的疗效及其不良反应,及拓扑异构酶-1(TopoⅠ)阳性对CPT-11的疗效是否有预测作用。方法28例晚期大肠癌患者接受治疗CPT-11 180 mg/m2,静脉滴注,第1天;FA 200 mg/m2,静脉滴注,第l^2天;5-Fu 400 mg/m2静脉推注,5-Fu 600 mg/m2静脉滴注22 h,第1~2天,每2周重复1次(l个周期)的方案治疗,4个周期后评价疗效。结果在27例可评价疗效的患者中,CR 1例,PR 7例,SD 8例,PD 11例,有效率29.62%。经卡方检验,TopoⅠ阳性组及阴性组有效率、疾病控制率及中位TTP比较,均无显著性差异。Ⅲ~Ⅳ度毒性反应以骨髓毒性及延迟性腹泻为著。结论CPT-11联合5-Fu治疗晚期大肠癌有一定疗效,且毒性可以耐受。TopoⅠ阳性组及阴性组治疗反应相仿。

抗癌新药——拓扑异构酶Ⅰ抑制剂

目的：阐述３种拓扑异构酶Ⅰ抑制剂，依莲洛特肯、拓扑特肯及９氨基喜树碱的药理及临床疗效。方法：用经典的临床前及临床试验方法。结果：①依莲洛特肯（ＣＰＴ１１）体内转变为ＳＮ３８而显效。对小鼠Ｓ１８０，Ｌｅｗｉｓ肺癌、胰癌Ｏ３、黑色素瘤Ｂ１６、结肠癌３８及多种人癌裸鼠移植瘤均有良效。用量１００ｍｇ／（ｍ２·周）或３５０ｍｇ／（ｍ２·３周）。临床上对非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、结直肠癌、卵巢癌、淋巴瘤类等有效，合用药物常为顺铂（ＤＤＰ）、鬼臼乙叉甙（ＶＰ１６）、紫杉醇等。不良反应主要是骨髓抑制及下泻。②拓扑特肯（ＴＰＴ），其下泻副作用可用洛哌胺纠正。多用１．５ｍｇ／（ｍ２·ｄ）×５静滴。临床上对ＮＳＣＬＣ、前列腺癌、卵巢癌、结直肠癌等有效。③９氨基喜树碱（９ＡＣ），研究刚开始。结论：喜树碱衍化物具拓扑异构酶Ⅰ抑制作用，是有希望的抗癌药物。

共轭亚油酸对蛋鸡生产性能、蛋壳质量和血清生化指标的影响

为了研究共轭亚油酸(CLA)对蛋鸡生产性能和蛋壳质量的影响及机理,试验选用40周龄健康、体重和产蛋率相近的海兰白蛋鸡480只,采用单因素试验设计,随机分为4组,每组3个重复,每个重复40只,试验组分别添加0.5%、1.0%和2.0%的CLA,对照组不添加,试验期8周。试验结束时,每组选6只采血并屠宰,测定血清中三碘甲腺原氨酸(T3)、四碘甲腺原氨酸(T4)、皮质醇、雌二醇(E2)、钙离子、磷离子含量和碱性磷酸酶(ALP)活性及肝脏肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT-Ⅰ)活性。结果表明:1)各试验组蛋鸡生产性能与对照组均差异不显著(P>0.05)。2)各试验组蛋壳强度均显著大于对照组(P<0.05),蛋壳厚度均差异不显著(P>0.05)。3)2.0%CLA组蛋鸡血清T3、T4、皮质醇和E2含量显著高于对照组及0.5%和1.0%CLA组(P<0.05);各试验组蛋鸡血清钙、磷离子浓度与对照组差异不显著(P>0.05);0.5%和1.0%CLA组蛋鸡血清ALP活性显著高于对照组(P<0.05)。4)1.0%和2.0%CLA组蛋鸡肝脏CPT-Ⅰ活性显著低于对照组(P<0.05)。由此可见,在本试验条件下,饲粮添加1.0%的CLA能显著提高蛋鸡血清中ALP活性,并在一定程度上促进E2的分泌,显著提高蛋壳强度,且不影响蛋鸡的生产性能。

脂肪酸代谢酶在坏死型高脂血症性急性胰腺炎大鼠肝脏组织中的表达及意义

目的:动态观察脂肪酸代谢及转移酶(SCD-1、CPT-Ⅰ和CD36)在坏死型高脂血症性急性胰腺炎(HLP)大鼠肝脏组织中的表达并探讨其意义。方法:采用胰管内注射5%牛磺胆酸钠诱导高脂血症大鼠产生坏死型HLP大鼠模型。制模后第6、12、24h分别处死大鼠,每组6只大鼠。对照组仅建立坏死型急性胰腺炎大鼠模型。测定血清淀粉酶和胰腺组织病理学评分观察大鼠胰腺组织炎症程度。RT-PCR检测肝脏组织SCD-1、CPT-Ⅰ和CD36mRNA表达;免疫组化检测肝脏组织SCD-1蛋白表达。结果:HLP组大鼠血清淀粉酶水平低于对照组;病理学评分示HLP组大鼠急性胰腺炎程度加重。RT-PCR和免疫组化分析示HLP组大鼠肝脏组织中SCD-1mRNA和蛋白表达显著低于对照组;RT-PCR检测示HLP组大鼠肝脏组织中CPT-Ⅰ和CD36mRNA表达略高于对照组。结论:HLP大鼠肝脏脂肪酸代谢及转移酶异常表达,加重了肝脏组织细胞内外的脂质代谢紊乱,是加重坏死型急性胰腺炎胰腺组织损伤的重要机制之一。

PTEN过表达对奶牛肝细胞脂肪酸氧化代谢的影响

目的探讨PTEN过表达对奶牛肝细胞脂肪酸氧化代谢的影响。方法构建PTEN过表达的重组腺病毒载体,病毒扩增后,感染犊牛原代肝细胞,并设空白对照组(加入PBS)和阴性对照组(感染阴性对照腺病毒AD-GFP),感染48 h后,荧光定量PCR检测细胞中PTEN、脂肪酸氧化代谢转运主要基因CPTⅠ、CPTⅡm RNA的表达水平,Western blot检测相应蛋白表达水平。结果重组腺病毒载体经酶切鉴定证明构建正确。过表达PTEN基因后,可升高CPTⅠ和CPTⅡ基因m RNA和蛋白的表达量(P<0.01)。结论 PTEN通过调节脂肪酸氧化酶转录和翻译水平,对脂肪酸在肝细胞内的氧化代谢过程进行调节,其有望作为临床有效的生物调控药物,用于治疗奶牛脂肪肝。