CPU86017及其旋光异构体对L-甲状腺素致大鼠心肌病异常的calcineurin和NFκB基因表达的抑制作用(英文)

目的:研究CPU86017及其旋光异构体对L-甲状腺素致大鼠心肌病异常的calcineurin和NFκB基因改变,并比较CPU86017及其旋光异构体对它们的作用。方法:大鼠随机分成7组,每日给予L-甲状腺素(0.2 mg.kg-1,sc)共10 d造成心肌病模型,CPU86017及其旋光异构体(SR、SS、RS、RR)(4 mg.kg-1,sc)在d 6连续给药5 d。动物处死后测定心脏指数,取大鼠心脏测定心肌组织中氧化应激指标,NO和iNOS的活力,大鼠左心室心肌Calci-neurin、NF-κB的基因表达由半定量逆转录酶PCR方法测定。结果:L-甲状腺素致大鼠心肌病模型组心肌明显肥大,氧化应激增强,NO含量减少,iNOS活力增强,Calcineurin和NF-κB基因表达上调。给予CPU86017及其旋光异构体能不同程度地改善心肌中NO含量及iNOS活力,减轻氧化应激,可以下调这些基因的表达,其中SR比其它旋光异构体疗效好。结论:Calcineurin和NF-κB可能对L-甲状腺素所致大鼠心肌病中细胞内钙调节起着重要的作用,CPU86017及其旋光异构体SR对L-甲状腺素所致大鼠心肌病具有保护作用,该作用与抑制心肌Calci-neurin、NF-κB基因的表达、抑制NOS及抗氧化有关。

CPU86017及其旋光异构体对抗异丙肾上腺素对小鼠心肌的损害作用

目的:比较口服给CPU86017(对氯卞基四氢小檗碱)及其C-13a旋光异构体(SR和SS)对抗异丙肾上腺亲(ISO)所致小鼠心肌损害作用。方法:连续皮下注射ISO(1 mg·kg^(-1))10 d建立心肌肥厚模型,在d5～d10各治疗组分别灌胃给予普萘洛尔(5 mg·kg^(-1))、CPU 86017(40 mg·kg^(-1)),SR+SS(40 mg·kg^(-1))和SS(40 mg·kg^(-1))。末次给药24 h后取血处死小鼠。测定心重指数(全心重量/体重)和左心室重量指数(左心室重量/体重);左心室匀浆中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活力;血清中谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活力。结果:CPU86017及SR,SS异构体均可显著逆转ISO模型组升高的心重指数,心肌中过度增加的MDA水平及降低的SOD活力,并显著降低血清中升高的AST,CK和LDH水平,其治疗效果与普奈洛尔相当。结论: CPU86017及其旋光异构体均明显对抗ISO所致的心肌肥大性损害作用。

CPU86017对肥厚豚鼠心室肌细胞L-型钙电流的影响

目的 :观察药物CPU86 0 17对左 甲状腺素 (L thy)所致的肥厚豚鼠心室肌细胞L 型钙电流的影响。方法 :ipL thy ,诱导豚鼠心肌肥厚 ,用全细胞膜片钳技术测定CPU86 0 17对心室肌细胞L 型钙电流强度和密度的影响。结果 :终浓度为 30 μmol/L的CPU86 0 17对正常豚鼠心室肌细胞L 型钙电流强度的抑制率达 74 2 1% ;肥厚组 ,终浓度为 30 0 ,10 0 ,3 3μmol/LCPU86 0 17均能明显抑制钙电流强度 ,抑制率分别为 6 7 94 % ,4 3 2 5 % ,2 7 0 7%。结论 :CPU86 0 17可抑制正常和肥厚豚鼠心室肌细胞膜上的L 型钙电流 ,可减轻肥厚所致的钙超载 ,有利于预防病变心脏的心律失常。

CPU86017及其手性化合物(7S,13R)-CPU86017对兔心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及药动学比较

目的:比较药物CPU86017及其手性化合物(7S,13R)-CPU86017对兔心肌缺血/再灌注损伤的保护作用和药动学差异。方法:30只新西兰白兔随机分为5组:假手术对照组(组1),缺血再灌注模型组(组2),阳性对照药普奈洛尔组(组3),CPU86017干预组(组4),(7S,13R)-CPU86017干预组(组5)。再灌注结束后取心脏测定梗死区心肌中LDH,GOT及CK的活力,并于给药后不同时间点取血,用HPLC法测CPU86017和(7S,13R)-CPU86017的血药浓度。结果:组1的GOT,CK和LDH活力分别为每毫克蛋白(689±54.3)U,每毫升蛋白(372.9±61.1)U和每克蛋白(62 696.4±478.4)U,组2的各项酶水平均较组1显著降低(P<0.01),心肌梗死损害明显。组4和组5的各酶水平显著提高(P<0.05),其中,(7S,13R)-CPU86017逆转梗死区心肌酶水平降低的作用要优于CPU86017(P<0.05)。兔腹腔注射CPU86017或(7S,13R)-CPU86017后,血药浓度按一房室模型拟合较佳。药动学研究表明,(7S,13R)-CPU86017比CPU86017具有更高的AUC。结论:对映体(7S,13R)-CPU86017比CPU86017具有更好的药理学和药动学特性。

L-甲状腺素增强氧化应激及四氢小檗碱衍生物CPU86017的对抗作用

目的:探讨L-甲状腺素对氧化应激状态的诱导作用及四氢小檗碱衍生物CPU86017的抗氧化应激作用.方法:将实验大鼠分为正常组、L-甲状腺素组(L-甲状腺素0.4 mg/kg,ip,连续10天)和CPU86017治疗组(L-甲状腺素0.4 mg/kg,ip,连续10天.第8～10天时,加用 CPU86017 80 mg/kg,po),至第11天时,取其肾脏制匀浆和线粒体液,测定匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、黄嘌呤氧化酶(XOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性,判别L-甲状腺素是否能造成模型动物的氧化应激状态.在各组肾线粒体液中分别加入Fenton 's试剂,测定肾线粒体液中的MDA含量,判断Fenton 's试剂对不同组肾线粒体的氧化应激损伤程度.结果:甲亢大鼠肾脏组织中氧化应激呈明显增强状态,其MDA和XOD活性增强;GSH-PX和CAT活性降低.CPU86017可明显改善氧化应激,并且在体外能部分对抗Fenton 's试剂对大鼠肾线粒体的脂质过氧化反应.结论:L-甲状腺素能明显增强氧化应激;而CPU86017具有良好的体内、外抗氧化应激作用.

应激上调心肌内皮素受体和对氯苄基四氢小檗碱CPU86017及其RS异构体的干预作用

目的:研究异丙肾上腺素诱导的心肌细胞中内皮素(ET)受体变化情况;研究对氯苄基四氢小檗碱CPU86017及其RS异构体对应激上调心肌内皮素受体的干预作用。方法:原代培养乳鼠心肌细胞,加入异丙肾上腺素造模,给予普萘洛尔、CPU86017及其RS异构体干预。结果:异丙肾上腺素同时诱导ETA和ETB上调,且ETB比ETA更明显。普萘洛尔、CPU86017及其RS异构进行干预后,均使ET受体异常表达改善,并呈剂量相关性。在高剂量(10μmol/L)下,RS异构体效应较CPU86017更显著。结论:CPU86017和RS异构体的心血管效应与其抑制ETA和ETB过度表达有关。

(7S,13R)-CPU86017及CPU0213对异丙肾上腺素损害血管活性的改善作用

目的:探讨具有钙拮抗及抗氧化作用的(7S,13R)-CPU86017及内皮素受体拮抗剂CPU0213对异丙肾上腺素诱导的血管功能损伤的改善作用。方法:将36只实验大鼠分为正常组、模型组、(7S,13R)-CPU86017和CPU0213治疗组,采用MedLab生物信号采集系统观察各组在去氧肾上腺素(1×10-6mol/L)预收缩血管后,乙酰胆碱梯度舒张大鼠离体主动脉环效应的变化;在L-硝基精氨酸或无L-硝基精氨酸孵育条件下,对去氧肾上腺素梯度加药引起的血管收缩效应;在含钙或无钙K-H液条件下,对去氧肾上腺素(1×10-6mol/L)引起的血管收缩变化及对KCl(100 mmol/L)引起的血管平滑肌收缩反应。结果:模型组对去氧肾上腺素、高钾的收缩反应增强,而对乙酰胆碱内皮依赖性舒张反应降低,NO的生物利用度明显降低。经(7S,13R)-CPU86017和CPU0213治疗后,血管功能得到显著改善。结论:异丙肾上腺素因损害血管内皮细胞功能而致血管活性异常。(7S,13R)-CPU86017及CPU0213可明显对抗此异常,改善血管功能。提示异丙肾上腺素引起β受体过度激活效应,可能由内皮素-1、氧自由基生成过多及钙通道的过度激活所介导。

内皮素受体拮抗剂CPU0213和钙拮抗剂CPU86017改善异丙肾上腺素诱导的大鼠心衰的作用机制

为了验证内皮素受体拮抗剂CPU0213和钙拮抗剂CPU86017改善异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的大鼠心衰的分子生物学机制,将SD大鼠均分为5组:正常组、ISO组、药物治疗组(3组)。除正常组外,其余4组均皮下给予异丙肾上腺素(ISO,1 mg/kg,10 d),其中3个治疗组于第10,11天分别皮下注射:氨基胍(30 mg/kg)、CPU0213(30 mg/kg)和CPU86017(4 mg/kg)。结果发现,ISO组,内皮素受体A(ETA)、iNOS、衰老蛋白p66Shc、ε型蛋白激酶C(PKCε)、瘦素受体(OBRb)、NADPH氧化酶p67phox、瘦素(leptin)mRNA或蛋白表达均上调,药物治疗后对这些异常均有逆转。CPU0213和CPU86017均通过抑制内皮素受体和氧化应激及下调p66Shc和PKCε等相关分子表达,减轻ISO引起的心衰。

CPU86017及其手性异构体CPU86017-RS对异丙肾上腺素引起心肌细胞中FKBP12.6和SERCA2a下调的改善作用

目的:探讨对氯苄基四氢小檗碱类化合物CPU86017及其手性异构体CPU86017-RS对异丙肾上腺素(ISO)引起心肌细胞中FKBP12.6和SERCA2a异常表达的改善作用。方法:将原代培养72小时的SD乳鼠心肌细胞随机分为9组:正常组,ISO组,普萘洛尔(10-6mol·L-1)组,CPU86017低、中、高剂量组(剂量分别为10-7、10-6、10-5mol·L-1)及CPU86017-RS低、中、高剂量组(剂量分别为10-7、10-6、10-5mol·L-1),除正常组外,在其余各组的培养基中均另加ISO,使其浓度为10-6mol·L-1。继续培养24小时后,用RT-PCR和Western Blot法分别测定各组FKBP12.6和SERCA2a的mRNA及蛋白表达水平。结果:与正常组相比,ISO组FKBP12.6和SERCA2a的mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.01)。不同浓度的CPU86017和CPU86017-RS均呈剂量依赖性地逆转ISO引起的FKBP12.6和SERCA2a的下调,且CPU86017-RS的作用强于CPU86017(P<0.05,P<0.01)。结论:CPU86017和CPU86017-RS对ISO诱导的心肌细胞FKBP12.6和SERCA2a异常表达具有改善作用。

两种肺动脉高压模型大鼠肺动脉和尾动脉血管活性变化及药物体外干预

目的:考察缺氧及皮下注射野百合碱诱导肺动脉高压模型大鼠肺动脉和尾动脉血管活性变化及药物CPU0213和CPU86017的体外急性给药疗效。方法:建立缺氧及皮下注射野百合碱所致大鼠肺动脉高压模型。造模5周后,大鼠乌拉坦麻醉,经右颈静脉插管,进行血流动力学实验,记录中心静脉压、右心室收缩压等血流动力学指标。随后,处死大鼠,分离肺内动脉和尾部腹侧动脉,进行离体血管环实验,观察分别由乙酰胆碱和苯肾上腺素所致大鼠肺动脉和尾动脉血管舒缩活性的变化以及经CPU0213和CPU86017温孵对病损血管的离体治疗作用。结果:慢性缺氧可致大鼠肺动脉及尾动脉血管收缩增强,而野百合碱致血管收缩削弱。慢性缺氧和注射野百合碱均可致大鼠肺动脉和尾动脉血管舒张削弱。CPU0213和CPU86017温孵能不同程度地改善两种模型大鼠的血管收缩和内皮依赖性舒张功能,CPU0213能部分恢复而CPU86017却进一步削弱两种模型大鼠中KATP介导的血管舒张活性。结论:慢性缺氧和注射野百合碱均损伤血管活性,同时造成尾动脉KATP功能障碍,且慢性缺氧对肺动脉损伤的选择性高于野百合碱。CPU0213体外急性给药对血管活性有较好的改善作用,而CPU86017可部分改善血管活性,但对KATP有阻断作用。

CPU 86017对豚鼠心室肌细胞缓慢激活型延迟整流钾通道的抑制作用

采用全细胞膜片钳技术 ,研究 CPU860 1 7对单个豚鼠心室肌细胞延迟整流外向钾电流的缓慢激活成分 ( Iks)的作用。结果发现 CPU 860 1 7对豚鼠心室肌细胞 Iks具有电压、时间和浓度依赖性抑制作用 ( IC5 0 =1 4 .4μmol/ L)。 CPU 860 1 7使 Iks稳态激活动力学曲线倾斜 ,并明显向去极化方向移动。在用药组 ( 30μmol/ L) ,50 %最大激活电压 ( V1 / 2 )和斜率常数 ( κ)分别为 35.6± 4 .1 m V和 -1 3.7± 2 .7m V,与对照组 2 6.7± 5.1 m V和 -1 6.3± 3.9m V相比 ,P<0 .0 5。结果提示 :CPU860 1 7对单个豚鼠心室肌细胞

小檗碱衍生物CPU 86017抑制K_V1.5电流(I_(Kur))及对抗SD大鼠房颤作用(英文)

目的:研究小檗碱衍生物CPU86017对抗房颤作用及其离子通道机制。方法:运用膜片钳技术在稳定表达人心房肌Kv1.5钾通道细胞系(HEK293)及豚鼠心房肌细胞上观察CPU86017对超速整流钾通道(IKur)的作用,观察CPU86017(1.25或2.5mg·kg-1)对比阳性药azimilide(3mg·kg-1)对乙酰胆碱(ACh)和CaCl2诱发的大鼠房颤的治疗作用。结果:CPU86017依浓度抑制IKur,对豚鼠心房肌细胞和培养的HEK293细胞上IKur的半数抑制浓度(IC50)分别是4.56和0.21μmol·L-1。在乙酰胆碱(ACh)和CaCl2诱发的房颤模型上,CPU86017有效缩短房颤持续时间,逆转房颤所致心房有效不应期(AERP)的缩短。结论:CPU86017能抑制KV1.5编码的电流IKur,改善房颤大鼠心房ERP的病变,有效对抗房颤。