应用间接ELISA检测微小隐孢子虫抗体的研究

以在大肠埃希氏菌中表达的微小隐孢子虫 (Cryptosporidum parvum )子孢子表面抗原CP15为抗原 ,以辣根过氧化物酶 (HRP)标记的山羊抗鼠IgG为二抗 ,建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接ELISA。试验筛选出的最佳反应条件为 :大肠埃希氏菌CP15抗原包被量为 1μg/孔 ,用10 0mL/L的兔血清进行封闭 ,以正常大肠埃希氏菌裂解上清液稀释待检血清。试验结果表明 ,应用CP15重组蛋白作为诊断微小隐孢子虫抗体的抗原具有特异性高。

检测微小隐孢子虫抗体的间接ELISA方法的建立

以在 E.coli高效表达的微小隐孢子虫子孢子表面抗原 CP15 /6 0为抗原 ,以辣根过氧化物酶 (HRP)标记的山羊抗鼠 Ig G为二抗 ,建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接 EL ISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为 1μg/孔纯化的E.coli表达的 CP15 /6 0抗原包被酶标板 ,用 10 %的兔血清进行封闭 ,以正常 E.coli裂解上清液稀释待检血清。结果表明应用 CP15 /6 0重组蛋白作为诊断 C.parvum抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。