鸭补体C3d基因cDNA的克隆及鉴定

为了提取鸭补体C3d基因,并对其进行克隆鉴定,试验采用微量提取法提取了鸭肝脏细胞总RNA,通过RT-PCR扩增出补体C3d基因的cDNA,1%琼脂糖凝胶电泳鉴定后克隆到pMD18-T载体上,构建C3d-pMD18-T重组质粒,转化大肠杆菌,酶切鉴定后进行序列测定。结果表明:鸭补体C3d基因序列与原鸡和AA肉鸡的相似性较大,其同源性分别为87.6%和87.5%;而与人、猴、猪、牛、羊、鼠等哺乳动物差异性较大,同源性分别为46.9%、46.9%4、8.7%4、9.1%4、9.1%4、7.5%。其主要变化发生在与CR2受体结合的区域。鸭该区为29个氨基酸,与鸡相同,但比哺乳动物多1个氨基酸,说明补体C3d结构具有种属特异性。