高温合并化疗对耐药性大鼠肝癌CRBH-7919细胞系的协同作用

目的 探讨高温合并阿霉素对耐药性大鼠 CRBH-7919细胞株的作用 .方法 4 2 .5℃持续 1h、阿霉素 32 mg·L- 1 ,单独或联合作用于耐药性大鼠 CRBH- 7919细胞 ,MTT法检测不同处理后细胞的存活率 ;免疫组化检测不同处理后细胞膜 P-糖蛋白 (P- glycoprotein,P- gp)的表达 .结果 加温可增加阿霉素对耐药性 CRBH- 7919细胞的杀伤作用 ;免疫组化提示 ,正常培养下该细胞 P- gp染色强阳性 ,单独用药和单独加热作用下 P- gp染色为阳性 ,加温合并阿霉素作用下 ,P- gp染色为极弱阳性 .结论 高温合并化疗 (热化疗 )可以显著提高耐药性 CRBH- 7919细胞对阿霉素的敏感性 .

逆转录病毒转染法建立耐药性大鼠CRBH-7919细胞系

目的 :建立高效、稳定的大鼠 CRBH- 7919多药耐药细胞系。 方法 :利用逆转录病毒转染法将带有 mdr1c DNA全序列的逆转录病毒载体 p Ha MDR转入到大鼠 CRBH- 7919细胞中 ,MTT法检测细胞系在不同化疗药物作用下的存活率 ;免疫组化检测细胞的 P-糖蛋白 (P- GP)表达 ,RT- PCR检测细胞内 mdr1m RNA的表达量 ,PCR检测 mdr1基因转移到细胞内的基因片段。 结果 :转基因的细胞系对阿霉素、丝裂霉素的耐药性分别提高 9和 7.9倍 ,免疫组化见转基因细胞系 P- GP表达增加 ,RT- PCR示细胞内 mdr1m RNA的表达量增加 ,PCR表明转基因细胞内扩增出 m dr1片段。结论 :利用逆转录病毒转染法成功建立了大鼠 CRBH - 7919多药耐药细胞系 ,该细胞系具有耐药强度高。