小鼠cAMP应答元件结合蛋白基因在大肠杆菌中的表达

采用PCR技术 ,删除了小鼠CREBcDNA5′端和 3′端非编码序列 ,并引入便于基因操作的酶切位点。经 30次循环的扩增 ,得到改造后的CREBcDNA ,全长 10 71bp。亚克隆后 ,对此扩增片段进行了限制性内切酶物理图谱分析 ,测定了DNA序列 ,并以其为插入物 ,构建了 pBV2 2 0 -PCR -CREB重组表达载体。经Western印迹法分析证明 。