活化的CREBH蛋白对脂肪酸诱导的脂肪变性肝细胞中C反应蛋白表达的调控研究

目的建立脂肪酸诱导的脂肪变肝细胞模型，探讨活化的cAMP应答元件结合蛋白H（CREBH）蛋白对该模型中C反应蛋白表达的影响。方法给予L02细胞不同比例和浓度的油酸软脂酸混合液（2：1、1：2和0：3），分别干预12和24h。CCK-8法测定细胞活力。流式测定细胞内脂肪含量。实时PCR方法检测细胞内C反应蛋白、CREBH、C／EBP同源蛋白C／EBP（CHOP）和免疫球蛋白结合蛋白（BIP）mRNA表达水平变化。Western印迹法检测细胞核内活化的CREBH蛋白含量。RNA干扰靶向沉默CREBH蛋白后再分别采用混合脂肪酸干预24h。实时PCR方法检测细胞内C反应蛋白、CREBH、CHOP和BIPmRNA表达水平变化。结果（1）混合脂肪酸诱导肝细胞脂肪变。随着软脂酸比例的升高．细胞内c反应蛋白表达水平升高，并且具有时间依赖性。（2）混合脂肪酸可以诱导CREBH表达升高（P〈0．05）．可增加核内CREBH蛋白水平。（3）混合脂肪酸中软脂酸比例越高，内质网应激标志增加越显著。（4）CREBHsiRNA可有效抑制CREBH表达。敲除CREBH基因后，C反应蛋白表达显著下降（P〈0．05）。结论软脂酸可上调肝细胞C反应蛋白表达水平，但是油酸无此作用。活化的CREBH可调节软脂酸诱导的C反应蛋白表达。

脂联素对脂肪变肝细胞内C反应蛋白表达的影响及作用机制

目的探讨脂联素对肝细胞内C反应蛋白(CRP)的影响及可能的作用机制。方法给予HL-7702细胞不同浓度和比例的油酸软脂酸混合液干预不同时间后,CCK-8法测定细胞活力,Nile red染色荧光显微镜拍照,测定荧光强度。实时定量PCR检测细胞内CRP、CREBH、BIP和CHOP mRNA表达水平变化。Western印迹检测细胞核内活化的CREBH蛋白含量。根据是否加入脂联素分组,每组加入不同比例的脂肪酸干预24 h后,实时定量PCR检测CRP、CREBH、BIP和CHOP的表达水平变化。结果相比于正常组,混合脂肪酸干预12 h后,仅OP03(1.0mmol)组CRP表达升高(P<0.05),24 h后,OP12(1.0mmol)、OP03(1.0mmol)、OP03(0.5 mmol)组CRP表达均升高(P<0.05)。混合脂肪酸干预24 h后,CREBH、BIP和CHOP mRNA均有不同程度的增高,OP12(1.0mmol)、OP03(1.0mmol)组核内活化CREBH蛋白增加。加入脂联素后,各组CRP、CREBH、BIP和CHOP表达水平下降(P<0.05)。结论软脂酸可上调肝细胞CRP表达水平,其机制可能与活化的CREBH蛋白有关。脂联素可能通过抑制CREBH蛋白相关的炎症通路而下调CRP表达。