罕见CRISPLD2-NRG1融合突变晚期混合型非小细胞肺癌1例并文献复习

肺癌是中国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)占全部肺癌的80%以上,NSCLC的基因突变概率高,并且种类繁多。随着基因检测技术的进步,越来越多的罕见融合基因变异被检测出来。神经调节蛋白1(neuregulin 1, NRG1)可促使人表皮生长因子受体3(human epidermal growth factor receptor 3, Her3/ErbB3)介导的通路激活,从而导致肿瘤形成。本文报道了1例罕见CRISPLD2-NRG1融合突变的晚期混合型NSCLC颅内转移的患者,接受阿法替尼治疗1个月后头部磁共振成像(magnetic resonance imaging, MRI)显示颅内病灶明显缩小,患者对阿法替尼治疗反应良好。同时,我们对以往报道的NRG1基因融合突变的NSCLC病例进行总结,以供临床借鉴。

CRISPLD2蛋白对内毒素急性呼吸窘迫综合征小鼠的保护作用

目的探讨CRISPLD2蛋白对内毒素急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory disease syndrome,ARDS)小鼠的保护作用。方法采用数字表法,将120只健康雄性昆明小鼠随机分为对照组(A组,40只):气道内滴入LPS(5 mg/kg);LPS预处理组(B组,40只):先予小鼠LPS(2 mg/kg)腹腔内注射,注射后第8天气道内滴入LPS(5 mg/kg);重组CRISPLD2处理组(C组,40只):先予小鼠尾静脉注射重组CRISPLD2(50 mg/kg),6 h后气道内滴入LPS(5 mg/kg)。(1)采用数字表法将30只小鼠随机分成A1组、B1组、C1组(各组10只),气道滴入LPS 6 h后处死,测定肺湿干重比(W/D)、通透指数(LPI)。(2)采用数字表法将90只小鼠随机分成A2组、B2组、C2组(各组20只),观察5 d内小鼠死亡情况,描绘生存曲线。结果 B、C两组W/D、LPI及5 d死亡率显著低于A组,差异有统计学意义(P<0.05);B组各项检测结果低于C组,差异有统计学意义(P>0.05)。结论提升CRISPLD2蛋白血浓度对内毒素所致ARDS具有保护作用,可降低肺损伤程度,改善肺毛细血管通透性,降低死亡率。

CRISPLD2蛋白对内毒素-诱导急性呼吸窘迫综合征小鼠炎性因子表达的影响

目的探讨CRISPLD2蛋白对内毒素-诱导急性呼吸窘迫综合征(LPS-ARDS)小鼠体内炎性因子表达的影响。方法采用数字表法将40只雄性昆明小鼠随机分5组:对照组(A组),气道内滴入0.1 mg内毒素(LPS);r CRISPLD2蛋白1组(B组)、r CRISPLD2蛋白2组(C组),小鼠尾静脉分别注射1.0、0.4 mg r CRISPLD2蛋白,6 h后气道内滴入0.1mg LPS;r CRISPLD2蛋白3组(D组)、r CRISPLD2蛋白4组(E组),予小鼠气道内滴入0.1mg LPS,6 h后予小鼠尾静脉分别注射1.0、0.4 mg r CRISPLD2蛋白。每组小鼠在LPS气道滴入后第12 h收集支气管肺泡灌洗液(BALF),离心后计数沉淀中性粒细胞,测量上清液及血标本中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及IL-6。结果 B、C组BALF中的中性粒细胞计数(0.31±0.07、0.76±0.08)ng/L、TNF-α(8.88±17.37、134.63±24.44)ng/L、IL-1β(48.63±15.61、99.75±12.30)ng/L、IL-6(80.75±21.03、140.12±29.29)ng/L均明显低于A、D、E组(1.64±0.10、1.73±0.13、1.65±0.08),差异有统计学意义(P<0.05);B组以上检测值均明显低于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CRISPLD2蛋白可下调LPS所诱导的炎症因子表达水平,并且呈现一定的剂量依赖关系。

非综合征性唇腭裂患儿CRISPLD2基因多态性与腭裂整复术后语音功能恢复效果相关性研究

目的 研究非综合征性唇腭裂 (non-syndromic cleft lip and palate, NSCLP) 患儿 CRISPLD2 基因多态性与腭裂整复术后语音功能恢复效果相关性。方法 纳入 2018 年 3 月~ 2020 年 3 月在西安市儿童医院口腔科就诊的 132 例NSCLP 患儿作为观察组,按 1:1 比例纳入同期 132 例健康儿童作为对照组。采用聚合酶链式反应 - 变性高效液相色谱分 析 法 (polymerase chain reaction-denaturing high performance liquid chromatography, PCR-DHPLC) 检 测 CRISPLD2 基因各单核苷酸多态性 (single nucleotide polymorphism, SNP) 位点基因多态性,比较两组儿童 CRISPLD2 基因多态性分布。NSCLP 患儿均接受腭裂整复术干预治疗,记录患儿术后语音恢复效果。分析影响患儿术后语音功能恢复的相关因素。结果 观察组 CRISPLD2 基因 rs2934468 位点 AA 基因型频率为 42.42%,高于对照组的 19.70%,差异具有统计学意义 (χ^(2)=15.971,P < 0.05)。rs2934468 位点等位基因 A 频率增加,将显著增加 NSCLP 发病风险 (OR=1.864,95%CI=1.215 ~ 2.860)。rs2934468 位点 AA 基因型儿童发生 NSCLP 的风险较 GG 基因型和 AG 基因型儿童显著增加(OR=2.252,95%CI=1.597~3.176)。132 例 NSCLP 术后 1 年语音功能恢复优良者 108 例,优良率为 81.82%,语音功能恢复差者 24 例。不同语音功能恢复效果 NSCLP 患儿的年龄、语音训练情况、听力障碍、心理障碍、CRISPLD2 基因rs2934468 位点基因型及等位基因分布比较,差异均有统计学意义 (χ^(2)=3.915~15.873,均 P < 0.05)。Logistic 多因素分析结果显示年龄、语音训练及听力障碍是影响患儿术后语音功能恢复优良率的独立因素 ( 均 P < 0.05),而心理障碍和CRISPLD2 基因 rs2934468 位点基因型及等位基因分布并非是影响患儿术后语音功能恢复的独立因素 (P > 0.05)。结论CRISPLD2 基因 rs2934468 位点突变是 NSCLP 致病的重要因素,而其并非是影响患儿术后语音功能恢复的独立因素。早期的手术干预并在术后加强语音功能的训练有利于 NSCLP 患儿语音功能的恢复。

雌激素对脓毒症小鼠心肌半胱氨酸富集分泌蛋白CRISPLD2表达的影响

目的探讨雌激素对内毒素脂多糖（LPS）诱导脓毒症小鼠心肌中含有2个能够结合内毒素的LCCL结构域的半胱氨酸富集分泌蛋白（CRISPLD2）表达的影响。方法选择7周龄无特定病原（SPF）Balb/c小鼠，雌雄各12只，将雌性及雄性小鼠分别按随机数字表法分为模型组和对照组，每组6只。腹腔注射10% LPS溶液5 mg/kg制备脓毒症小鼠模型，对照组腹腔注射等量生理盐水。24 h后观察小鼠一般情况，取全血后处死取心脏。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清雌激素水平；制备心肌组织匀浆，提取总蛋白，采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测CRISPLD2表达。双变量相关性采用Pearson相关分析。结果制模24 h后24只小鼠全部存活；模型组动物均出现体毛杂乱、灰暗以及腹泻、食量减少等表现；而对照组动物均无明显异常表现。无论是雄鼠还是雌鼠，模型组与对照组体重及血清雌激素水平比较差异均无统计学意义〔体重（g）：雄鼠为24.6±1.8比24.5±1.3，雌鼠为18.0±0.8比17.5±1.1；雌激素（ng/L）：雄鼠为11.93±2.59比12.17±3.87，雌鼠为28.20±5.75比29.82±6.10，均P〉0.05〕。CRISPLD2在雄性与雌性对照组小鼠心肌中的表达差异无统计学意义（灰度值：1.02±0.19比1.00±0.11，P〉0.05）；同样雌性脓毒症小鼠心肌CRISPLD2表达与相应对照组比较差异无统计学意义（灰度值：1.05±0.13比1.00±0.11，P〉0.05）；而雄性脓毒症小鼠心肌CRISPLD2表达水平较相应对照组明显降低（灰度值：0.29±0.08比1.02±0.19，P〈0.01），且明显低于雌性脓毒症小鼠（P〈0.01）。相关分析显示，脓毒症小鼠心肌CRISPLD2表达与血清雌激素水平呈线性相关〔R2＝0.736，95%可信区间（95%CI）＝0.560～0.960，P〈0.001〕。结论雌性脓毒症小鼠心肌CRISPLD2表达水平与健康小鼠相当，说明雌激素可以使LPS诱导的脓毒症小鼠心肌CRISPLD2表达量维持在正常水平。