冠心病患者高敏C反应蛋白、基质金属蛋白酶-9及妊娠相关血浆蛋白A水平及临床意义

目的探讨不同类型冠心病患者外周静脉及冠状动脉血高敏C反应蛋白(hs-CRP)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)水平及及临床意义。方法连续入选150例冠心病(CHD)患者,其中急性心肌梗死组(AMI组)40例、不稳定型心绞痛组(UAP组)60例、稳定型心绞痛组(SAP组)50例,另外选择冠状动脉造影正常的受试者20例作为对照组。分别检测受试者外周静脉及冠状动脉血hs-CRP、MMP-9及PAPP-A水平,进行组间及不同外周静脉及冠状动脉血间指标差异比较。结果 UAP组、AMI组外周静脉血及冠状动脉血hs-CRP、MMP-9和PAPP-A水平显著增高,与对照组及SAP组比较,均有明显统计学差异(P<0.05～0.01);AMI组与UAP组比较,血hs-CRP、MMP-9和PAPP-A水平亦有显著统计学差异(P<0.01);但SAP组与对照组比较,血hs-CRP、MMP-9和PAPP-A水平无统计学差异(P>0.05)。外周静脉血及冠状动脉血hs-CRP、MMP-9、PAPP-A相互间呈显著正相关性(P均<0.05)。结论 hs-CRP、MMP-9及PAPP-A与急性冠脉综合征(ACS)发病密切相关,其测定有助于ACS的早期诊治。

脂肪分化相关蛋白真核表达载体的构建及其对H9c2心肌细胞增殖和凋亡的影响

目的:构建编码脂肪分化相关蛋白(adipose differentiation-related protein,ADRP)基因全长序列的真核表达载体,探讨ADRP过表达对软脂酸诱导的H9c2心肌细胞凋亡有何影响。方法:(1)RT-PCR扩增编码ADRP全长的DNA序列,重组入pEGFP-C1质粒表达载体中,酶切、测序鉴定后转化大肠埃希菌DH5α,挑取阳性克隆,扩增后提取质粒并进行鉴定;采用脂质体转染法将鉴定后的重组质粒稳定转染H9c2心肌细胞;荧光显微镜下观察细胞绿色荧光蛋白表达情况;RT-qPCR和Western blotting检测ADRP表达情况;(2)采用MTT比色法和流式细胞术检测不同浓度软脂酸对细胞增殖和凋亡的影响。结果:(1)成功构建了真核质粒表达载体pEGFP-C1-ADRP,转染H9c2细胞后,荧光显微镜下观察发现细胞内有绿色荧光蛋白表达;RT-qPCR和Western blotting显示重组质粒转染H9c2细胞ADRP mRNA和蛋白表达水平明显高于空质粒转染组和正常对照组(P<0.01);(2)经不同软脂酸刺激后,重组质粒转染H9c2细胞增殖抑制率和凋亡率均明显低于空质粒转染组和正常对照组(P<0.05)。结论:(1)成功获得了稳定表达ADRP的H9c2心肌细胞株;(2)软脂酸可抑制H9c2心肌细胞增殖并可诱导其凋亡,而ADRP高表达可对抗软脂酸的这一作用,表明ADRP对高脂环境中心肌细胞可能具有一定的保护作用。

长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18通过微RNA-497-5p/细胞周期蛋白E1轴调节弥漫性大B细胞淋巴瘤的增殖、凋亡和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调控微RNA-497-5p(miR-497-5p)/细胞周期蛋白E1(CCNE1)轴对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹法分别检测2018年5月至2021年5月收集的恩施土家族苗族自治州中心医院DLBCL病人淋巴组织、良性淋巴结增生病人的淋巴组织、人正常B细胞永生化细胞HMy2.CIR、DLBCL细胞系SU-DHL-1、OCI-LY8、U2932中HCG18、miR-497-5p表达及CCNE1蛋白表达,将OCI-LY8细胞分为Ct组(正常培养的OCI-LY8细胞)、pcDNA组(细胞转染过表达物阴性对照)、pcDNA-HCG18组(细胞转染HCG18过表达物)、si-NC组(细胞转染小干扰RNA阴性对照)、si-HCG18组(细胞转染HCG18小干扰RNA)、si-HCG18+inhibitorNC组(细胞转染HCG18小干扰RNA和抑制物阴性对照)、si-HCG18+miR-497-5p inhibitor组(细胞转染HCG18小干扰RNA和miR-497-5p抑制物),CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭,蛋白质印迹法检测CCNE1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达,双萤光素酶验证HCG18与miR-497-5p、miR-497-5p与CCNE1的关系。结果 在DLBCL淋巴组织和细胞中,HCG18、CCNE1蛋白高表达,miR-497-5p低表达,且在OCI-LY8细胞中HCG18、CCNE1蛋白表达上调最高,miR-497-5p表达下调最多(P<0.05),因此,以OCI-LY8细胞进行后续研究,与si-NC组比较,si-HCG18组HCG18(0.26±0.03比1.01±0.01)、CCNE1蛋白(0.45±0.03比1.44±0.19)表达降低,miR-497-5p(1.95±0.14比1.03±0.02)表达升高(P<0.05),与pcDNA组比较,pcDNA-HCG18组HCG18(1.96±0.23比1.02±0.01)、CCNE1蛋白(2.33±0.21比1.42±0.18)表达升高,miR-497-5p(0.28±0.02比1.02±0.02)表达降低(P<0.05),与siHCG18组、si-HCG18+inhibitor NC组比较,miR-497-5p表达降低(1.21±0.09比1.95±0.14、1.94±0.13),CCNE1蛋白(0.87±0.08比0.45±0.03、0.44±0.04)表达上调(P<0.05),沉默HCG18可抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭行为及PCNA、MMP-9蛋白表达,诱导细胞凋亡及Bax蛋白表达,而上调HCG18则呈相反趋势,下调miR-497-5p逆转了沉默HCG18对OCI-LY8细胞增殖、侵袭、凋亡的影响,HCG18靶向调控miR-497-5p/CCNE1。结论 沉默HCG18可能通过调控miR-497-5p/CCNE1抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭,诱导细胞凋亡。

Survivin与MMP-9在子宫内膜异位症在位内膜中的表达

目的:检测子宫内膜异位症(EMs)患者在位内膜中survivin与MMP-9的表达情况并分析两者表达的相关性。方法:收集80例子宫内膜异位症患者子宫内膜标本为EMs在位内膜组(EMs组),其中临床分期Ⅰ期4例、Ⅱ期25例、Ⅲ期44例与Ⅳ期7例;增殖期47例,分泌期33例。以20例同期手术的单纯子宫肌瘤患者子宫内膜作为对照组,其中增殖期内膜7例,分泌期13例。采用免疫组化二步法检测2组标本中survivin与MMP-9的表达;并应用IPP专业图像分析系统进行定量分析。结果:survivin与MMP-9均在子宫内膜胞浆中表达。在EMs组中增殖期survivin和MMP-9及分泌期survivin表达均高于对照组(P<0.01);其中,survivin表达与细胞周期无关,呈持续性高表达。EMs组不同临床分期间survivin表达,Ⅱ期明显高于Ⅲ期,其余各分期间表达差别无统计学意义(均P>0.05);而MMP-9在各AFS分期中表达差别均无统计学意义(均P>0.05)。Pearson相关性分析表明survivin与MMP-9在子宫内膜异位症在位内膜中表达呈正相关(r=0.262,t=2.860,P<0.05)。结论:survivin与MMP-9在子宫内膜异位症形成及进展过程中均起关键的作用。

一种新的肿瘤相关抗原RCAS1

RCA S1(receptor-b ind ing cancer an tigen expressed on S iSo ce lls)是一种新近发现的肿瘤相关抗原,为Ⅱ型跨膜蛋白,表达在多种不同类型的肿瘤细胞表面,而且RCA S1的表达与肿瘤的分化、侵袭性和恶性程度呈正相关,并提示不良预后。最近研究表明,RCA S1能诱导活化后的免疫细胞发生凋亡,这可能是RCA S1表达在肿瘤细胞表面进而逃避机体免疫监视的机制之一。

Survivin、MMP-2及MMP-9在甲状腺癌组织中表达及其意义

[摘要]【目的】探讨生存素（Survivin）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及MMP-9在甲状腺癌组织中的表达及其意义。【方法】采用免疫组化法检测86例甲状腺癌组织，40例甲状腺良性组织及86例癌旁正常组织中Survivin、MMP-2及MMP-9的阳性表达，并分析三者与临床病理参数的关系。 癌旁正常组织、甲状腺良性组织及甲状腺癌组织中Survivin、MMP-2及MMP-9的阳性率逐渐升高，且甲状腺癌组织中的阳性率显著高于癌旁正常组织及甲状腺良性组织（P〈0．OO】）；甲状腺癌Ⅲ～Ⅳ期中Survivin、MMP-2及MMP-9阳性表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ期；有淋巴结转移的Survivin、MMP-2及MMP-9阳性表达率高于无淋巴结转移（P〈0．05），而甲状腺癌组织中Survivin、MMP-2及MMP9阳性表达与年龄、性别及肿瘤直径无关。同时甲状腺癌组织中Survivin、MMP-2及MMP-9阳性表达两两正相关。【结论]Survivin，MMP-2及MMP-9在甲状腺癌中的发生发展中起促进作用，三者联合检测可能成为甲状腺癌诊治的判断指标。

卵巢交界性子宫内膜样肿瘤4例临床病理观察

目的 深入了解卵巢交界性子宫内膜样肿瘤(EBT)的临床病理特点、鉴别诊断、治疗和预后。方法 对清远市人民医院病理科2012年1月至2019年9月诊断的4例卵巢EBT的临床资料、组织学形态、免疫组化特点及预后进行分析总结,并复习相关文献。结果 4例因不规则阴道出血、下腹胀痛或发现盆腔占位入院,均行子宫及双附件切除术,其中3例行盆腔淋巴结清扫。镜下见排列紊乱、拥挤的子宫内膜样腺体,上皮细胞具有轻度或中度不典型性,部分区域上皮呈复层,腺体间见丰富的纤维间质;1例伴有子宫内膜样囊肿,腺体伴桑葚样鳞状化生;1例见上皮内癌及间质微浸润,且对侧卵巢及宫腔均见低级别子宫内膜样癌,术后多次化疗。肿瘤细胞角蛋白(CK)、角蛋白7(CK7)、糖类抗原(CA125)、雌激素受体(ER)及孕激素受体(PR)均(+),波形蛋白(Vimentin)部分(+),蛋白质53(P53)约5%~10%(+),增殖指数(Ki-67)约5%~25%(+),Wilms肿瘤蛋白1(WT-1)(-)。随访至今(7个月至7.5年),4个病例均处于无瘤生存状态,暂无复发转移迹象。结论 卵巢交界性子宫内膜样肿瘤少见,可与子宫内膜异位症或子宫内膜样癌并存,以手术治疗为主,预后良好。

CRISPR/Cas9在医学检验中的研究进展及应用

成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR/Cas9),是细菌和古菌识别自身及外源入侵DNA片段的一种天然免疫防御系统,保护其不受病毒的侵害。近年来CRISPR/Cas9成为革命性的基因编辑工具被广泛应用,它特异靶向性的定点切割能力在核酸检测、细菌分型等方面也有着重要的意义,在医学检验领域展现出巨大应用潜力。本文在最新研究进展的基础上,对CRISPR/Cas9在医学检验核酸检测新技术、病原菌分型及细菌进化研究等方面的应用进展进行了综述,同时对CRISPR技术在医学检验领域的应用前景进行了展望。