CRKL基因反义寡核苷酸诱导K562细胞的凋亡

背景与目的:近几年研究发现,CRKL(CT10regulatorofkinaselike)基因编码的蛋白在慢性粒细胞白血病(chronicmyeloidleukemia,CML)发病中起重要作用。本实验研究CRKL基因反义寡核苷酸对慢性粒细胞白血病细胞系K562细胞凋亡的影响。方法:以脂质体为载体,用CRKL基因反义寡核苷酸转染K562细胞,通过活细胞计数、透射电镜、流式细胞术、DNALadder测定观察K562细胞形态学、细胞周期、基因表达等的变化。结果:在CRKL基因反义寡核苷酸作用下,K562细胞的生长明显出现抑制;流式细胞仪检测见二倍体峰前出现凋亡峰;在电镜下可见处于凋亡各期的K562细胞;提取其基因组DNA进行琼脂糖凝胶电泳,可见明显的细胞凋亡梯状条带。而对照组K562细胞未观察到上述变化。结论:CRKL基因是Ph染色体阳性CML发病的重要因素。

CRKL基因反义寡核苷酸对K562细胞增殖的影响

目的 通过研究 CRKL基因反义寡核苷酸对 K5 6 2细胞增殖活性的影响 ,探讨 CRKL基因在 Ph+ 慢性粒细胞性白血病 (CML)发病中的作用 .方法 脂质体为载体 ,CRKL基因反义寡核苷酸转染 K5 6 2细胞 ,通过活细胞记数、H3- Td R掺入、RT- PCR等方法观察 K5 6 2细胞的增殖活性及基因表达的变化 .结果 CRKL反义寡核苷酸对 K5 6 2细胞的增殖有抑制作用 .结论 CRKL基因在 Ph+ CML的发病中可能有重要作用 ,可作为 CML 治疗的新靶点 .

CRKL基因对K562细胞的作用研究

目的 :通过研究CRKL基因反义寡核苷酸 (ASODN)对K 5 6 2细胞增殖及凋亡的作用 ,探讨CRKL基因对慢性粒细胞性白血病 (CML)发病的影响。方法 :应用CRKL基因反义寡核苷酸作用于K 5 6 2细胞 ,通过3 H TdR掺入、流式细胞术、Rt PCR等方法观察K 5 6 2细胞形态学、细胞周期、细胞动力学及基因表达等变化。结果 :CRKL基因ASODN对K 5 6 2细胞的增殖有抑制作用 ,并可诱导K 5 6 2细胞的凋亡。结论 :CRKL基因在CML的发病中可能有重要作用。

一例累及CRKL基因的中间缺失型22q11．2微缺失胎儿的基因型与表型分析

目的分析22q11．2微缺失综合征的表型效应，探讨22@1．2区域CRKL基因与心脏畸形的关系。方法对1例产前超声提示为法洛四联症的胎儿行染色体核型分析、单核苷酸多态性微阵列（single nucleotide polymorphism array, SNP array）及荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）检测。对22q11．2缺失断裂点进行基因组定位，分析基因型与表型的关系。父母行SNP array分析以明确胎儿基因组变异的来源。结果胎儿脐血染色体核型为46，XY。脐血SNP array结果为arr[hg19]22q11．21（20716876—21465659）×1，即22q11．21存在749kb缺失，该区域覆盖CRKL基因，未覆盖TBX1、H侬A、COMT及MAPK1基因。基因组定位分析明确该缺失属于中间缺失型22q11．2微缺失。父母外周血SNP array结果均未见22q11．21微缺失，表明胎儿22q11．21微缺失为新发变异。胎儿脐血中期分裂相FISH结果提示22q11．21区域缺失，验证了SNP array的结果。结论中间缺失型22q11.2微缺失是导致本例胎儿心脏畸形的分子病因，其中CRKL基因的缺失可能是导致胎儿心脏畸形的关键原因。