CNS表面含铁血黄素沉积症的临床及CSF细胞学特点(附2例报告)

目的探讨CNS表面含铁血黄素沉积症(SSCNS)的临床和CSF细胞学特点。方法回顾性分析2例SSCNS患者的临床资料。结果本组2例患者均为慢性病程,进行性加重,均有听力下降,双侧病理征(+),例2有左侧肢体共济失调,Romberg征(+)。增强头颅MRI示T2WI/Flair脑表面均见弥漫,线状低信号影覆盖伴线性强化。CSF细胞学检查均有异常,均发现红细胞吞噬细胞及含铁血黄素吞噬细胞。结论SSCNS临床表现为感音性耳聋、锥体束征及小脑性共济失调等。头颅MRI在T2WI上有特征性改变。CSF细胞学检查可见红细胞吞噬细胞及含铁血黄素吞噬细胞。

四联抗结核药物联合利奈唑胺、莫西沙星对难治性结核性脑膜炎患者CSF细胞学、NSE和NGF及其受体的影响

目的:探讨利奈唑胺和莫西沙星分别联合四联抗结核药物治疗难治性结核性脑膜炎对患者细胞学脑脊液(CSF)细胞学、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、脑脊液神经生长因子(NGF)及其受体、内皮素及其受体和C反应蛋白(CRP)的影响。方法:选取我院2014年2月～2017年12月期间结核性脑膜炎患者56例,随机分为2组,每组28例,设置为观察组和对照组,两组患者治疗均予以四联抗结核药物,观察组在此基础上予以利奈唑胺,对照组则联合应用莫西沙星,疗程均为4周,比较两组治疗后的CSF细胞学、NSE、NGF及其受体、内皮素及其受体和CRP水平。结果:两组治疗前CSF细胞学指标、NSE、NGF及其受体、内皮素及其受体和CRP水平相持平,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后氯化物、葡萄糖水平高于本组治疗前和对照组,蛋白质、白细胞数和脑脊液压力水平低于本组治疗前和对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后NSE水平低于本组治疗前和对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后NGF及其受体水平高于本组治疗前和对照组,内皮素及其受体、CRP水平低于本组治疗前和对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在四联抗结核药物基础上联合应用利奈唑胺治疗难治性结核性脑膜炎临床效果更好,有效改善脑脊液细胞学指标,调节脑脊液NSE水平,恢复NGF、内皮素及其受体功能,降低炎性反应,推荐临床推广应用。

结核杆菌Ag85B基因疫苗与结核杆菌Ag85B和细胞因子GM-CSF共表达基因疫苗在小鼠体内的免疫效应比较

目的比较结核杆菌Ag85B基因疫苗与结核杆菌Ag85B和细胞因子GM-CSF共表达基因疫苗在小鼠体内的免疫效应,为研制高效结核杆菌基因疫苗奠定基础。方法将雌性C57BL/6健康小鼠54只,随机分为3组,即结核杆菌Ag85B和细胞因子GM-CSF共表达基因疫苗(pIRES-Ag85B/GM-CSF)组、结核杆菌Ag85B基因疫苗(pIRES-Ag85B)组和空载体(pIRES)组,分别小鼠肌内注射疫苗,检测小鼠体内特异性体液免疫和细胞免疫应答相关指标,同时另取C57BL/6小鼠,随机分成4组,第1、2、3组免疫方法与上述各组免疫方法相对应,第4组每只小鼠背部皮下注射1×106CFU卡介苗(BCG),作为阳性对照,进行动物免疫保护性实验,比较分析两种基因疫苗在小鼠体内的免疫效应。结果结核杆菌Ag85B和细胞因子GM-CSF共表达基因疫苗在小鼠体内的免疫原性和免疫保护性明显强于结核杆菌Ag85B基因疫苗。结论结核杆菌Ag85B和细胞因子GM-CSF共表达基因疫苗能增强结核病基因疫苗的免疫原性和免疫保护性。

NIH3T3细胞核内过表达的M-CSF对细胞运动的影响

目的构建M-CSF细胞核内定位表达载体pCMV/M-CSF,探讨核内M-CSF对NIH3T3细胞运动的影响。方法采用PCR的方法扩增人M-CSF活性片段,将其插入核内真核表达载体pCMV/myc/nuc,构建重组体pCMV/M-CSF,经脂质体介导转染NIH3T3细胞,G418筛选后,用免疫细胞化学及Western blot鉴定其在真核细胞中的表达及定位分布,用细胞划痕实验测定M-CSF进入细胞核后对细胞运动能力的影响。结果限制性双酶切及DNA测序分析结果显示插入pCMV/M-CSF的片段为1400bp左右,与预期M-CSF分子大小相当。Western blot结果显示转染pCMV/M-CSF的NIH3T3细胞能稳定表达M-CSF蛋白;免疫细胞化学结果显示表达的M-CSF定位于NIH3T3细胞核。细胞划痕实验显示转染pCMV/M-CSF的NIH3T3细胞有较强的运动能力。结论成功构建M-CSF核内定位表达载体pCMV/M-CSF,核内M-CSF可加强NIH3T3细胞运动。

重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)抑制大鼠脑卒中后的谷氨酸毒性和IL-1β反应

目的:研究重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对急性脑卒中大鼠脑梗死区域内谷氨酸、IL-1β和IL-6浓度的影响。方法:采用线拴大脑中动脉阻塞(MCAO)法制备急性脑卒中模型,90 min后再灌注。线栓封堵大脑中动脉后,静脉一次性注射rhG-CSF(60 mg·kg^(-1),治疗组,n=10)或0.3mL生理氯化钠溶液(对照组,n=8)。采用微透析法,检测纹状体内谷氨酸浓度;ELISA法分别检测脑组织和血清的IL-1β和IL-6含量。结果:脑卒中发生后0.5～3 h,治疗组梗死侧纹状体内谷氨酸浓度明显低于对照组梗死侧(P<0.01);脑卒中后6 h,治疗组梗死侧脑组织内IL-1β浓度明显低于对照组[(11.38±5.54)vs(21.15±9.57)ng·g^(-1),P<0.01];治疗组血浆内的IL-1β浓度也明显低于对照组[(74.26±26.47)vs(122.88±29.10)ng·mL^(-1),P<0.01]。脑卒中6h后,两组大鼠的血浆和脑组织中均未检测到IL-6。结论:rhG-CSF能明显抑制脑卒中后的谷氨酸毒性和IL-1β反应。

核内M-CSF对NIH3T3细胞内微丝的影响

目的建立M-CSF核内稳定表达的NIH3T3细胞系,探讨核内M-CSF对细胞骨架的影响。方法经脂质体介导核内定位表达重组体pCMV/M-CSF转染NIH3T3细胞,G418筛选后,用Rt-PCR、免疫细胞化学鉴定其在真核细胞中的表达及定位分布,用考马斯亮蓝染色细胞微丝测定M-CSF进入细胞核后对细胞骨架的影响。结果RT-PCR结果显示转染pCMV/M-CSF的NIH3T3细胞能稳定表达M-CSFmRNA;免疫细胞化学结果显示表达的M-CSF定位于NIH3T3细胞核。考马斯亮蓝染色结果显示转染pCMV/M-CSF的NIH3T3细胞内微丝数量减少,排列紊乱。结论核内M-CSF可引起NIH3T3细胞内微丝数量减少,排列紊乱。

EPO联合G-CSF治疗血液恶性疾病化疗后全血细胞减少临床初步观察

目的:观察血液恶性疾病化疗后用促红细胞生成素(EPO)联合粒细胞集落刺激因子(G-CSF)治疗的疗效。方法:对本院血液科化疗后发生全血细胞减少的住院患者25例给予EPO联合G-CSF治疗作为治疗组,另21例仅给予G-CSF治疗作为对照组。结果:治疗组经3周治疗后血红蛋白、白细胞、血小板均明显上升,对照组白细胞明显上升,治疗组和对照组血红蛋白、血小板变化比较差异显著,P<0.01。结论:用促红细胞生成素(EPO)联合粒细胞集落刺激因子(G-CSF)治疗后,全血细胞上升明显,可有效提高Hb水平,改善患者生存质量,而且不良反应少。

系统性淋巴瘤软脑膜转移的脑脊液细胞学分析

目的探讨CSF细胞学及免疫细胞化学对系统性淋巴瘤软脑膜转移的诊断价值。方法回顾性分析我院5例系统性淋巴瘤转移至软脑膜的病例,分析其CSF细胞学及免疫细胞化学特点。结果5例患者中男性3例,女性2例,年龄14~74岁,平均年龄45岁。患者主要临床症状为头痛及恶心呕吐。此外,1例伴有发热,1例伴有脑神经损害,表现为眼肌麻痹。患者MRI扫描显示脑实质内均未发现异常信号,仅2例有脑膜强化。常规CSF细胞学显示5例CSF中均含有大量异型淋巴样细胞。免疫细胞化学显示4例CSF中CD20和/或CD79α阳性的异型细胞比例显著增加,这4例患者之前有脑外B细胞淋巴瘤病史;1例CSF中CD3阳性异型细胞为主。此患者随后发现了乳腺肿瘤,最终诊断为间变性大细胞淋巴瘤。5例CSF中异型细胞均与原发部位肿瘤细胞免疫表型一致,因此系统性淋巴瘤转移至软脑膜诊断明确。结论CSF细胞学对系统性淋巴瘤的软脑膜转移诊断有重要意义,联合免疫细胞化学检测可进一步明确诊断。少数无系统性淋巴瘤病史的患者需要积极检查寻找原发肿瘤的起源和部位。

脑脊液细胞学辅助诊断原发性中枢神经系统淋巴瘤1例

原发性CNS淋巴瘤(PCNSL)发病率低,原发性脑膜淋巴瘤更加罕见,早期诊断困难。CSF细胞学检查是有效的诊断手段之一。我院治疗1例经CSF细胞学辅助诊断的原发性脑膜淋巴瘤,现总结如下。1病例患者,男,48岁。以"头痛一月余,加重伴四肢无力1周"为主诉于2019年8月5日入院。患者既往体健,无特殊病史。患者于2019年7月无诱因频繁出现后枕部疼痛,伴头晕、呕吐、纳差。入院前1周出现四肢无力、走路不稳。

利奈唑胺、万古霉素联合美罗培南对小儿细菌性脑膜炎脑脊液细胞学及远期疗效的影响

目的研究利奈唑胺、万古霉素联合美罗培南对小儿细菌性脑膜炎脑脊液细胞学及远期疗效的影响。方法选择2015年1月至2020年3月在我院住院治疗的细菌性脑膜炎患儿68例为研究对象,随机分为研究组(n=34)和对照组(n=34)。其中研究组均实施利奈唑胺联合美罗培南治疗;对照组均实施万古霉素联合美罗培南治疗。分别记录并比较两组患儿的临床疗效及脑脊液(CSF)细胞学、降钙素原(PCT)和腺苷脱氨酶(ADA)、C反应蛋白(CRP)水平,氯化物、葡萄糖、蛋白质、白细胞数和脑脊液压力水平,随访两个月,比较其不良反应及后遗症等远期疗效。结果研究组患儿的治疗总有效率为97.06%高于对照组的76.47%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患儿的氯化物、葡萄糖等CSF细胞学指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患儿的CSF细胞学指标均明显改善,且研究组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患儿的PCT、ADA比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患儿PCT、ADA水平均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患儿的CRP比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患儿CRP水平低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患儿的不良反应及后遗症对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论利奈唑胺联合美罗培南在治疗小儿细菌性脑膜炎中具有较好的临床疗效,可显著改善其CSF细胞学指标、炎症因子以及PCT、ADA水平,值得临床推广使用。

Sysmex XN-2000血细胞分析仪hsA模式在脑脊液细胞计数及分类中的应用评价

目的研究Sysmex XN-2000血细胞分析仪高灵敏分析(XN hsA)模式对脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)细胞计数及分类的应用。方法收集本院患者CSF标本268例。在XN hsA模式下,对红/白细胞计数的精密度、携带污染率、线性范围等进行性能验证,比较XN hsA模式与手工计数法的红/白细胞计数及分类结果两种方法间的差异,建立并验证XN hsA模式CSF细胞检测的复检规则。结果红细胞计数精密度低、中、高值变异系数分别为9.59%、4.44%、1.60%;白细胞计数精密度低、中、高值变异系数分别为4.81%、2.17%、1.16%;红、白细胞计数携带污染率分别为0.029%、0.002%;检测范围分别为0.5~29760×10^(6)/L、0.1~8352×10^(6)/L。当15×10^(6)/L<RBC≤15000×10^(6)/L时,两种方法红细胞计数差异无统计学意义(P>0.05);当WBC>8×10^(6)/L时,两种方法白细胞计数差异无统计学意义(P>0.05);WBC≥9×10^(6)/L时,两种方法白细胞分类差异无统计学意义(P>0.05);复检规则验证结果假阴性率为4.48%。结论hsA模式具有较好的CSF细胞计数和分类功能,可以为临床提供快速准确的CSF细胞计数和分类结果。通过建立合理可行的复检规则,hsA模式检测脑脊液可以满足临床需求。

脱髓鞘脑病脑脊液细胞学的动态分析

目的分析脱髓鞘脑病患者脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)细胞学的变化,探讨发病机理与细胞学变化的关系。方法对初次发病和多次发病169例脱髓鞘脑病患者的CSF细胞学进行动态分析。结果CSF细胞学最高异常率达73.5%,且病情的进展与细胞的异常程度有一定的关联。结论细胞异常程度越高,病症越重;恢复期免疫活性细胞持续时间越长,复发的机率则越高,预后越差,转变为多发性硬化的可能性越大。

急性白血病化疗后不同时期应用粒细胞集落刺激因子的疗效对照研究

目的：研究急性白血病化疗后不同时期应用粒细胞集落刺激因子（G—CSF）的疗效。方法：选取2010年9月～2013年7月本院收治的80例急性白血病化疗患者为研究对象，将其根据G—CSF应用时间分为A组（化疗后48h应用组，20例）、B组EANC值（1．0～1．4）×10^9／L时应用组，20例、C组ANC值（0．5～0．9）×10^9／L时应用组，20例和D组（ANC值〈0．5×10^9／L时应用组，20例，比较4组患者ANC值达到≥1．5×10^9／L的时间、G—CSF应用时间及口腔溃疡发生率。结果：A组ANC值达到≥1．5×10^9／L时间、G—CSF应用时间均短于B组、C组及D组，B组则短于C组及D组，C组则短于D组；A组总的1：7腔溃疡发生率低于B组、C组及D组，B组则低于C组及D组，C组则低于D组，差异均有统计学意义（P均〈0．05）。结论：急性白血病化疗后应及早应用G—CSF，化疗后48h的应用效果相对更好。

重组人粒细胞集落刺激因子对肝硬化大鼠外周血干细胞动员的研究

[目的]观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对四氯化碳(CCL4)肝硬化大鼠外周血中CD34+细胞的动员作用,以及对肝硬化大鼠肝脏生化学的影响,寻求一种安全有效、不加重肝损伤的动员CD34+细胞的方法。[方法]50%CCL4橄榄油溶液建立肝硬化大鼠模型,rhG-CSF动员组大鼠皮下注射rhG-CSF10μg.kg-1.d-1,共计5d,对照组给予相同剂量生理盐水。流式细胞仪测定外周血单个核细胞中的CD34+细胞的比例,同时检测ALT、AST、T-BIL和ALB,观察G-CSF对肝硬化大鼠肝脏的影响。[结果]肝硬化大鼠rhG-CSF动员后外周血CD34+细胞占单个核细胞(CD34+/MNC)比例(4.08±1.38)%是生理盐水对照组(0.43±0.21)%的9.5倍;而生化学检测两组没有显著性差异。[结论]G-CSF动员能促进更多的骨髓/造血干细胞源性的肝干细胞在外周血中表达,而且不加重肝硬化大鼠的肝脏损伤。

脑脊液细胞学变化对重度CO中毒患者预后的评价

急性CO中毒是当今世界发病和死亡人数最多的急性职业中毒一重度CO中毒患者经过积极抢救治疗，多数患者可完全恢复，但少数出现持续性植物状态。由于中毒患者脑组织受损的程度和面积无量化的生化指标和特殊的检测手段，患者的预后常难以判断。重度CO中毒患者预后的影响因素较多．与中毒剂量，昏迷时间，有无并发症等因素都相关。本文希望从临床细胞学的角度对CO中毒患者的预后提供一种新的评价和预测的实验室指标。对本院1997～2004年收治的34例重度CO中毒患者行高压氧、一般治疗和鞘内注射药物等综合治疗，分析研究脑脊液（cerebrospinal fluid，CSF）细胞学的变化以及其与患者预后的关系。现将结果报道如下。

支气管哮喘病人三维正脊治疗前后血清TNF-α、GM-CSF测定的临床意义

目的:探讨支气管哮喘病人三维正脊治疗前后血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)水平测定的临床意义。方法:选取支气管哮喘患者60名,按入院时间随机分为正脊组、模型组(各30名),另选取30名健康成人作对照组。分别于患者入院后及正脊治疗后10天应用放射免疫分析方法测定血清TNF-α、GM-CSF含量。结果:治疗前支气管哮喘病人血清TNF-α、GM-CSF水平显著高于正常组(p<0.01),经三维正脊仪治疗10d后二者水平与正常人比较则无显著性差异(p>0.05)。结论:三维正脊治疗对支气管哮喘病人具有积极的治疗作用,检测支气管哮喘患者血清TNF-α、GM-CSF水平的变化对了解病情及预后观察具有一定的临床价值。

粒细胞集落刺激因子对氧糖剥夺后培养神经元的影响

目的:观察G-CSF对体外模拟脑缺血损伤神经元的影响,为其临床治疗脑缺血损伤提供理论的依据。方法:应用体外培养原代大脑皮质神经元氧糖剥夺模型模拟脑缺血损伤,氧糖剥夺4 h,制作模型过程中加入不同浓度的G-CSF进行干预,通过观察细胞活性、死亡率、细胞色素C释放量判断G-CSF对神经元的保护作用。结果:G-CSF可明显降低氧糖剥夺神经元的死亡率,提高其生存活性,明显降低神经元由线粒体向胞浆内释放细胞色素C,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:G-CSF对氧糖剥夺所致的神经元损伤发挥保护作用。