猪瘟病毒野毒株持续感染细胞模型的建立

采用猪瘟病毒野毒珠（ＣＳＦＶ３９）感染猪肾传代细胞系ＰＫ－１５，经连续传７９代，建立了稳定的病毒持续感染细胞模型，获得ＣＳＦＶ３９－ＰＫ１５细胞株。用免疫荧光、ＲＴ－ＰＣＲ检测、透射电镜跟踪观察了ＣＳＦＶ３９－ＰＫ１５细胞株连续传代中病毒在细胞内的存在情况。结果表明第９，２９，７９代细胞仍有猪瘟病毒存在，表现出病毒持续感染的基本特征。这为深入研究猪瘟病毒持续感染机理奠定了基础。

猪瘟病毒同源重组的试验研究

以23株来自全世界的CSFV的编码序列为试验研究对象,首先利用临界偶联法(neighbor-joining)做出23条序列的系统发生树,然后通过SimPlot程序分析找到疑似重组病毒的基因序列以及2条疑似亲本链,结果表明:CSFV39(AF07339)可能是强毒株Shimen和GXWZ02之间发生同源重组后的基因产物。

猪瘟病毒野毒株持续感染细胞模型的稳定性研究

以本实验室建立的CSFV39-PK15持续感染细胞模型为实验材料,综合运用免疫荧光、RT-PCR、流式细胞仪,对其稳定性进行研究。实验结果均表明,该细胞模型有着良好的稳定性。即使在连续传至128代的CSFV39-PK15传代细胞中,CSFV仍持续存在:呈免疫荧光抗体反应阳性和RT-PCR检测阳性。同时,该细胞与正常的PK-15细胞相比,细胞周期无显著差异。通过同段序列的同源性比较,发现CSFV39与CSFV石门株的同源性最高,达99.02％。