CT-1C末端肽慢性作用致昆明小鼠心肌重构

目的:观察CT-1慢性作用所诱导的小鼠心肌重构及其组织学特征。方法:选取鼠CT-1C-末端16个氨基酸,合成多肽(carboxyl-terminal polypeptide of cardiotrophin-1,CT-1-CP),给实验组昆明小鼠分别腹腔注射1、2、3、4周(每组10只,雌雄各半),对照组小鼠(10只,雌雄各半)腹腔注射生理盐水4周。分别于注射CT-1-CP 1、2、3、4周后称量小鼠的体重,摘取心脏标本称量心脏重量,石蜡包埋,切5μm厚切片,进行HE染色和MASSON染色,动态观测小鼠心脏的形态和组织学变化情况。结果:对照组小鼠的体重增加量在1、2周时高于CT-1-CP注射组小鼠;3周后,明显低于接受CT-1-CP注射的3周组(t=4.821,P<0.01)和4周组(t=4.060,P<0.01),4周后,CT-1-CP注射组的体重增加量明显高于对照组(t=2.019,P<0.05),体重也略高于对照组;注射过CT-1-CP的各组小鼠心脏重量均高于对照组,但各组间的心脏/体重比值却无明显差异(F=1.083 3,P>0.05)。腹腔注射CT-1-CP 1周后的昆明小鼠即出现心室腔扩大,心室壁变薄,心室壁内出现点灶状分布的纤维排列紊乱、横纹模糊,肌浆染色不均匀,并逐渐出现边集凝块的病变心肌细胞;2周后,心室壁出现非均匀性肥厚,病灶增多;3、4周后,上述病变更为明显,范围逐渐扩大,严重者出现肌原纤维断裂,甚至肌小节部分或完全缺失的现象。Masson染色则显示,注射CT-1-CP 1周后,形态正常的心肌细胞外及肌原纤维间,蓝染的纤维结缔组织即开始增多,且注射时间越长,纤维结缔组织增多的情况越明显。此外,在出现肌原纤维紊乱或肌小节缺失的病变心肌细胞处,结缔组织也明显增多。结论:CT-1-CP的慢性作用可促进心脏肥大,导致昆明小鼠心室发生重构,并导致昆明小鼠的重构心肌组织中病变心肌细胞内结构损坏;促进非心肌细胞及纤维结缔组织增生。

CT-1C-末端多肽对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MI/R)心电图变化的影响

目的观察CT-1C-末端多肽(下简称"本药")不同干预方式对大鼠心肌缺血再灌注损伤心电图变化的影响。方法用结扎-松解SD大鼠冠状动脉左后降支的方法制作缺血再灌注损伤(MI/R)模型。27只SD大鼠随机分为4组:正常组(N组,n=5);疾病组(D组,n=6),心肌梗死(MI)30min后开始再灌注;MI/R后干预组(T组,n=8),MI30min后开始再灌注并腹腔注射本药100μg/kg;MI/R前干预组(O组,n=8),腹腔注射本药100μg/kg后进行MI/R实验。实验过程中,动态监测心电图,观察ST段、心率、P-R间期及心律失常的发生情况。结果①结扎前N组、D组、O组心率和P-R间期与N组无差别(F=0.6633,P>0.05),分别为:N组:396.43±29.34次/分、0.0480±0.0084s;D组:374.91±32.20次/分、0.0483±0.0075s;T组:390.57±21.20次/分、0.0488±0.0083s;O组:393.00±31.37次/分、0.0475±0.0089s。②结扎冠状动脉左后降支30min内,实际3组心率都明显减慢,P-R间期也明显延长,分别为:D组:254.61±44.60次/分、0.0733±0.0082s;T组:257.60±38.75次/分、0.0645±0.0101s;O组:285.65±48.92次/分、0.0638±0.0074s(与结扎前比较,q值分别为:6.8965、3.198;12.1344、4.573;4.5728、3.096;P<0.01)。再灌注2h内,D组和O组心率进一步减慢,P-R间期也进一步延长,前者为212.62±49.51次/分、0.0917±0.0313s,但与结扎后比较,差异不显著(q值为2.4073、2.755,P>0.05);后者为162.26±57.58次/分,0.1638±0.0717s,与结扎后有显著差异(q值为5.482、6.7452,P<0.01)。T组心率无明显变化,为246.16±30.51次/分,P-R间期有所延长,为0.0738±0.0106s但与结扎后比较,无显著差异(q值为1.044、2.6856,P>0.05)。③缺血30min内,仅D组有1只大鼠发生心律失常,发生率为:16.67%;再灌注后,三组大鼠心律失常的发生率均有增加,且各组间存在明显差别(X2=4.419,P<0.01),其中,T组发生率最低,为12.5%,O组发生率最高,为62.5%,D组为50%。结论①缺血及再灌注损伤均可导致SD大鼠心率减慢,P-R间期延长,并易于再灌注后发生心律失常。②于缺血30min后开始再灌注的同时,施加本药干预,可以防止SD大鼠MI/R后心率进一步减慢,减少心律失常的发生率。③SD大鼠接受本药腹腔注射7d后,再遭受MI/R损伤,其再灌注后的心率进一步明显减慢,且心律失常的发生率增高。

CT-1C-末端多肽对大鼠心肌缺血后再灌注心电图的影响

目的观察CT-1C-末端多肽不同干预方式对大鼠心肌缺血再灌注损伤心电图变化的影响。方法用结扎-松解SD大鼠冠状动脉左后降支的方法制作MI/R模型。27只SD大鼠随机分为4组:正常组(N,n=5);疾病组(D,n=6),结扎30min后开始再灌注;MI/R后干预组(T,n=8),结扎30min后开始再灌注并腹腔注射CT-1C-末端多肽100μg/kg;MI/R前干预组(O,n=8),腹腔注射CT-1C-末端多肽100μg/kg后进行MI/R实验。实验过程中,动态监测心电图,观察ST段、心率、PR间期及心律失常的发生情况。结果①结扎前4组大鼠的心率和PR间期与正常组大鼠无差别(F=0.6633,p>0.05);②结扎冠状动脉左后降支30min内,三组大鼠的心率都明显减慢,PR间期也明显延长,与结扎前比较差异有显著性(p<0.01)。再灌注2h内,疾病组(D)大鼠的心率进一步减慢,PR间期也进一步延长,与结扎后比较,差异不显著;MI/R前干预组大鼠的心率及PR间期与结扎后比较,差异有显著性(p<0.01)。MI/R后干预组(T)大鼠心率无明显变化,与结扎后比较,无显著差异;③缺血30min内,仅疾病组(D)有1只大鼠发生心律失常(16.67%);再灌注后,三组大鼠心律失常发生率均有增加,且各组间存在明显差别(x2=4.419,p<0.01),其中T组发生率最低(12.5%),O组发生率最高(62.5%),疾病组(50%)。结论①缺血及再灌注损伤均可导致SD大鼠心率减慢,PR间期延长,并易于再灌注后发生心律失常;②于缺血30min后开始再灌注的同时,施加CT-1C-末端多肽干预,可以防止SD大鼠MI/R后心率进一步减慢,减少心律失常的发生率;③SD大鼠接受CT-1C-末端多肽腹腔注射7天后,再遭受MI/R损伤,其再灌注后的心率进一步明显减慢,且心律失常的发生率增高。

促心肌素C-末端肽对再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察促心肌素(CT-1)C-末端肽在缺血再灌注损伤前后进行干预对大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法制备心肌缺血再灌注损伤(MI/R)模型,27只SD大鼠随机分为正常组(N,n=5)、再灌注损伤模型组(D,n=6)、MI/R后CT-1干预组(T,n=8)和MI/R前CT-1干预组(O,n=8)。检测各组血清肌酸激酶(CK)活性和丙二醛(MDA)浓度;并取缺血区及其周围心脏组织计算心肌细胞凋亡指数(AI)。结果 MI/R后,模型组SD大鼠的平均存活时间为(93.17±24.7)min,在MI/R前的CT-1干预组为(87.88±18.3)min,MI/R后的CT-1干预组为(155.5±80.13)min,明显长于模型组和MI/R前干预组(q值分别为3.171、3.716,P<0.01);模型组SD大鼠的血清CK、MDA浓度升高,梗死区周围的AI也升高(N vs D,q值分别为14.391、11.015、21.668,P<0.01);MI/R后CT-1干预组的大鼠,血清CK、MDA浓度及AI均有所降低(T vs D,q值分别为10.649、6.167、16.493,P<0.01),但仍高于正常组(q值分别为5.197、5.782、7.391,P<0.01);CT-1前干预组的动物,血清CK、MDA浓度明显高于模型组(q值分别为6.147、10.551,P<0.01),AI高于正常组(q=24.609,P<0.01),但与模型组比较无明显差异(q=1.683,P>0.05);心肌细胞的凋亡情况与心肌的损伤及氧化损伤程度,有明显的相关性(r值分别为0.9245、0.8679,P<0.01)。结论 CT-1 C-末端多肽再灌注早期短期使用能减轻心肌组织损伤及氧化损伤,以及心肌细胞凋亡的程度,使动物存活时间延长;但腹腔注射CT-1 C-末端多肽较长时间后,大鼠对MI/R的耐受力降低,组织损伤及氧化损伤的程度明显加重,且梗死周边区有相当的心肌细胞发生凋亡,动物的存活时间也较短。