CT45A1基因与肿瘤关系的研究进展

肿瘤具有类似胚胎细胞的“返祖现象”,能够异常高表达一些胚胎时期与生长和发育相关的基因,包括一系列原癌基因和癌睾抗原(CTAs)。CTAs在肿瘤发生发展与转移中起着重要作用,CT45家族也是CTAs中极为重要的成员之一。大量的研究表明,CT45A1异常表达与肿瘤的发生发展、侵袭和预后息息相关。CT45A1是肿瘤诊断和预测治疗的一个强有力的生物标志物,可被用于研发干细胞抗癌疫苗,并可作为新型抗癌药物的靶标。现就CT45A1基因与肿瘤关系的研究进展作一综述。

肿瘤相关抗原CT45的HLA-A2/A3限制性CTL表位的预测

目的:预测肿瘤相关抗原CT45的HLA-A2/A3限制性CTL表位,为CTL表位肽的合成和活性筛选提供依据。方法:基于新近发现的CT45抗原的氨基酸序列,用NetCTL 1.2 Server人工神经网络法远程预测系统进行HLA-A2/A3限制性CTL表位预测打分,挑选出分值较高的作为候选表位。结果:共预测出了5个潜在的HLA-A2限制性CTL表位九肽,15个潜在的HLA-A3限制性CTL表位九肽,所有这些表位均为首次报道。结论:NetCTL 1.2 Server人工神经网络法能高效的预测CTL表位肽,基于新近发现的CT45抗原,我们通过该系统成功预测出了5个潜在的HLA-A2限制性CTL表位,15个潜在的HLA-A3限制性CTL表位,可以对其进行进一步的研究。

肿瘤睾丸抗原CT45-5基因小干扰RNA表达载体的构建及干扰效果鉴定

目的:构建肿瘤睾丸抗原CT45家族中5号成员基因(CT45-5)的小干扰RNA(siRNA),并检测其对HeLa及HeLa/Fhit细胞内源性CT45-5基因及外源脆性组氨酸三联体(Fhit)基因表达的干扰效果。方法:根据CT45-5基因序列,通过生物信息学方法对靶向CT45-5基因的siRNA进行预测,从中筛选出2对合理的CT45-5-siRNA,将其克隆到siRNA表达载体pSilencer 2.1-U6 Hygro中,转化大肠杆菌DH5α,挑取阳性克隆进行测序鉴定;将构建的CT45-5-siRNA重组载体转染人宫颈癌细胞HeLa及HeLa/Fhit细胞,Western印迹检测siRNA对HeLa及HeLa/Fhit细胞内源性CT45-5及外源Fhit基因表达的干扰效果。结果:构建了2个CT45-5-siRNA重组质粒,其中一条对CT45-5基因具有明显的干扰作用,并且Fhit基因表达也被抑制。结论:构建的CT45-5-siRNA为与CT45-5功能相关的基因研究奠定了基础。

肿瘤睾丸抗原CT45-5在DNA损伤应答中的作用

目的:用建立的CT45-5-siRNA研究肿瘤睾丸抗原CT45-5在DNA损伤应答中的作用。方法:通过靶向CT45-5基因小干扰RNA(siRNA)下调CT45-5的表达,用MTT比色法检测经喜树碱和依托泊苷处理后细胞对DNA损伤诱导剂的敏感性,用流式细胞技术检测电离辐射后细胞周期的变化。结果:在DNA损伤诱导剂处理后,在脆性组氨酸三联体(Fhit)高表达细胞中下调CT45-5的表达可以使细胞表现出更强的G2期阻滞及对DNA损伤诱导剂更耐受,而在Fhit缺失表达的细胞中却没有此现象。结论:CT45-5可能是以Fhit依赖的途径参与了DNA损伤应答。

肿瘤-睾丸抗原CT45-5的表达纯化及多克隆抗体的制备

目的:原核表达、纯化肿瘤-睾丸抗原CT45-5基因,并制备多克隆抗体,以研究其在Fhit特异的信号通路中的作用。方法:设计出特异针对CT45-5的引物,通过RT-PCR扩增出CT45-5的编码基因,测序正确后插入到含GST基因的原核表达载体pGEX-KG中,以IPTG诱导表达,并经谷胱甘肽琼脂糖珠纯化融合蛋白;用纯化的蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体,经ELISA测定抗体的效价,Western印迹鉴定抗体的特异性。结果:原核表达和纯化了CT45-5,并获得了其多克隆抗体,抗体效价达到1∶12800,Western印迹结果显示,该抗血清能够特异识别原核及真核细胞表达的CT45-5蛋白。结论:肿瘤-睾丸抗原CT45-5能够诱导小鼠产生具有较高效价和特异性的多克隆抗体,为进一步研究CT45-5的功能奠定了基础。

两种热喷涂层的耐高温腐蚀性能研究

用金相显微镜观测了CT45和A合金两种热喷涂层的微观组织和涂层厚度,用失重法测量了两种涂层在700℃时的耐高温氧化性和在模拟介质条件下的耐高温腐蚀性能。结果表明:两种涂层均与基体结合良好,涂层厚度为35μm;700℃时,CT45涂层的耐高温性能好于A合金涂层;在模拟的多相混合物腐蚀环境中,A合金涂层的耐高温腐蚀能力要好于CT45涂层。

T91钢超音速电弧喷涂45CT涂层在90%Ar+10%H_2O气氛中的循环氧化行为

采用超音速电弧喷涂方法在T91钢上制备了45CT涂层,研究了样品在800℃和850℃的90%Ar+10%H2O气氛中的循环氧化行为,利用XRD和SEM/EDS分析了涂层氧化前后的表面成分和结构。结果表明:氧化后表面的氧化物主要由Cr2O3,NiCr2O4及NiO组成,850℃氧化后的表面氧化物还含有Fe2O3;45CT涂层在800℃下表现出良好的抗氧化性能,而在850℃氧化时,涂层出现裂纹,Fe通过裂纹快速向外扩散,导致涂层在氧化过程中失效。

电弧喷涂Al,45CT及其复合涂层的抗高温氧化性能与机理

为获得抗氧化性能优良的涂层,采用电弧喷涂方法制备了Al,45CT及其复合涂层,探讨了3种涂层过渡层的形貌、物相及其相应的作用,分析了3种涂层的组织结构、抗氧化性能与机理。结果表明:Al涂层和复合涂层高温氧化后表面氧化膜有剥落现象,涂层中的抗氧化元素Cr含量很低;45CT涂层中的抗氧化元素Cr含量仍然很高,涂层的自我修复能力很强,表面生成的Cr2O3氧化膜具有优异的抗氧化性能;在涂层与基体结合处有一层过渡层,不仅增强了涂层与基体的结合力,还能进一步阻止氧化性气体向基体入侵,起到二次保护作用。

超音速火焰喷涂NiCr金属陶瓷涂层的高温硫腐蚀性能

超(超)临界机组锅炉管在硫含量较高的烟气环境中常遭受严重的高温硫酸盐及硫化腐蚀,成为锅炉安全的隐患。在2Cr13不锈钢表面利用超音速火焰喷涂(HVOF)制备了NiCr金属陶瓷涂层(1375VM和TPRI-A),并用超音速电孤喷涂(SWAS)制备传统45CT涂层以作比较,研究了各涂层在700℃,H_2-1%H_2S环境中的硫化腐蚀性能以及涂覆(0.9Na,0.1K)_2SO_4盐膜后在700℃,O_2-1.5%(SO_2+SO_3)环境中的高温硫酸盐腐蚀性能。结果表明:HVOF制备的NiCr金属陶瓷涂层比SWAS制备的45CT涂层具有更优异的抗高温硫酸盐腐蚀及硫化腐蚀性能:封孔处理可显著提高HVOF制备的TPRI-A涂层的抗高温硫酸盐腐蚀以及硫化腐蚀性能。

高速电弧喷涂Ni-50Cr合金涂层的抗高温氧化性能

首先采用高速电弧喷涂技术在20G钢基底上制备了Ni-50Cr合金涂层,并对其进行了750℃的高温氧化试验,然后采用光学显微镜、扫描电镜、X射线衍射仪以及能谱仪等研究了涂层的抗高温氧化性能,并与目前广泛使用的Tafa 45CT合金涂层以及基体锅炉用20G钢进行了对比研究,同时探讨了涂层的氧化机理。结果表明:Ni-50Cr涂层呈典型的层状结构,其抗高温氧化性能分别比20G钢基体和Tafa 45CT涂层提高了85倍和1.3倍;涂层表面腐蚀产物主要由NiO,Cr2O3和NiCr2O4组成;与Tafa 45CT涂层相比,铬含量的增加有利于Ni-50Cr涂层在高温下生成致密的Cr2O3层,提高涂层的抗高温氧化性能。

铁铬铝、高铬镍、45CT涂层的抗热冲击和耐冲蚀性能的研究

模拟电厂锅炉四管壁实际工作环境,对超音速电弧喷涂铁铬铝、高铬镍、45CT涂层的抗热冲击及耐冲蚀的性能进行了试验研究,研究得出铁铬铝、45CT具有良好的抗热冲击、耐冲蚀性能,它们能满足电厂锅炉的实际需要。

45CT涂层抗高温氧化性能及机理

为了研究45CT涂层与基体的结合情况、抗高温氧化性能及机理,通过电弧喷涂法制备了45CT涂层。采用高温氧化试验、扫描电镜、X射线衍射仪、金相显微镜等从其抗高温氧化性、微观结构及涂层和基体之间的过渡层等方面与传统Ni-Cr涂层进行了对比。结果表明:45CT涂层的抗高温氧化性能优于传统的Ni-Cr涂层,主要原因是其表面生成了均一致密的Cr2O3膜;涂层与基体之间形成了由Ni-Cr-Fe,[Fe,Ni]和Fe相构成的过渡层,使基体与涂层冶金结合,从而加强了涂层与基体的结合力。

两种电热爆炸喷涂层高温防腐性能对比研究

采用电热爆炸喷涂方法在45钢基体上制备高铬镍基45CT、SL30涂层,分别在800℃对两种涂层进行氧化和氯化腐蚀测试,研究涂层在高温状况下的腐蚀行为,同时借助SEM、XRD等检测手段,分析涂层在高温环境中的腐蚀特点及腐蚀机理。通过各项测试可以看出这两种高铬含量喷涂层组织致密,孔隙率极低,与基体材料具有优异的结合性,以冶金结合方式存在,其中SL30涂层组织更为致密,同时较45CT涂层平滑。此外,SL30喷涂层表现出了更为优异的耐蚀性,高温耐蚀效果好于45CT涂层。

超音速喷涂45CT涂层在KCl+K_2SO_4+Na_2SO_4熔融盐中的热腐蚀行为

目的研究超音速喷涂45CT涂层抗KCl+K_2SO_4+Na_2SO_4熔融盐腐蚀性能,了解45CT涂层在熔融盐中的防护及失效机制。方法将试样置于KCl+K_2SO_4+Na_2SO_4混合熔盐中,获得样品在熔盐中不同温度下的腐蚀动力学规律。采用XRD、SEM、EDS对高温腐蚀产物成分、结构、形貌进行分析。结果 45CT涂层在熔融盐中的主要腐蚀产物为Cr_2O_3、NaCrO_2。在600℃和650℃下,涂层能较好地保护基体,涂层上腐蚀产物层较薄;而在700℃下,涂层退化严重,涂层内有大量金属硫化物,基体中的Fe向涂层扩散。结论在高温条件下,涂层易发生硫化,导致涂层与氧化膜的弱结合。随着测试温度升高,涂层在KCl+K_2SO_4+Na_2SO_4熔融盐中的热腐蚀越严重,涂层失效加快。

45CT和NiCr/Cr_3C_2涂层在模拟烟气中的热腐蚀行为

目的采用超音速火焰喷涂技术在P12钢表面制备45CT和NiCr/Cr_3C_2涂层,研究两种涂层样品的热腐蚀行为和机理。方法将样品表面涂覆75%Na_2SO_4+25%NaCl(质量配比)混合盐膜后,置于650℃含0.15%SO_2(体积分数)的模拟烟气中进行腐蚀,间隔一定时间取出样品进行质量称取,获得腐蚀动力学曲线。采用XRD、SEM/EDS对喷涂层和热腐蚀产物的成分、形貌、物相进行分析。结果采用超音速火焰喷涂制备的涂层结构致密、孔隙率低。腐蚀过程中样品整体表现为增重,但增重过程中有失重,NiCr/Cr_3C_2后期失重比45CT严重。45CT和NiCr/Cr_3C_2涂层均生成了耐蚀性良好的致密Cr_2O_3,而NiCr/Cr_3C_2涂层样品在涂层/基体界面还生成了氧化物和硫化物层,易导致涂层与基体界面弱结合。结论在650℃含0.15%SO_2的模拟烟气条件下,45CT涂层样品表现出了比NiCr/Cr_3C_2更好的抗热腐蚀性能。

NiCrTi系高温防硫腐蚀喷涂材料45CT与PS45的对比研究

对NiCrTi系防硫腐蚀喷涂材料45CT与PS45的主要性能指标进行了试验分析,结果显示,45CT与PS45的化学成分、制备涂层的微观组织形貌相似。对2种涂层进行腐蚀增重试验,腐蚀后的涂层表面可形成致密的Cr2O3与Cr2NiO4结构,具有优异的抗高温硫腐蚀能力。

3种热喷涂涂层在模拟气氛/煤灰环境下的热腐蚀及失效行为

采用超音速火焰喷涂技术在T91钢表面制备了45CT、NiCr/Cr_(3)C_(2)和NiCrAlY 3种涂层。在T91钢和3种涂层表面涂覆37.5%Na_(2)SO_(4)+37.5%K_(2)SO_(4)+15%Fe_(2)O_(3)+10%SiO_(2)的合成煤灰后通入模拟烟气在750℃下进行腐蚀,获得腐蚀动力学曲线,腐蚀200 h后观察涂层腐蚀前后厚度变化。采用XRD、SEM、EDS对高温腐蚀产物成分、结构、形貌进行分析。结果表明,T91钢腐蚀非常严重,腐蚀产物大量剥落。3种涂层在腐蚀前期均表现为增重,而在腐蚀后期均存在失重现象。经过200 h腐蚀后,45CT、NiCr/Cr_(3)C_(2)和NiCrAlY涂层分别减薄25、112.7和93.1μm。T91钢腐蚀后表面残留的腐蚀产物主要为Fe_(2)O_(3)。45CT涂层表面主要的腐蚀产物相为Cr_(2)O_(3),而NiCr/Cr_(3)C_(2)和NiCrAlY的腐蚀产物为Cr_(2)O_(3)和NiCr2O_(4)。所有样品表层腐蚀产物中不同程度均嵌入了煤灰粒子。腐蚀介质会通过涂层扩散到涂层/基体界面导致基体一侧发生腐蚀。45CT、NiCr/Cr_(3)C_(2)涂层样品基体处腐蚀严重导致涂层/基体开裂,而NiCrAlY涂层由于孔隙率较低,以及稀土效应,界面的基体侧腐蚀轻微,未出现裂纹。

45 keV单能量能谱CT影像组学结合机器学习预测肝癌TACE短期疗效

目的 探讨术前45 keV单能量能谱CT影像组学结合机器学习预测肝癌经导管肝动脉化疗栓塞术(TACE)后短期疗效的应用价值。方法 回顾性分析104例经病理证实的肝细胞癌(HCC)患者,随机划分为训练集(71例)和验证集(33例)。搜集患者治疗前能谱CT单能量及常规增强CT(CECT)图像,提取病灶影像组学特征。使用LASSO算法结合十折交叉验证筛选能谱组学特征,用逻辑回归(LR)、随机森林(RF)、支持向量机(SVM)、极限梯度提升(XGBoost)、K最近邻(KNN)等5种机器学习方法构建能谱影像组学模型,基于最佳能谱组学模型的机器学习方法与相应特征构建CECT模型,利用多因素LR分析筛选临床资料变量构建临床模型。受试者工作特征(ROC)曲线用于评价模型效能。决策曲线分析(DCA)评价最佳影像组学模型、CECT模型及临床模型的临床决策能力。结果 通过筛选共纳入19种特征构建模型,5种能谱影像组学模型的曲线下面积(AUC)分别为训练集0.72,0.68,0.77,0.70,0.71,验证集0.55,0.58,0.74,0.74,0.65。基于多因素LR筛选出两项临床变量分别为甲胎蛋白(AFP)>400μg/L和Child分级,临床模型训练集和验证集的AUC分别为0.63和0.67,CECT SVM模型AUC为训练集0.69、验证集0.61。校准曲线提示能谱及常规SVM模型和临床模型拟合优度良好。DCA曲线显示能谱SVM模型具有更高的临床应用价值。结论 术前45 keV单能量能谱CT影像组学结合机器学习能有效预测肝癌TACE后的短期疗效,其中能谱SVM模型预测性能最佳,较其他模型更具决策作用。