利用改良CTAB法提取雪莲果基因组DNA

阐述了利用改良CTAB法提取雪莲果(Smallanthus sonchifolius)基因组DNA的的过程,对提取的DNA经0.8%琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测,表明此法提取的DNA的一级结构完整,浓度较高,其DNA可进一步用于其他分子生物学试验。

多花蔷薇总RNA提取方法

根据总RNA完整性、纯度和得率筛选出适合多花蔷薇幼嫩根、叶总RNA的提取方法.结果表明,以CTAB/酸酚法提取的扦插苗根系总RNA、以LiCl-尿素法提取的扦插苗根、叶总RNA以及采用RNeasy Plant Mini Kit试剂盒的改进方法提取的组培苗嫩叶总RNA电泳有清晰明亮的28S、18S条带,无降解;其A260/A280值为1.73～2.04,表明总RNA质量好.RT-PCR结果进一步证实所提取的总RNA能够用于分子生物学的各种下游实验.RNA得率分别为:根系和组培苗嫩叶120-140μg/g(fw),扦插苗嫩叶190-230μg/g(fw).CTAB/酸酚法提取的嫩叶总RNA、SDS/酸酚法提取的根、叶总RNA有多糖污染,且有明显降解.Total RNA isolation system(Z5111,Promega)试剂盒不适合提取多花蔷薇各组织总RNA.

华中五味子干燥材料DNA提取方法的研究

目的:建立一套适合从华中五味子硅胶干燥的幼芽中提取高质量DNA的方法,为进一步开展分子生物学研究奠定基础。方法:比较SDS法、STE-CTAB法、SDS-CTAB法以及经过作者改进的CTAB法,运用紫外光谱和电泳分析方法测定所得DNA样品的纯度与完整性。结果:四种方法中改进CTAB法所得DNA纯度最高,完整性好,其A260/A280值为1.81,A260/A230值为2.13,经稳定性试验证明该方法稳定。结论:改进CTAB法是一套适合从华中五味子硅胶干燥的幼芽中提取高质量DNA的方法。

一种适用于RAPD分析的微量山茶DNA提取方法的建立

为建立一种满足RAPD-PCR分析的简便且高产率微量山茶基因组DNA提取方法,探索了在无液氮条件下,采用简化试验步骤的改良CTAB、SDS和Triton X-100方法分别提取山茶新鲜和干燥叶片DNA,通过光谱扫描和测定DNA在波长230 nm,260 nm和280 nm时的吸光度,比较不同DNA提取方法、材料保存方法以及材料用量对DNA提取效率的影响。结果表明,干燥叶片比新鲜叶片更适合作为DNA提取材料,改良CTAB法在提取干燥山茶DNA时纯度和产率较理想,其A260/A280值为1.595-1.736,每克叶片可得到230-295μg DNA,高质量DNA经RAPD-PCR扩增可获得清晰扩增条带。100 mg干燥山茶叶片适合获得高纯度和高产率的DNA,增加材料用量可增大DNA总量,但也增加了DNA中杂质含量。

五味子总DNA提取方法的比较

目的:建立一套适合从五味子种子中提取高质量DNA的方法,为进一步开展五味子分子鉴定奠定基础。方法:比较SDS法、高盐低pH值法以及改进的CTAB法,运用紫外光谱和电泳分析方法测定所得DNA样品的纯度与浓度。结果:3种方法中CTAB改良法所得DNA纯度最高,完整性好,且该方法稳定可靠。结论:CTAB改良法是适合从五味子中提取高质量DNA的方法。