HFRS患者汉滩病毒特异性CTL克隆靶细胞的建立及意义

目的 :建立肾综合征出血热 (HFRS)患者汉滩病毒(HTNV)核衣壳蛋白 (NP)特异性CTL克隆的靶细胞 .方法 :采用Ficoll密度梯度离心法分离HFRS患者外周血单个核细胞(PBMC) ,并用EB病毒 (EBV)转化B淋巴细胞 ,建立B淋巴母细胞样细胞系 (B LCL) .然后 ,用含HTNVS基因的重组痘苗病毒 (rVV)转染B LCL ,间接免疫荧光 (IFA)检测NP的表达 ,并用HTNV特异性T细胞克隆对转染rVV的B LCL进行细胞毒杀伤实验 .结果 :B淋巴细胞经EBV感染 4wk左右 ,可形成B LCL .HTNV S基因在B LCL中能有效表达NP ,且能被HTNV特异性T细胞克隆识别 .结论 :成功建立了HFRS患者永生化B LCL .含HTNVS的基因重组痘苗病毒转染的B

脾细胞在CTL克隆增殖中的作用

本文证明二次MLC上清或重组IL2均不足以维持细胞毒 T细胞(CTL)克隆的正常增殖,而同种异体、同种第三者、甚至同基因的脾细胞均可增强rIL2诱导的CTL克隆增殖应答,亦可增强 CTL由 CD3∈链抗体(145-2C11)刺激的 IL-2非依赖性增殖。脾细胞的这种辅佐效应似与可溶性因子或脾粘附细胞无关。用 rIL2 预处理的脾细胞可诱导 CTL克隆的显著增殖,这种增殖可被抗IL2 受体抗体所抑制,提示脾细胞可能将其“膜结合”rIL2递给CTL而更有效地诱导增殖反应。FD18.5(抗 LFA-1),KH1.4(抗 Ly-6)及 HK2.1(抗 Thy-1)可显著抑制脾细胞对 145-2C11 激活 CTL增殖的辅佐效应,提示脾细胞对 CTL克隆 IL2非依赖性增殖的辅佐效应与一些细胞表面分子有关。