HLA-A^＊0201限制性CTL表位肽的三维定量构效关系的研究

运用比较分子力场 (CoMFA)和比较分子相似性指数分析 (CoMSIA)方法研究了 5 0个HLA A 0 2 0 1限制性CTL表位九肽结构与亲和性间的关系 ,另外 15个表位九肽作为预测集用于检验模型的预测能力 .结果表明采用CoMSIA得到的构效关系模型 (q2 =0 .62 8,r2 =0 .997,F =840 .419)要明显优于采用CoMFA得到的构效关系模型 .在CoMSIA计算中 ,当引入疏水场时 ,三维构效关系模型得到明显改善 ,通过该三维构效关系模型 ,可较精确地估算预测集中 15个CTL表位肽与HLA A 0 2 0 1间的亲和力 (r2pred=0 .743 ) .通过分析分子场等值面图在空间的分布 ,可以观察到表位肽分子周围的立体及疏水特征对表位肽与HLA A 0 2 0 1间结合亲和力的影响 ,从而为进一步对CTL表位肽进行结构改造并基于此进行治疗性疫苗分子设计提供理论基础 .

PLA表位肽免疫微球诱导CTL对肝癌细胞的杀伤作用

目的：考察两种载肽聚乳酸（（polylatic acid，PLA）免疫微球M1（hAFP158～166）和M2（hAFP218～226）在体外诱导特异性CTL的能力及其对肝癌细胞的杀伤作用。方法：制备分别荷载表位肽hAFP158～166、hAFP218～226的PLA免疫微球M1和M2，体外刺激HLA—A2^＋健康志愿者的外周血单个核细胞（PBMC）作为效应细胞，实验分为3组：对照组、hAFP表达组和hAFP阴性组。采用标准^（51）Cr释放法检测CTL杀伤活性。结果：两种免疫微球在体外均能刺激人PBMC增殖，形成大量可见克隆；两者诱导的效应细胞对hAFP^＋的荷肽他细胞、HepG-2和Alexander的杀伤率均达75％以上，均显著高于不表达hAFP的膀胱癌细胞BTT和未荷肽的他细胞，差异非常显著（P＜0，01），而两者杀伤活性之间没有明显差异（P＞0．05）。结论：两种载肽聚乳酸免疫微球均能在体外诱导产生特异性CTL，并对表达靶抗原的肝癌细胞有较强杀伤作用。

利用分子模拟技术筛选HLA-A2限制性CTL表位肽

以肿瘤抗原MAGE-2为例,运用分子模拟方法对其4个优势候选HLA-A2限制性CTL表位进行初步鉴定,再通过多肽结合实验对鉴定结果进行验证.结果表明,4个候选肽中有3个与HLA-A2分子有较好的亲和力,进一步进行体外诱导CTL效应实验显示,3个高亲和力的表位肽可在体外有效诱导特异性CTL效应.利用计算机辅助鉴定CTL表位,克服了以往筛选肽要将肽逐一洗脱下来的繁琐实验过程,并且可直接观测到多肽复合物的结合模式,该技术在筛选大量优势CTL表位中具有较大的应用价值.