人吻素1、脂肪酸结合蛋白质4与糖脂代谢指标的相关性分析及其对妊娠糖尿病的早期诊断价值

目的探讨人吻素1、脂肪酸结合蛋白质4(FABP4)与糖脂代谢指标的相关性及其对妊娠糖尿病(GDM)的早期诊断价值。方法选取2018年1月至2022年1月在河北大学附属医院产科门诊建卡的496例孕妇作为研究对象,根据是否发生GDM分为GDM组和正常组。比较两组孕妇的临床资料。采用Pearson相关分析GDM患者人吻素1、FABP4水平与糖脂代谢指标的相关性。采用多因素Logistic回归分析孕妇发生GDM的危险因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析人吻素1、FABP4单独及联合检测对GDM的诊断价值。结果两组孕妇孕前体质量指数(BMI)、孕24周增长体质量、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、稳态模型胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、空腹血糖(FBG)、口服葡萄糖耐量试验(OGTT)1 h血糖(1 hPG)、OGTT 2 h血糖(2 hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹胰岛素(FINS)、人吻素1、FABP4水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,GDM孕妇人吻素1水平与孕前BMI、HOMA-IR、FBG、OGTT 1 hPG、OGTT 2 hPG、HbA1c、TG、FINS水平均呈正相关(P<0.05),与HOMA-β呈负相关(P<0.05);GDM孕妇FABP4水平与孕24周增长体质量、HOMA-IR、TG、LDL-C、FINS水平均呈正相关(P<0.05),与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平、HOMA-β均呈负相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,孕24周增长体质量、HOMA-IR、HOMA-β、FBG、OGTT 1 hPG、OGTT 2 hPG、HbA1c、TG、FINS、人吻素1、FABP4水平升高是孕妇发生GDM的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,人吻素1、FABP4联合诊断GDM的曲线下面积(AUC)为0.865,高于人吻素1、FABP4单独诊断GDM的AUC(Z=4.563、5.681,P<0.05)。结论人吻素1、FABP4对GDM的早期诊断具有重要意义,2项指标联合检测能够有效提高GDM的诊断率。

乳腺癌骨转移的蛋白质组学特性及代谢途径活化研究

目的:探究乳腺癌骨转移细胞的蛋白表达特征及调控骨转移的分子机制。方法:制备过表达萤火虫荧光素酶的人乳腺癌细胞系MCF-7-luc和骨转细胞亚系MCF-7-BOM-luc;左心室注射细胞建立乳腺癌骨转移裸鼠模型;应用小动物活性成像仪、微计算机断层扫描技术(micro-computed tomography,Micro-CT)检测骨转移及骨小梁变化;采用Transwell小室法评估细胞增殖、迁移和侵袭能力。通过蛋白质组学、蛋白质印迹(Western blot)和实时荧光定量PCR(qPCR)技术分析差异蛋白表达、上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)指标和信号通路活化情况;使用2-NBDG、ELISA法和Seahorse能量代谢仪分别检测葡萄糖摄取、L-乳酸含量和细胞能量代谢参数。结果:MCF-7-BOM-luc细胞迁移、侵袭、EMT特性以及骨骼转移能力方面优于MCF-7-luc。蛋白质组学发现MCF-7-BOM-luc中S100钙结合蛋白A4(S100 calcium-binding protein A,S100A4)表达增加,且差异蛋白主要集中在代谢途径。MCF-7-BOM-luc表现出E盒结合锌指蛋白1/2(zinc finger E-box binding homeobox 1/2,ZEB1/2)和波形蛋白(Vimentin)表达上升,E-钙黏蛋白(E-cadherin)下降,葡萄糖摄取、L-乳酸生成和糖酵解速率增强,及细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular signal-regulated kinases1/2,ERK1/2)和信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的磷酸化水平提升。结论:MCF-7-BOM-luc通过激活ERK1/2和STAT3信号通路促进S100A4表达,从而增强EMT进程和糖酵解速率,具备骨转移恶性。通过蛋白质组学解析乳腺癌骨转移细胞的蛋白特征将为乳腺癌骨转移的诊断、预防和治疗提供潜力靶点。

不同妊娠阶段血清脂肪酸结合蛋白质4、甲胎蛋白水平对妊娠期糖尿病患者妊娠结局的预测价值

目的探讨不同妊娠阶段血清脂肪酸结合蛋白质4(FABP4)、甲胎蛋白(AFP)水平对妊娠期糖尿病患者妊娠结局的预测价值。方法选取2017年10月~2019年10月我院收治的100例妊娠期糖尿病患者,根据不同妊娠阶段将其分为孕早期组21例、孕中期组35例、孕晚期组44例。统计所有患者妊娠结局及FABP4、AFP检查结果,比较三组血清FABP4、AFP水平及不良妊娠结局发生率,并将发生不良妊娠结局的患者纳入妊娠不良组,分析FABP4、AFP水平与不良妊娠结局的相关性。结果三组中孕晚期组血清FABP4、AFP水平最高,其次为孕中期组,孕早期组水平最低,差异有统计学意义(P<0.05);三组中孕晚期组不良妊娠结局发生率最高,其次为孕中期组,孕早期组发生率最低,差异有统计学意义(P<0.05);妊娠不良组血清FABP4、AFP水平高于妊娠良好组,差异有统计学意义(P<0.05);经Logistics回归分析结果显示,血清FABP4、AFP水平升高是导致妊娠期糖尿病患者不良妊娠结局发生的影响因素(OR>1,P<0.05);绘制ROC曲线图,血清FABP4、AFP水平预测妊娠期糖尿病患者发生不良妊娠结局的AUC为0.834、0.845,具有一定的预测价值。结论FABP4、AFP水平升高可能是导致妊娠期糖尿病患者发生不良妊娠结局的影响因素,临床可根据其水平变化为患者妊娠结局作早期预测,为临床干预提供有效参考。

泛素连接酶E4B介导PM20D2、PABPC1和TACO1蛋白质的泛素化验证

泛素连接酶E4B通过U-box基序可将经泛素活化酶(Ubiquitin-activating enzyme, E1)和泛素结合酶(Ubiquitin-conjugating enzyme, E2)传递的泛素(Ubiquitin, UB)标记至底物蛋白质。探究3个蛋白质:金属蛋白酶M20家族蛋白质2(Peptidase M20 domain-containing protein 2,PM20D2)、多腺苷酸结合蛋白质1(Polyadenylate-binding protein 1,PABPC1)、细胞色素C氧化酶Ⅰ翻译激活剂(Translational activator of cytochrome C oxidase Ⅰ,TACO1)是否可被E4B介导泛素化。从HEK293细胞中提取总RNA,反转录为cDNA,以其为模板调取底物基因并构建重组质粒,利用大肠杆菌表达系统表达并纯化泛素化过程所需的各个相关蛋白质,通过蛋白质体外泛素化实验,对3个蛋白质进行泛素化验证。结果表明3个蛋白质均可以在蛋白质水平被E4B泛素化,证明3个蛋白质都是E4B的底物,为进一步在细胞中研究其泛素化的机理奠定基础。

超敏C反应蛋白、视黄醇结合蛋白4水平与2型糖尿病肾病的相关性研究

目的探讨超敏C反应蛋白(hs-CRP)、视黄醇结合蛋白4(RBP4)水平与2型糖尿病肾病的发生、发展之间关系,建立起早期诊断指标系统,从而降低糖尿病肾病的发生。方法 120例研究对象被分为了4组。分别为30例健康对照组(NGT组)。单纯2型糖尿病组(SDM组)、早期糖尿病肾病组(EDN组)、临床糖尿病肾病组(CDN组)各30例。均测定血清hs-CRP、RBP4,并同时测定所有受试者糖、脂生化及肾功能等相关性指标。结果血清RBP4、hs-CRP在SDM组、EDN组、CDN组高于NGT组,差异有统计学意义(P<0.05),血清RBP4、hs-CRP水平在SDM组、EDN组、CDN组内比较差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关分析,血清RBP4与hs-CRP浓度呈显著正相关(r=0.534,P<0.01)。结论 RBP4、hs-CRP与2型糖尿病肾病存在一定的相关性,与糖尿病肾病损伤程度有关,可作为2型糖尿病肾病的诊断的早期血清标志物。

Lnc-PCIR通过调控PABPC4的泛素化促进喉癌细胞的增殖和迁移

目的:探究LncRNA RP11-214F16.8(Lnc-PCIR)通过调控多腺苷酸结合蛋白质4[poly(A)-binding protein cytoplasmic 4,PABPC4]的泛素化对喉癌细胞增殖、迁移的影响。方法:利用Human Protein Atlas、GEPIA数据库分析Lnc-PCIR、PABPC4在头颈鳞状细胞癌组织中的水平及患者的总体生存期。选取我院130例喉癌患者的癌及癌旁组织标本,RT-qPCR、Western blot检测组织Lnc-PCIR、PABPC4 mRNA和蛋白水平,并分析Lnc-PCIR水平与患者临床病理参数的关系。将HEP-2、TU212细胞进行不同转染,分为si-Lnc-NC组、si-Lnc-PCIR组、Lnc-NC组、Lnc-PCIR组、si-Lnc-PCIR+NC组、si-Lnc-PCIR+PABPC4组。CCK-8实验、EdU染色和Transwell实验检测细胞增殖和迁移能力;RT-qPCR检测细胞Lnc-PCIR、PABPC4 mRNA水平;HEP-2、TU212细胞分别经放线菌酮(cycloheximide,CHX)、MG132、ML364处理后,Western blot检测细胞PABPC4蛋白水平。20只裸鼠经皮下注射已转染的HEP-2细胞悬液,分为si-Lnc-NC组、si-Lnc-PCIR组;1个月后,测定移植瘤体积、质量和Lnc-PCIR、PABPC4蛋白水平。结果:数据库显示头颈鳞状细胞癌组织中Lnc-PCIR、PABPC4水平高于正常组织,且Lnc-PCIR、PABPC4水平与总体生存期呈负相关(均P<0.05)。与正常组织相比,患者喉癌组织中Lnc-PCIR、PABPC4 mRNA和蛋白水平升高,且Lnc-PCIR水平与患者性别、TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移相关(均P<0.05)。敲低Lnc-PCIR后,细胞Lnc-PCIR、PABPC4蛋白水平降低;细胞培养1 d、2 d、3 d后的OD值、EdU阳性率降低,细胞迁移数减少。而过表达PABPC4能部分逆转敲低Lnc-PCIR对细胞增殖和迁移的影响(均P<0.05);过表达Lnc-PCIR能降低细胞PABPC4泛素化水平(P<0.05)。敲低Lnc-PCIR能抑制小鼠移植瘤生长(P<0.05)。结论:Lnc-PCIR通过调控PABPC4的泛素化促进喉癌细胞的增殖和迁移。

拟南芥微管结合蛋白MAP70-4的生物信息学分析

微管结合蛋白对微管蛋白的结构及功能至关重要。为能较全面地揭示拟南芥微管结合蛋白MAP70-4的结构和功能,利用生物信息学方法对该蛋白的理化性质、亲水/疏水性,信号肽,跨膜区域,磷酸化位点,卷曲螺旋结构,蛋白质二级、三级结构,亚细胞定位,表达模式,分子功能及其参与的生物学功能,以及与其它蛋白的相互作用关系进行了预测分析。结果显示,拟南芥MAP70-4蛋白是一种无信号肽,不含跨膜螺旋区域的不稳定蛋白质,属于碱性、亲水性蛋白质,翻译后会产生磷酸化修饰,该蛋白二级结构含有11个α螺旋区和5个β折叠,以及7个卷曲螺旋结构。亚细胞定位显示该蛋白主要分布在细胞质中,具有促进微管结合等功能,和其有相互作用关系的蛋白可能与叶绿体生命活动及胚胎、种子发育有关。从表达模式上看,该蛋白主要在花、果实、叶片中大量表达,根中有少量表达。通过对拟南芥微管结合蛋白MAP70-4进行系统性预测分析,可为下一步对该蛋白功能的深入研究提供理论基础和借鉴。

CCCTC-结合因子与核周蛋白α4存在分子间相互作用并调控其基因表达

目的:研究CCCTC-结合因子(CTCF)是否与核周蛋白α4(KPNA4)有蛋白间相互作用并调控其表达。方法:用GSTpull-down实验研究CTCF是否与KPNA4存在蛋白间相互作用;用逆转录半定量PCR和免疫印迹检测CTCF敲降对KPNA4基因表达的影响。结果:GSTpull-down实验表明CTCF与KPNA4之间存在相互作用;当CTCF敲降时,KPNA4基因的表达随之下降。结论:CTCF与KPNA4之间存在相互作用并调控其基因表达。

冠心病不同阶段血清的差异蛋白质组学研究

目的通过比较冠心病4个不同阶段的血清蛋白质表达的差异,寻找与冠心病的发生发展相关的特异蛋白质。方法采用蛋白质组学双向凝胶电泳联合质谱的技术方法对正常健康人、冠心病中高危人群、冠心病急性期患者及冠心病稳定期患者蛋白质组学比较研究。结果通过鉴定得到了7种差异蛋白质:视黄醇结合蛋白4(RBP4)、载脂蛋白E(ApoE)、载脂蛋白A1(ApoA1)、CD5抗原样蛋白(CD5L)、结合珠蛋白(Hp)、血清白蛋白(ALB)、簇连蛋白(CLU)。结论这些与冠心病相关的差异蛋白质主要通过参与脂质代谢、炎症反应以及氧化损伤等过程而导致动脉粥样硬化的发生。

国产多孔钽对MG63细胞中Ⅰ型胶原、谷氨酰转氨酶2和钙结合蛋白A4表达的影响

背景:目前有证据已证实国产多孔钽具有良好的生物相容性及促成骨性能,但具体的成骨机制及对成骨因子的影响尚不明确。目的:观察国产多孔钽材料对MG63细胞Ⅰ型胶原、谷氨酰转氨酶2及钙结合蛋白A4表达的影响。方法:将对数生长期的MG63细胞接种于24孔板,分3组培养:空白组加入常规培养基,钽浸提液组加入多孔钽材料浸提液,钽支架组加入多孔钽材料与常规培养基。培养第1,3,5,7,9天,CCK-8法检测各组细胞增殖;培养第5天,采用ELISA酶联免疫吸附法检测各组细胞分泌Ⅰ型胶原、谷氨酰转氨酶2和钙结合蛋白A4的水平,Western-blot法检测各组细胞中钙结合蛋白A4、Ⅰ型胶原、谷氨酰转氨酶2蛋白的表达。结果与结论:(1)随着培养时间的延长,各组细胞数量呈逐渐增加趋势,3组不同时间点的细胞增殖比较无差异(P> 0.05);(2)钽支架组Ⅰ型胶原、谷氨酰转氨酶2分泌高于空白组、钽浸提液组(P <0.05),钽浸提液组Ⅰ型胶原、谷氨酰转氨酶2分泌高于空白组(P <0.05);钽支架组钙结合蛋白A4分泌低于其他两组(P <0.05);(3)钽支架组中Ⅰ型胶原、谷氨酰转氨酶2蛋白表达均高于空白组、钽浸提液组(P <0.05),钽浸提液组中Ⅰ型胶原、谷氨酰转氨酶2蛋白表达高于空白组(P <0.05);钽支架组钙结合蛋白A4蛋白表达均低于空白组、钽浸提液组(P <0.05);(4)结果表明,国产多孔钽材料可促进MG63细胞分泌Ⅰ型胶原、谷氨酰转氨酶2,抑制其分泌钙结合蛋白A4。

阿司匹林及其衍生物与脂肪酸结合蛋白4复合物的晶体学研究

脂肪酸结合蛋白4(Fatty Acid Binding Protein 4,FABP4)作为脂肪酸伴侣,参与调节脂肪酸代谢、运输、脂介导的信号转导以及巨噬细胞的炎症反应。该蛋白的抑制经常作为治疗脂肪代谢疾病的有效方案。本文报道了经典非甾体抗炎药阿司匹林及其水解物水杨酸与FABP4蛋白复合物的晶体结构,从而推测阿司匹林可能通过FABP4蛋白途径抑制动脉粥样硬化的分子机制。结构分析进一步阐明了FABP4蛋白疏水残基Phe16苯环侧链与水杨酸之间的C-H-π相互作用比亲水位点静电相互作用提供更稳定的结合。该发现为设计更高选择性FABP4抑制剂提供了新的途径。

胰岛素样生长因子结合蛋白4在小鼠急性坏死性胰腺炎中的表达

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)在左旋精氨酸诱导的小鼠急性坏死性胰腺炎中的表达和意义。方法利用腹腔注射左旋精氨酸诱导小鼠急性坏死性胰腺炎模型,以生理盐水腹腔注射作为对照组。应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中的IGFBP4的含量;免疫组化染色及Western Blot检测IGFBP4在胰腺组织中的分布及表达。结果小鼠模型组用左旋精氨酸造模后3d,血清中的IGFBP4含量(1.15±0.35)μg·mL-1明显高于生理盐水对照组(0.39±0.03)μg·mL-1(P<0.05)。免疫组化染色显示:在模型组中可见部分腺泡细胞中IGFBP4染色呈强阳性,且伴随胰腺损伤坏死的严重程度,IGFBP4表达阳性的腺泡细胞越多。Western-blot检测显示,与对照组相比较,模型组中的IGFBP4蛋白表达明显升高。结论在小鼠坏死性胰腺炎中,IGFBP4表达明显上调,且主要表达于胰腺坏死区域中的残存腺泡细胞内,提示IGFBP4可能参与坏死性急性胰腺炎的发病过程。

前列地尔联合左卡尼汀对终末期糖尿病肾病患者血清Toll样受体-4、视黄醇结合蛋白及前白蛋白的影响

目的分析前列地尔联合左卡尼汀对终末期糖尿病肾病(ESDN)血清Toll样受体-4(TLR-4)、视黄醇结合蛋白(RBP)及前白蛋白(PA)的影响。方法回顾分析2017年1月—2019年10月我院收治的ESDN患者96例的临床资料,根据治疗方式不同分为对照组41例和观察组55例。对照组给予前列地尔,观察组在对照组基础上加用左卡尼汀。比较2组临床疗效,治疗前后TLR-4、RBP、PA表达、肾功能及不良反应情况。结果观察组临床总有效率高于对照组(P<0.05)。与治疗前相比,2组治疗后TLR-4、RBP水平减低、PA水平升高,且观察组较对照组变化更显著(P<0.05)。2组治疗后血肌酐(SCr)、尿素(BUN)水平均减低,且观察组低于对照组(P<0.05),但2组GFR治疗前后组间及组内比较差异无统计学意义(P>0.05)。2组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论前列地尔联合左卡尼汀可降低TLR-4、RBP表达水平,调高PA表达,从而改善患者体内微炎性环境,保护肾功能,临床疗效佳。

人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23与宿主蛋白IGFBP4相互作用的鉴定

目的:利用蛋白质相互作用的技术筛选与pUL23相互作用宿主蛋白,为研究pUL23蛋白对人巨细胞病毒繁殖的影响提供线索。方法:通过酵母双杂交系统从人胚肾cDNA文库筛选与pUL23相互作用的宿主蛋白;通过GST-pu ll-down技术研究二者体外物理性相互作用;免疫共沉淀技术进一步研究二者在胞内相互作用。结果:Pu ll-down技术、免疫共沉淀技术确定了宿主蛋白IGFBP4与pUL23具有相互作用。结论:上述结果为研究pUL23蛋白调节病毒自身繁殖功能提供重要依据。

可溶性耐药相关钙结合蛋白在MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞帕金森病模型中的表达及意义

目的:观察1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的SH-SY5Y细胞帕金森病(PD)模型中可溶性抗药性相关钙结合蛋白(sorcin)表达的变化,寻求参与PD多巴胺能神经元细胞神经变性的蛋白质改变,为阐明PD的发病机制提供理论依据。方法:应用1.0mmol.L-1 MPP+处理未分化的SH-SY5Y细胞24h,在体外建立PD细胞模型,应用荧光染色双向差异凝胶电泳(2D-DIGE)、图像分析、基质-辅助激光解析/电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和生物信息学的方法,对该模型的差异表达蛋白质进行研究。结果:蛋白质组学分析在对照组和MPP+处理组之间发现22个差异表达蛋白质,其中1个蛋白质点被确切的鉴定为sorcin。sorcin的表达明显上调,荧光丰度比值为1.97倍。该蛋白的最小肽片段覆盖率、最大概率期望值、相对分子质量和等电点分别为25.7、0.006、21 940和5.3。结论:sorcin在功能上与钙离子稳态和凋亡有关,可能参与了MPP+在SH-SY5Y细胞诱导的毒性,并可能与PD的发病机制有关。

EB 病毒 DNA 酶基因特异性结合蛋白的检测

ＰＣＲ法扩增出ＥＢ病毒ＤＮＡ酶全基因之后，用［γ－３２Ｐ］ＡＴＰ进行５’末端标记，然后利用凝胶迁移分析法（ｇｅｌｍｏｂｉｌｉｔｙｓｈｉｆｔａｓｓａｙ）来检测与该基因结合的蛋白质。结果表明在Ｒａｊｉ细胞核和细胞浆中均有ＥＢ病毒ＤＮＡ酶基因非特异性和特异性结合蛋白，在人乳清中也有与该基因结合的蛋白质。

基于蛋白质组学的慢性阻塞性肺疾病合并肺癌的关键靶点筛选与验证

目的 采用蛋白质组学分析联合生物信息学技术,初步预测慢性阻塞性肺疾病(COPD)相关肺癌(COPD-LC)的生物学机制及其潜在的核心治疗靶点,并进行验证。方法 收集2018年12月至2021年8月新疆医科大学第四临床医学院门诊就诊的COPD、肺癌患者以及体检的健康人员的尿液标本,并进行高通量测序。筛选差异蛋白并构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络图,进行功能富集分析,进一步预测COPD-LC的关键靶点,最后采用基因表达数据库(GEO)对上述分子进行验证。结果 蛋白质组学结果显示,与正常对照组相比,COPD组存在157个差异蛋白,其中上调67个,下调90个;与正常对照组相比,肺癌组存在306个差异蛋白,其中上调132个,下调174个;此外,本研究基于相互作用基因检索工具(STRING)平台,将上述差异蛋白进行PPI分析。基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析结果显示,COPD-LC主要富集在细胞外区域、溶酶体、细胞外空间、淀粉酶活性、蛋白酶抑制剂活性、防御/免疫蛋白活性等方面。在GEO数据库中搜索关于COPD和肺癌患者微阵列数据,最终纳入GSE8581和GSE43346共2个数据集,在GSE8581数据集中共识别出13 605个差异基因,在GSE43346数据集中识别出3 403个差异基因,进一步分析GSE8581、GSE43346数据集与COPD-LC中差异基因的重叠程度,发现潜在转化生长因子β结合蛋白(LTBP)4、N-乙酰α-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGLU)、泛素蛋白连接酶E3成分N-识别蛋白4(UBR4)、DNA损伤结合蛋白1-CUL4相关因子(DCAF)5等4个重叠蛋白,最后在GEO数据集中获得验证。结论 本研究初步揭示了LTBP4、NAGLU、UBR4、DCAF5等4个COPD-LC的潜在治疗靶点,其中靶点NAGLU、UBR4、DCAF5在COPD和肺癌中鲜有报道。上述蛋白在COPD和肺癌中均显著低表达,或可成为COPD-LC的重要诊断与治疗的生物标志物。

抗CTLA-4的人单克隆抗体

根据该发明,提供了抗人细胞毒性T-淋巴细胞抗原4(CTLA-4)的全人单克隆抗体。且提供了编码包含重链和轻链免疫球蛋白分子之氨基酸序列的核苷酸序列,特别是跨越互补性决定区(CDR)的连续重链和轻链序列,特别是从FR1内和/或CDR1到CDR3和/或FR4内。还提供了与该文揭示的抗体具有相似结合特性的抗体及具有相似功能的抗体(或其他拮抗物)。

磷酸二酯酶4抑制剂咯利普兰逆转慢性束缚应激诱导的大鼠抑郁和焦虑样行为

目的:探讨磷酸二酯酶4(PDE4)特异性抑制剂咯利普兰(rolipram)对抗慢性应激诱导的抑郁和焦虑样行为的分子机制。方法:(1)将40只SD大鼠分为4组(每组10只):空白对照组、模型组、阳性对照药氯化锂(LiCl)组及rolipram组,并进行应激前旷场实验。给予慢性束缚应激21 d后,分别进行强迫游泳、高架十字迷宫及应激后旷场实验。最后一次行为学实验结束后立即处死动物并取双侧海马组织,免疫印迹法检测海马内磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)、磷酸化丝氨酸残基21糖原合成酶激酶3α(p-Ser21-GSK3α)、磷酸化丝氨酸残基9糖原合成酶激酶3β(p-Ser9-GSK3β)、磷酸化酪氨酸残基279糖原合成酶激酶3α(p-Tyr279-GSK3α)、磷酸化酪氨酸残基216糖原合成酶激酶3β(p-Tyr216-GSK3β)、总糖原合成酶激酶3α(total GSK3α)及总糖原合成酶激酶3β(total GSK3β)的表达。(2)30只SD大鼠平均分为6组,双侧海马CA1区手术埋管并恢复7 d后进行慢性应激处理21 d,并在每次应激前微量注射蛋白激酶A(PKA)的拮抗剂H89,并腹腔注射LiCl和rolipram。双侧海马用于检测PDE4D、p-CREB和p-Ser9-GSK3β的表达。结果:(1)应激前各组动物自主活动能力无显著差异,应激14 d及21 d后应激组与空白对照组相比体重显著下降,LiCl及rolipram均显著逆转了应激对体重的下调作用。应激显著增加了强迫游泳实验中动物的不动时间,减少了攀爬时间和高架十字迷宫实验中进入开臂的次数及时间,表现出抑郁和焦虑样行为,而LiCl及rolipram均显著逆转了慢性束缚应激诱导的上述行为障碍。免疫印迹结果显示rolipram可显著逆转应激对p-CREB、BDNF、p-Ser21-GSK3α和p-Ser9-GSK3β表达的下调作用,而LiCl仅显著上调p-Ser21-GSK3α及p-Ser9-GSK3β的表达。各组p-Tyr279-GSK3α、p-Tyr216-GSK3β、total GSK3α及total GSK3β的表达无显著差异。(2)慢性应激诱导了大鼠海马内PDE4D表达的上调,PKA、p-CREB及p-Ser9-GSK3β的下调。Rolipram显著逆转了上述效应,且H89显著阻断了Rolipram的药物效应。结论:Rolipram抗抑郁及抗焦虑作用不仅通过CREB/BDNF信号通路,而且还有GSK3抑制性丝氨酸残基磷酸化信号通路的参与,且CREB介导的信号转导通路对GSK3抑制性丝氨酸残基磷酸化信号通路发挥重要调节作用。

RBP4和omentin-1与颈动脉狭窄缺血性脑卒中的关系

目的：探讨血清中视黄醇结合蛋白4（RBP4）和网膜素-1（omentin-1）与颈动脉狭窄缺血性脑卒中的关系。方法选取50例对照人群，143例颈动脉狭窄缺血性脑卒中患者。缺血性脑卒中患者根据超声多普勒分为轻度狭窄组（颈动脉正常或狭窄＜50%，67例）、中度狭窄组（颈动脉狭窄50%～70%，45例）和重度狭窄组（颈动脉狭窄〉70%至接近闭塞，31例）。自动生化分析仪检测各组体质指数（BMI）、高血压情况、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和空腹血糖（FPG），用ELISA法检测各组血清中RBP4和omentin-1的含量，分析颈动脉狭窄缺血性脑卒中的危险因素。结果中、重度颈动脉狭窄组合并高血压比例明显多于对照组及轻度狭窄组（P＜0.05），血清TC、TG、LDL-C、FPG和RBP4水平明显高于对照组（P＜0.05），而omentin-1水平明显低于对照组（P＜0.05）。Logistic回归显示高TC、RBP4是颈动脉狭窄缺血性脑卒中的危险因素，而高omentin-1是保护因素。结论脂肪因子RBP4是发生颈动脉狭窄缺血性脑卒中的危险因素而omentin-1是保护因素。