CTLA-4Ig与ICAM-1单抗联合DCp诱导同种移植耐受

目的:利用细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 Ig融合蛋白(CTLA-4 Ig)和细胞问黏附分子1(ICAM-1)单克隆抗体联合治疗经供者树突状细胞前体(DCp)免疫的移植受者诱导移植耐受。方法:实验分4组:对照组、CTLA-4 Ig组、ICAM-1单抗组和联合组,每组8只BALB／c受鼠。每组均以2×106C57BL／6供者DCp经尾静脉输注受鼠。CTLA-4 Ig组和ICAM 1单抗组分别自DCp输注之日起连续2周向受鼠腹腔内注射CTLA-4 Ig或ICAM-1单抗(0.1 mg／d);联合组以同样剂量两药注射2周;对照组则仅输注DCp。DCp输注1周后4组均行异位心脏移植并观察移植心存活时间,进一步作皮肤移植确认耐受状态。结果:对照组、ICAM-1单抗组和CTLA-4 Ig组的C57BL／6供心平均存活时间分别为(20.13±1.64)d、(45.00±2.62)d和(90.00±3.07)d,联合组8例中除1例存活98 d外,其他7例均超过100 d。前3组C57BL／6来源皮肤平均存活时间分别为(4.25±0.89)d、(9.00±0.76)d和(44.50±3.42)d,联合组8例中1例存活91 d,3例存活95 d,其他4例均超过100 d。结论:在供者DCp输注受者后以ICAM-1单抗和CTLA-4 Ig联合处理受者能够诱导针对供者的耐受状态。

CTLA_4-Ig对过敏性哮喘作用的研究

目的 通过CTLA4 Ig阻断B7/CD2 8的结合防止CD+4T激活 ,探讨其治疗哮喘的可行性。方法 分别用 6只BALB/C小鼠作为正常、哮喘、治疗组 ,于气道激发后 2 4h进行外周血、支气管肺泡灌洗液 (BALF)细胞计数及分类、细胞因子测定和病理切片。结果 哮喘组BALF细胞数增加、炎性细胞比例上升 ,全身及局部IL- 4水平增高 ,病理示气道慢性炎症性改变 ,治疗组可减轻上述改变 ,两组比较差别有显著性。结论 CTLA4 Ig可引起抗原特异性免疫耐受 ,抑制哮喘反应。

CTLA-4 Ig融合蛋白抗小鼠同种心脏移植排斥的效果及其机制

目的 :研究细胞毒性 T淋巴细胞相关抗原 4(CTL A - 4,CD15 2 ) Ig融合蛋白 (CTL A- 4Ig)抗小鼠同种心脏移植排斥的效果及其体内作用的机制。 方法 :以 C5 7BL / 6小鼠为供者 ,BAL B/ c小鼠为受者行异位心脏移植术 ,分别腹腔注射 CTL A-4Ig[10 0μg/ d,共 15次 ]、γ-球蛋白对照抗体及 PBS,观察移植供心的存活时间 ;研究腹腔注射 CTL A- 4Ig后受体小鼠 T细胞对同种抗原反应性的变化以及对 T细胞亚群分化的影响。结果 :同种心脏移植的小鼠腹腔注射 CTL A- 4Ig后 ,移植心脏存活时间较对照组显著延长 ,40 %移植心脏的存活时间长达 2个月以上。 CTL A- 4Ig治疗后诱导受体小鼠 T细胞对同种抗原低反应性 ,但对第三者抗原的反应性无影响。受体血清中的 Th1来源的 IL - 2、IFN-γ均明显低于 PBS对照组 ,而 Th2来源的 IL - 10的水平则明显高于对照组 ,IL- 4未见明显的改变。结论 :CTL A- 4Ig治疗后可通过诱导受体小鼠 T细胞对同种抗原低反应性以及受体 T细胞由 Th1向 Th2分化 ,诱导供者特异性免疫耐受的产生 。

CTLA-4/Ig在CHO/DG44细胞中的高效表达

目的研究CTLA-4/Ig融合蛋白在CHO真核表达系统中的表达,并纯化所表达的CTLA-4/Ig融合蛋白,为其功能研究和临床应用奠定基础。方法将线性化的pMM-CTLA-4-IgG4/WG和pMMGR转染CHO/DG44细胞,对阳性克隆进行无血清悬浮培养,Western blot检测细胞培养液中CTLA-4/Ig融合蛋白的表达,筛选出高效稳定表达CTLA-4/Ig融合蛋白的CHO细胞;Protein A亲和层析纯化所表达的CTLA-4/Ig融合蛋白;SDS-PAGE电泳、Western印迹等对纯化的CTLA-4/Ig融合蛋白的相对分子质量、纯度、抗原特异性进行生物学鉴定。结果筛选出了能高效稳定表达CTLA-4/Ig融合蛋白的CHO细胞;纯化后的CTLA-4/Ig融合蛋白在SDS-PAGE电泳后出现一条与预期相对分子质量大小相符的蛋白条带;该蛋白能与羊抗人IgG-HRP抗体特异结合。结论获得了能够高效稳定表达具有生物学活性的CTLA-4/Ig融合蛋白的CHO细胞。

细胞毒T淋巴细胞抗原-4的研究进展

细胞毒T淋巴细胞抗原-4(CTLA-4)是激活的T细胞表达的一种膜蛋白,属免疫球蛋白超家族成员,它通过与B7分子的结合来阻止共刺激信号的传递,抑制抗原特异性T淋巴细胞的增殖活化,起到抑制免疫反应及诱导免疫耐受的作用。CTLA-4在自身免疫病、过敏性疾病、感染、肿瘤及抗移植排斥等领域具有广阔的应用前景。简要综述了CTLA-4的基因、分子结构,及其与T细胞应答的关系。

CTLA-4 Ig腺病毒基因治疗联合供体细胞输注诱导混合嵌合体和大鼠心脏移植耐受

目的 在心脏移植手术中实施CTLA 4Ig腺病毒基因治疗并联合术后输注供体骨髓细胞 ,诱导异基因大鼠心脏移植耐受 ,并对相关机制进行研究。方法 将异基因DA大鼠的心脏移植给受体LEW大鼠 ,同时经门静脉输注供体DA的脾细胞 (SC ,3× 10 8)、CTLA 4Ig腺病毒 [( 1～ 5 )× 10 9PFU ml],第 4天由舌静脉输注DA的骨髓细胞 (BMC ,3× 10 8)。观察、记录心脏移植物的存活时间。并对皮肤移植的受体作同样处理 ,观察皮肤移植存活情况。通过MLR、IL 2逆转实验及嵌合体的测定 ,探讨耐受机理 ,并检测了CTLA 4Ig的体内表达、TH1 TH2型细胞因子的表达。结果 单用CTLA 4Ig腺病毒基因治疗 ,或CTLA 4Ig腺病毒基因治疗联合单独的供体脾细胞或骨髓细胞能不同程度地延长异基因心脏移植物的存活 ,但不能延长皮肤移植物的存活。脾细胞、CTLA 4Ig腺病毒和骨髓细胞(SC Ad BMC)处理组的心脏移植物存活时间明显超过其它各耐受诱导组 ,并且能够诱导皮肤耐受。RT PCR实验证明 ,在受体内不同的组织CTLA 4Ig基因的表达量有所不同 ,并且随着时间的推移表达下降。TH1和TH2型细胞因子的检测显示 ,耐受大鼠体内未发现这两类细胞因子的偏移现象。MLR证明耐受大鼠的免疫应答表现为供体特异性降低 ,IL 2逆转实验、嵌合体检测表明 ,该耐受可能与?

CTLA-4基因多态性与儿童支气管哮喘易感性及外周血IFN-γ、IL-4和IgE的关系

目的研究CTLA-4基因多态性与儿童支气管哮喘易感性及外周血IFN-γ、IL-4和IgE的关系,为儿童支气管哮喘的诊断及治疗提供理论及临床依据。方法 2017年4月-2019年2月选择郑州大学第三附属医院儿童支气管哮喘患者78例为病例组,健康体检的正常儿童67例作为对照组,检测两组CTLA-4基因的rs231725单核苷酸多态性,同时检测病例组外周血IFN-γ、IL-4、IgE水平。结果病例组CTLA-4 rs231725 AA基因型比例高于对照组(66.7%vs. 19.4%),CTLA-4 rs231725 GG基因型比例低于对照组(19.3%vs. 73.2%)(P<0.05);病例组CTLA-4 rs231725 A等位基因频率比例高于对照组(73.7%vs. 23.1%)(P<0.05),CTLA-4 rs231725 G等位基因频率比例低于对照组(26.3%vs. 76.9%)(P<0.05);CTLA-4 rs231725 AG基因型IFN-γ、IL-4、IgE水平均高于GG基因型,差异有统计学意义(P<0.05);CTLA-4 rs231725各基因型及等位基因频率与有无支气管哮喘伴泌尿系统损害、支气管哮喘伴消化道反应无明显相关关系(P>0.05);CTLA-4 rs231725 AA基因型(OR=2.625,95%CI=1.273~5.138)及A等位基因频率(OR=1.987,95%CI=1.121~3.397)与支气管哮喘伴肾炎相关关系明显(P<0.05)。结论 CTLA-4 rs231725 AA基因型和A等位基因均与儿童支气管哮喘易感性增加相关;高水平的IFN-γ、IL-4、IgE可能是CTLA-4 rs231725 AA基因支气管哮喘易感性增强的原因。

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 Ig和anti—CD154单抗在移植中的研究进展

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原（CTLA）-4 Ig和anti—CD154单抗是目前器官移植的新型生物免疫抑制剂。两者均通过阻断协同刺激信号来抑制T淋巴细胞的活化，从而起到免疫耐受作用，在器官移植中有很好的应用前景。CTLA-4 Ig和anti—CD154单抗在动物模型实验中研究发现单用或联用有长久强效的免疫耐受作用能延长移植物的存活期。在临床中的应用尚处于初期，其临床副作用、安全性及长期的疗效有待进一步观察。