microRNA1917调控番茄乙烯信号负调控因子CTR4sv3的表达

为弄清Sly-miR1917以及其靶基因SlCTR4sv3在番茄生长发育和响应外界刺激中的表达模式,以中蔬6号番茄(Solanum lycopersicum L.Zhongshu 6)为试材,实时荧光定量PCR检测Sly-miR1917和SlCTR4sv3在番茄不同组织部位的表达,并结合生物信息学分析Sly-miR1917和SlCTR4sv3启动子顺式作用元件,调查了二者对相应激素和非生物胁迫的响应模式。此外,为进一步明确靶基因是否对Sly-miR1917存在反馈调控机制,应用Gateway重组技术将SlCTR4sv3和点突变后抗Sly-miR1917降解的mSlCTR4sv3连入超表达载体pB7YWG2,获得35S::SlCTR4sv3和35S::mSlCTR4sv3转基因阳性植株,检测相应植株中的SlymiR1917表达变化。结果显示:在番茄幼苗,成株叶片、花柄、花、成熟果实中Sly-miR1917与靶基因SlCTR4sv3表达模式呈负相关;茉莉酸、赤霉素、水杨酸、乙烯,以及干旱处理诱导SlCTR4sv3的表达量上调,而Sly-miR1917只在茉莉酸处理的幼苗中上调表达;35S::SlCTR4sv3株系中SlCTR4sv3表达量略高于野生型,而在抗Sly-miR1917降解的35S::mSlCTR4sv3转基因株系中显著升高,说明SlCTR4sv3表达水平受到Sly-miR1917的严格调控;此外,SlCTR4sv3的高表达会诱导Sly-miR1917的表达量上调,这一现象在35S::mSlCTR4sv3株系中尤为明显,暗示着SlCTR4sv3能够反馈调节Sly-miR1917的表达,二者严格而精确地调控模式为植物能够正确的响应乙烯提供保证。