超广谱β-内酰胺酶表型检测与CTX-M型酶基因型检测的相关性分析

目的了解采用双纸片协同法进行CTX-M酶的表型检测与多重PCR法检测基因型的相关性。方法按CLSI/NCCLS所推荐的方法进行ESBLs表型确证试验,多重PCR法对ESBLs表型阳性株进一步进行CTX-M酶基因型的检测。结果233株多重耐药革兰阴性杆菌中136株ESBLs表型阳性,经多重PCR扩增证实99株携带CTX-M型ESBL,CTX-M型ESBL检出率占ESBLs72.8%(99/136)。根据多重PCR检测结果再回顾性地观察表型检测结果,发现以头孢他啶和头孢他啶/棒酸这对纸片进行试验,产CTX-M型ESBLs细菌检出数为0;以头孢噻肟纸片及头孢噻肟/棒酸这对纸片进行试验,产CTX-M型ESBLs细菌检出率72.8%(99/136),其中用上述两对纸片共同检出产CTX-M型ESBLs细菌检出率41.7%(58/136)。结论以头孢噻肟,头孢噻肟/克拉维酸这对纸片可达到有效进行CTX-M酶的表型检测的目的;用头孢噻肟,头孢噻肟/克拉维酸、头孢他啶,头孢他啶/克拉维酸这两对纸片同时进行筛检超广谱β-内酰胺酶,可有效降低ESBLs漏检率。

与ISEcp1-like插入序列相关的CTX-M型ESBLs基因传播机制研究

目的研究CTX-M-ESBLs在天津地区肺炎克雷伯菌中的传播与ISEcp1-like插入序列及1类整合子的关系。方法采用PCR-mapping、Southern印迹杂交及DNA序列分析等方法检测CTX-M-ESBLs基因,及其与ISEcp1-like插入序列和1类整合子的关系。结果46株产ESBLs肺炎克雷伯菌中44株(95.7%)携带CTX-M-1组和(或)CTX-M-9组基因,未发现CTX-M-2组基因。60%的CTX-M-1组β内酰胺酶基因和73.7%的CTX-M-9组β内酰胺酶基因上游存在ISEcp1-like插入序列。ISEcp1-like插入序列与CTX-M-3及CTX-M-14基因间隔区序列不同。46株中25株(54.3%)携带1类整合子基因,PCR-mapping及Southern印迹杂交未发现CTX-Mβ内酰胺酶基因在整合子上的证据。结论天津地区肺炎克雷伯菌临床株中存在CTX-M-ESBLs的流行,许多CTX-M-ESBLs基因上游存在ISEcp1-like插入序列。ISEcp1-like插入序列可能与CTX-M型超广谱酶基因在天津市肺炎克雷伯菌临床株中的播散有关。